国家自然科学基金(30371697)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 相关机构：四川大学泸州医学院更多>>
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- 中心组合设计法优化前阳离子脂质体的制备工艺被引量：2
- 2007年
- 目的:采用中心组合设计法优化前阳离子脂质体的制备工艺,考察前阳离子脂质体的有关性质。方法:以薄膜分散膜挤压法制备前阳离子脂质体,以平均粒径、转染效率为指标,对鱼精蛋白(protamine)与质粒DNA的质量比、CHETA([2[[4-[羧甲基]二硫-1-亚氨丁基]氨基]乙基]氨基甲酸胆固醇酯)摩尔百分比浓度、CHETA与质粒DNA的质量比3个自变量的各个水平进行二项式拟合,通过响应面分析选取较佳工艺条件。以LacZ为报告基因转染HepG2细胞,定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量计算转染效率。结果:影响平均粒径、转染效率的3个主要因子的最佳取值分别为:protamine/DNA,2.5∶1;CHETA(mol%),45;CHETA/DNA,4∶1。优化条件制备的前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径为(228.9±8)nm,多分散指数为0.122±0.02(n=3),Zeta电位为-(25.08±2.5)mV(n=3),载基因前阳离子脂质体转染HepG2肝癌细胞转染效率为(24.26±2.6)mUβ-半乳糖苷酶/mg protein。结论:中心组合设计应用简便、预测性好,制备的前阳离子脂质体符合设计要求。
- 钟志容刘中兵张志荣何勤
- 关键词：鱼精蛋白转染效率
- 前阳离子脂质体的构建及有关性质研究被引量：2
- 2007年
- 目的制备前阳离子脂质体并考察其相关性质。方法化学合成含二硫键的胆固醇衍生物(2-[[4-[(羟甲基)二硫]-1-亚氨丁基]氨基]乙基]氨基甲酸胆固醇酯,CHETA);薄膜分散-膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA再与空白前阳离子脂质体作用,形成载基因前阳离子脂质体;粒度电位测定仪测定前阳离子脂质体的粒径和Zeta电位,电镜观察形态;考察在二硫键还原酶二硫苏糖醇的作用下前阳离子脂质体Zeta电位变化情况;以LacZ为报告基因转染HepG2细胞,X-gal原位染色定性观察,并定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量计算转染效率。结果前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径为145.8 nm(PDI=0.086),Zeta电位为-33.83 mV,载基因前阳离子脂质体转染肝癌细胞HepG2转染效率为12.18 mU.mg-1protein,是裸质粒的10.5倍。结论二硫键修饰的前阳离子脂质体是具有发展潜力的非病毒载体。
- 钟志容邓勇刘戟张志荣宋庆国何勤
- 关键词：基因治疗二硫键转染效率
- 转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体制备及其表达研究被引量：6
- 2007年
- 本文制备、优化转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体,并研究其相关性质。通过薄膜分散膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA与空白前阳离子脂质体作用形成载基因前阳离子脂质体(PLPD);转铁蛋白(transferrin,Tf)再与PLPD作用形成转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体(Tf-PLPD);中心组合设计优化制备工艺;以lacZ为报告基因转染人肝癌细胞株HepG2;测定形态、粒径、电位和转染效率。结果显示,PLPD形态近似于球体,平均粒径为(228.9±8.0)nm,多分散指数为0.122±0.020(n=3);zeta电位为(-25.08±2.50)mV(n=3),转染效率(12.18±3.80)mU.mg-1(protein)。Tf-PLPD平均粒径为(240±12)nm,多分散指数为0.150±0.030(n=3);zeta电位为(-24.10±2.50)mV(n=3);转染效率(24.26±2.60)mU.mg-1(protein)是裸质粒的20倍;实验结果也表明血清的存在不影响PLPD和Tf-PLPD的转染效率;PLPD和Tf-PLPD小于阳离子脂质体LPD对人肝癌细胞HepG2,SMMC7721和张氏正常肝细胞3种细胞株的毒性。由此可见,转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体作为基因转运的非病毒载体具有良好的应用前景。
- 钟志容刘戟邓勇张志荣宋庆国何勤
- 关键词：转铁蛋白转染效率
- 转铁蛋白及其受体作为药物载体的研究进展被引量：8
- 2006年
- 目的介绍转铁蛋白及其受体在药学中的应用和新的研究方向。方法通过查阅近年来国内外有关转铁蛋白和转铁蛋白受体特点及其应用的文献,综述了转铁蛋白和转铁蛋白受体的特点和分类;转铁蛋白转运金属离子的能力;利用转铁蛋白受体的抗体向脑部转运药物的应用;转铁蛋白和转铁蛋白受体的抗体与药物的结合方法及应用。结果转铁蛋白具有多态性,主要被划分为血清转铁蛋白、卵(清)转铁蛋白和乳(清)转铁蛋白;转铁蛋白受体主要有转铁蛋白受体1和转铁蛋白受体2;转铁蛋白既能转运金属离子又能转运化学药物及基因药物,并在利用转铁蛋白受体的抗体向脑部转运药物方面显示出巨大的应用前景;转铁蛋白可与药物通过静电引力直接吸附,也可以与药物通过共价键结合。结论转铁蛋白及转铁蛋白受体在靶向药物转运中得到了有效的应用,并将受到更为广泛的关注。
- 钟志容何勤刘戟
- 关键词：转铁蛋白转铁蛋白受体药物载体
