东莞市科技项目(2008105150148)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：刘赴平师玲玲幺俊卿许惠芯王立生更多>>
- 相关机构：东莞市中心血站暨南大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：东莞市科技项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐血混合培养纯化人间充质干细胞及生物学特性研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨体外分离、混合培养纯化人脐血间充质干细胞的适宜体系,观察该人脐血间充质干细胞生物学特性。方法收集孕足月新生儿脐血,每3份脐血[(70—100)ml/份]混合;采用1.077 g/ml的淋巴细胞分离液(Ficoll)以1 500 r/min密度梯度离心法分离脐血中的单个核细胞,在Mesencult培养基中贴壁培养筛选人脐血间充质干细胞,显微镜下观察细胞生长形态变化,细胞计数并绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞抗原表达,分析细胞周期;体外诱导脐血间充质干细胞成脂、成骨分化。结果密度梯度离心法所获得的单个核细胞,在培养基中培养约3—5 h开始出现贴壁生长,24 h后贴壁细胞增多,呈明显纺锤状,10 d后开始出现细胞克隆,3周后呈漩涡状生长。原代培养时间为15 d,P1代倍增时间为26 h。流式细胞仪鉴定:贴壁生长的细胞表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34、CD45。分化潜能鉴定体外培养细胞可以成脂、成骨分化。结论所贴壁培养出的细胞的生长形态、流式表形、分化潜能具有人脐血间充质干细胞生物学特征,混合培养可以提高间充质干细胞培养成功率,实验中采用的培养体系适宜人脐血间充质干细胞的分离培养。
- 师玲玲刘赴平王德文许惠芯幺俊卿崔四平陈少彬
- 关键词：体外分离单个核细胞生物学特性
- 人脐血间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝损伤被引量：5
- 2011年
- 目的：探讨人脐血间充质干细胞对急性肝损伤大鼠模型的治疗作用。方法：体外培养人脐血间充质干细胞。60只SD大鼠随机分为3组,各20只：空白对照组、模型对照组、治疗＋模型组。模型对照组大鼠采用体积分数50%四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射造成急性肝损伤疾病模型,测定ALT/AST水平、肝脏切片HE染色评估造模效果。治疗＋模型组大鼠进行开腹手术,肝脏局部多点注射人类脐血间充质干细胞悬液（3×106~5×106/只）,24h后采用体积分数50%四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射诱导急性肝损伤疾病模型。分析移植后24h实验动物存活率、肝功能改善情况及移植细胞的肝内分化情况。结果：体外培养的人脐血间充质干细胞符合间充质干细胞的一般生物学特性。模型组与治疗＋模型组实验动物存活率有统计学差异（P〈0.05）。两组实验动物肝功能（AST/ALT水平）间差异有统计学意义（P〈0.05）。移植细胞在受试动物肝脏内呈人类肝样细胞方向分化趋势。结论：人间充质干细胞移植可提高急性肝损伤大鼠模型的存活率。
- 师玲玲刘赴平王立生
- 关键词：急性肝损伤
- 人类脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠体内分化潜能的实验研究
- 2011年
- 目的探索人类脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠体内肝样细胞自主分化的潜能。方法体外分离培养人类脐血间充质干细胞。CC l4橄榄油溶液腹腔注射SD大鼠建立急性肝坏死大鼠模型。造模24 h后肝脏局部注射移植人类脐血间充质干细胞给急性肝坏死大鼠模型,造模后1周、2周和4周分别处死6只模型鼠,取肝脏切片做免疫组织化学检测人类特异性ALB、AFP、HepPar的表达,实时荧光RT-PCR检测人类特异性ALB、AFP、CK19、CK18的表达,测序扩增产物。结果体外分离培养的脐血来源细胞符合人类脐血间充质干细胞的生物学特性。处死移植模型鼠,肝脏免疫组织化学检测显示:人类特异性ALB、AFP、HepPar在接受移植的模型鼠体内呈阳性表达;实时荧光RT-PCR检测显示:人类特异性ALB、AFP、CK19、CK18在接受移植的模型鼠体内呈阳性表达,扩增产物序列与GENEBANK对应序列一致。结论无外部诱导干预,人类脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠体内已具有肝样细胞自主分化潜能。
- 师玲玲刘赴平陈虎许惠芯幺俊卿
- 关键词：肝坏死
