国家自然科学基金(30400039)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：丁乃峥王行明孙双午黄霁王丽更多>>
- 相关机构：中南大学东北林业大学湖南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省普通高等学校教学改革研究项目国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- FAAP的原核表达、纯化与抗体制备
- 2011年
- 目的构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体,表达H is-FAAP融合蛋白,制备FAAP蛋白的多克隆抗体。方法构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达H is-FAAP融合蛋白,用纯化的FAAP蛋白免疫昆明小白鼠后,制备多克隆抗体,通过W estern blotting检验抗血清的特异性和灵敏性。结果成功构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体。在大肠杆菌BL21中经1 m M的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)37℃诱导4 h后,融合蛋白有很高水平的表达。W esternblotting结果显示FAAP抗体能够有效地检测人血管内皮脐静脉细胞内FAAP蛋白的表达。结论成功地对FAAP进行了原核表达、纯化,抗FAAP小鼠的多克隆抗体具有较好的特异性,为进一步研究FAAP的结构与功能奠定了坚实的基础。
- 刘新发李镇安王行明郭海峰郭红山王丽丁乃峥
- 关键词：原核表达BLOTTING多克隆抗体
- 层黏连蛋白受体在小鼠睾丸和附睾中的表达
- 2011年
- 目的探讨层黏连蛋白受体(LAMR1)在小鼠睾丸和附睾中的表达。方法收集3只正常成年昆明小鼠睾丸和附睾。采用原位杂交和免疫组织化学方法,检测LAMR1 mRNA及蛋白在成年小鼠睾丸和附睾中的分布。结果 LAMR1 mRNA在附睾头和附睾尾表达最强;在睾丸生精细胞中也有表达。免疫组织化学结果显示,LAMR1蛋白从附睾头到附睾尾部表达逐渐增强,在睾丸生精细胞和附睾精子上也检测到了LAMR1蛋白的表达。结论 LAMR1在成年小鼠睾丸和附睾中具有区域特异性表达模式,并存在于附睾管精子中,表明其可能与附睾的某些功能有关,并可能参与精子发生和成熟等过程。
- 李善妮王行明孙双午王璐黄霁滕春波丁乃峥
- 关键词：层黏连蛋白受体睾丸附睾原位杂交免疫组织化学小鼠
