国家自然科学基金(81170166)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
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- 血管紧张素(-1-7)对血管紧张素Ⅱ在大鼠心脏成纤维细胞中信号转导的影响及其机制
- 2013年
- 目的探讨血管紧张素(-1-7)[Angiotensin(-1-7),Ang(-1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)在大鼠心脏成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)中信号转导的影响及其机制。方法原代分离培养并鉴定新生SD大鼠的CFs,将细胞分为8组:空白对照组、AngⅡ组、Ang(-1-7)组、AngⅡ+Ang(-1-7)组、AngⅡ+Ang(-1-7)+A-779组、AngⅡ+Ang(-1-7)+PAO组、Ang(-1-7)+PAO组和AngⅡ+PAO组,Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(Extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)和磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的表达;免疫沉淀捕捉分析法检测蛋白酪氨酸磷酸酶-1(Src-homology domain 2 containing protein tyrosine phosphatase-1,SHP-1)的酶活性;实时荧光定量PCR检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ,ColⅢ)基因mRNA的转录水平。结果 AngⅡ可增加细胞内p-ERK1/2的表达水平和p-ERK/ERK值(磷酸化的p-ERK1/2与总的ERK1/2的比值),Ang(-1-7)通过与Mas受体结合可拮抗AngⅡ引起的上述效应;Ang(-1-7)通过与Mas受体结合而激活胞内SHP-1的活性,并可拮抗AngⅡ所致的SHP-1活性降低;抑制SHP-1的活性后,Ang(-1-7)拮抗AngⅡ诱导的p-ERK1/2表达水平和p-ERK/ERK值增高的效应被抑制。Ang(-1-7)对TGF-β1、ColⅠ和ColⅢ基因mRNA的转录水平无显著影响,但可抑制AngⅡ所诱导的上述基因mRNA转录水平的增加。结论 Ang(-1-7)通过与Mas受体结合而激活SHP-1,该效应与Ang(-1-7)拮抗AngⅡ诱导的p-ERK1/2的表达水平和p-ERK/ERK值增高密切相关;Ang(-1-7)可抑制AngⅡ所诱导的TGF-β1、ColⅠ和ColⅢ基因表达上调,这些现象可能体现了一种Ang(-1-7)拮抗AngⅡ所致的不良效应的保护性机制。
- 考国营范晋奇张晓歌崔坤谭利苏立殷跃辉
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶细胞外信号调节激酶心脏成纤维细胞
- 血管紧张素转化酶2过表达对大鼠心肌梗死后心室重构的影响被引量：8
- 2013年
- 目的观察血管紧张素转化酶2(ACE2)过表达对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响,并探讨其可能的分子机制。方法 75只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、AMI组、生理盐水组(AMI+NS组)、报告基因组(AMI+AdEGFP组)和重组腺病毒AdACE2组(AMI+AdACE2组),每组15只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立AMI模型,AMI+NS、AMI+AdEGFP、AMI+AdACE2组于心肌梗死周边区各选取5个点分别注射生理盐水、AdEGFP和AdACE2,Sham组与AMI组不予注射。建模4周后测量血流动力学指标和心室质量;用组织学方法评价心肌组织结构变化与胶原沉积;用免疫组化染色检测心肌组织血管紧张素(Ang)Ⅱ(AngⅡ)、Ang-(1-7)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,蛋白质印迹法检测心肌组织ACE2、Src同源结构域2蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38、α-SMA及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达。结果 (1)与其他4组相比,AMI+AdACE2组ACE2表达水平升高(P<0.05),同时Ang-(1-7)表达也升高(P<0.05)。(2)与Sham组相比,AMI、AMI+NS及AMI+AdEGFP组左室舒张末压,心室质量/体质量比值,胶原沉积,梗死周边区AngⅡ、Ang-(1-7)、SHP-1、p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38、α-SMA、TGF-β1表达均升高(P<0.05)。(3)与AMI、AMI+NS及AMI+AdEGFP组相比,AMI+AdACE2组Ang-(1-7)、SHP-1表达升高(P<0.05),p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38、α-SMA及TGF-β1表达降低(P<0.05)。结论过表达ACE2可明显改善大鼠心肌纤维化进程,缓解心室重构,其机制可能与ACE2激活酪氨酸磷酸酶SHP-1,负性调节肾素-血管紧张素系统(RAS)下游丝裂原活化蛋白激酶(MAKPs)活性有关。
- 张波范晋奇张全军陈少杰殷跃辉
- 关键词：心肌梗死心室重构血管紧张素转化酶2
- 血管紧张素转换酶2过表达对大鼠急性心肌梗死后心室重构的影响及其分子机制被引量：7
- 2013年
- 目的探讨血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)过表达对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后心室重构的影响及其可能的分子机制。方法采用开胸结扎冠状动脉法建立SD大鼠AMI模型,将模型大鼠随机分为MI、MI+(NS)、MI+AdEGFP、MI+AdACE2组,另设SHAM(假手术)组,每组15只,MI+NS、MI+AdEGFP和MI+AdACE2组沿心肌梗死周边区选取5个点,通过直接心肌内注射方式分别注射NS、AdEGFP和AdACE2,SHAM和MI组不注射。术后4周末,采用Western blot法检测大鼠心肌梗死周边区心肌组织中ACE2、α-SMA、MKP-1、ERK1/2、p-ERK1/2、P38、TGF-β1蛋白的表达;HE染色后于普通显微镜下观察心肌组织结构及细胞炎症变化,天狼猩红-饱和苦味酸染色后于普通显微镜及偏振光显微镜下分别观察心肌胶原表达分布情况;SP免疫组化染色法检测大鼠心肌梗死周边区心肌组织中AngⅡ、Ang(1-7)、α-SMA蛋白的表达,同时采用ELISA法检测Ang(1-7)蛋白的表达;使用羟脯氨酸试剂盒检测大鼠心肌梗死周边区心肌组织中羟脯氨酸含量。结果术后4周末,MI+AdACE2组大鼠心肌梗死周边区心肌组织中ACE2蛋白的表达量显著高于其他各组,同时Ang(1-7)蛋白的表达量也显著升高(P<0.05);与SHAM组相比,MI、MI+NS、MI+AdEGFP组大鼠心肌梗死周边区心肌组织中AngⅡ、Ang(1-7)、α-SMA蛋白的表达量显著升高(P<0.05),MI+AdACE2组与MI、MI+NS、MI+AdEGFP组相比,AngⅡ、α-SMA蛋白表达水平降低,Ang(1-7)蛋白表达水平升高更显著;与MI、MI+NS、MI+AdEGFP各组相比,MI+AdACE2组大鼠心肌梗死周边区心肌组织中MKP-1蛋白的表达水平明显增加(P<0.05),p-ERK、P38、TGF-β1蛋白的表达水平降低,羟脯氨酸含量显著降低(P<0.05);HE染色和天狼猩红-饱和苦味酸染色证实,ACE2对AMI后梗死周边区的炎症反应和胶原重塑均有明显的改善作用。结论 ACE2在心肌过表达能有效改善大鼠AMI后心肌梗死周边区心肌纤
- 张全军殷跃辉吕瑾范晋奇邹立力张波
- 关键词：血管紧张素转换酶2急性心肌梗死心室重构
- 糖皮质激素对阵发性心房颤动射频消融术后复发的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨糖皮质激素的使用对阵发性心房颤动(AF)患者导管射频消融(RFCA)术后AF复发的影响。方法本研究连续入选2011年1月至2014年4月在该院心血管内科行环肺静脉RFAC术,并在术后使用糖皮质激素的阵发性AF患者50例(激素治疗组),并选取同期行RFCA术,术后未使用糖皮质激素的阵发性AF患者37例作对照组。术后1周、1个月、3个月、6个月、9个月、12个月,由固定医生进行电话或门诊随访,询问患者有无心悸症状或脉搏不齐,收集患者院外心电图报告,行十二导联心电图和24h动态心电图检查,分析、比较激素治疗组和对照组的AF复发情况。结果术后1周,激素治疗组和对照组窦性心律维持率分别为80.0%和54.1%,两组差异有统计学意义(P<0.05),激素治疗组复发率显著降低;术后1个月,激素组和对照组窦性心律维持率分别为80.0%和67.6%,两组差异无统计学意义(P=0.187);激素组和对照组术后12个月的AF复发率差异无统计学意义(P=0.711)。绘制Kaplan-Meier生存率曲线,行Log-rank检验,两组AF复发率差异无统计学意义(P=0.711)。结论术后早期小剂量糖皮质激素使用能够降低RFCA术后超早期(7d内)的房颤复发,但对术后极早期(术后1个月)和中期(术后12个月)房颤复发率无影响。
- 徐燕萍龚志琰胡鑫渝殷跃辉
- 关键词：心房颤动导管消融术糖皮质激素类复发
- ACE2过表达对大鼠心肌梗死后心室重构的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨携带ACE2基因的重组腺病毒载体(Ad-ACE2)转染对大鼠心肌梗死(MI)后心室重构的影响及其机制。方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠75只,8～10周龄,体质量200～250 g,结扎左冠状动脉前降支,建立SD大鼠MI模型,完全随机分为心梗组(MI组)、生理盐水组(NS组)、空载体组、Ad-ACE2组(转染Ad-ACE2组),并另设假手术组(n=15)。NS组、空载体组、Ad-ACE2组分别以直接心肌内注射方式沿梗死周边区选取5个点注射NS、Ad-EGFP及Ad-ACE2,假手术组及MI不予以任何注射。术后4周检测并评价相关指标。结果①与假手术组比较,Ad-ACE2组ACE2蛋白表达增加(P<0.05)。②与MI组比较,Ad-ACE2组肌纤维排列紊乱,肌丝断裂,细胞核固缩、碎裂等现象明显减轻;Ⅰ、Ⅲ型胶原表达均减少。③免疫组化与ELISA结果显示:与假手术组比较,MI组、NS组、空载体组及Ad-ACE2组AngⅡ、Ang-(1-7)蛋白表达均增高(P<0.05);与MI组比较,Ad-ACE2组AngⅡ蛋白表达降低(P<0.05),Ang-(1-7)蛋白表达增高(P<0.05)。④免疫印迹结果显示:与MI组比较,Ad-ACE2组MMP-9蛋白表达降低(P<0.05),TIMP-1蛋白表达水平增加(P<0.05),且MMP-9/TIMP-1的比值降低。⑤与假手术组比较,MI组、NS组、空载体组的TGF-β和α-SMA表达增高(P<0.05),而Ad-ACE2组表达降低(P<0.05)。结论过表达ACE2可改善心肌纤维化,缓解心室重构,其机制可能与其调节肾素-血管紧张素系统,下调MMP-9、TGF-β及α-SMA的表达,维持MMP-9/TIMP-1的比例平衡有关。
- 吕瑾刘增长张全军范晋奇苏立殷跃辉
- 关键词：心肌梗死血管紧张素转换酶2基质金属蛋白酶9心室重构
