国家自然科学基金(30340011)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 相关作者：李燕杨小昂冯珍如徐国宾王月丹更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院北京大学香港科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SARS病毒S1蛋白N端片段在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的 :获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白N端部分 ,研究其与机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制。方法 :将编码SARS病毒S1蛋白N端 334个氨基酸残基的基因进行克隆 ,并在原核表达系统中表达 ,获得了纯化的重组蛋白。利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清 ,鉴定纯化的重组S1蛋白片段。结果 :克隆表达的重组蛋白基因序列与公布的SARS病毒S1蛋白N端的基因序列相同 ,所表达的重组蛋白相对分子质量约为 6 4 0 0 0。 3份SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应 ,在相对分子质量 6 4 0 0 0处形成特异性的反应条带 ,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应。结论 :获得的重组蛋白与SARS病毒抗体呈现特异性的反应 ,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和制备SARS病毒的重组疫苗奠定基础。
- 杨小昂董学员李燕李云燕徐国宾冯珍如王月丹陈慰峰
- 关键词：冠状病毒属原核表达系统重组疫苗大肠杆菌
- SARS病毒S2基因的克隆、表达、纯化及其免疫学特性研究被引量：13
- 2004年
- 目的 :在大肠杆菌中表达SARS病毒S2与硫氧还原蛋白 (Trx)的融合蛋白 ,并对其进行血清学鉴定。方法 :克隆编码SARS病毒S2蛋白的基因 ,并在原核表达系统中表达了 6×His S2硫氧还原融合蛋白。用Westernblot分析纯化Trx S2融合蛋白 ,分别与 6份SARS流行前的正常人血清和 6份SARS患者恢复期血清的反应性。结果 :Westernblot分析表明 ,6份SARS患者的恢复期血清均能识别Trx S2融合蛋白 ,且在Mr为 76× 10 3 附近出现特异性的结合带 ;而 6份SARS流行前的正常人血清则不与Trx S2融合蛋白起反应。结论 :本研究获得了纯化的SARS病毒Trx S2融合蛋白 ,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性结合反应 ,为研究SARS病毒感染宿主细胞的过程和制备针对SARS病毒的重组疫苗提供了条件。
- 董学员杨小昂李燕徐国宾冯珍如王月丹陈慰峰
- 关键词：SARS病毒纯化
- SARS病毒S1蛋白重组C端片段免疫效果的实验研究被引量：1
- 2004年
- 为获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白C端 ,研究其刺激机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制 ,将编码SARS病毒S1蛋白C端 311个氨基酸残基的基因克隆 ,并在原核表达系统中表达 ,纯化获得了的重组蛋白。利用SARS患者恢复期的血清 ,对纯化的重组S1蛋白进行血清学分析。结果表明 ,本研究中克隆表达的重组蛋白序列与公布的SARS病毒S1蛋白C端的序列相同 ,其编码的重组蛋白相对分子质量约为 5 90 0 0Mr。SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应 ,在5 9 0 0 0Mr处形成特异性的反应条带 ,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应。在本研究中获得的重组蛋白可以为研究SARS病毒识别宿主细胞受体的过程及其机制提供条件。
- 王月丹李燕杨小昂董学员冯珍如Sin Wan Yee徐国宾谢雍陈慰峰
- 关键词：SARSS蛋白免疫应答
