国家自然科学基金(30660100)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 香蕉条斑病毒CP区基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达被引量：4
- 2007年
- 依据锌指结构在BSVCP上的可能位置合成了2条引物,通过PCR扩增得到长约640 bp的目的片段;将目的片段与质粒pET28 b(+)连接,构建了含BSVCP区基因的融合蛋白原核表达载体pET28b-BSVCP;克隆测序以确定其阅读编码框的正确性,然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),并诱导表达;经IPTG诱导后,出现一特异的约30 kDa融合蛋白质表达条带。
- 邱世明庄军刘志昕
- 关键词：外壳蛋白原核表达
- 香蕉条斑病毒PCR检测方法的正交优化被引量：2
- 2009年
- 香蕉条斑病毒引起的香蕉条斑病,对香蕉生产的危害越来越严重,因此对该病毒的检测也变得很重要。而PCR法已广泛用于植物病毒的检测,所以控制PCR的反应条件对结果的准确性有很大影响。由于在检测过程中使用的是较为敏感的简并引物,因此对PCR反应条件的要求较高。本文采用L9(34)正交设计对PCR体系的反应条件进行了优化。最终获得最佳反应条件为Mg2+1.5mmol/L,dNTP0.15mmol/L,Primer0.5μmol/L,TaqDNA聚合酶1.5U。通过最佳反应条件对采集回来的其他带BSV的植株叶片和吸芽的总DNA进行PCR扩增,其结果均表现为比较稳定。
- 陈善辉王健华刘志昕
- 关键词：正交法聚合酶链式反应
- 海南香蕉条斑病毒的检测被引量：4
- 2010年
- 香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)是香蕉上一种重要的病毒。本文运用血清学检测法和PCR检测法对海南主栽巴西蕉(Musa Cavendish,AAA)、粉蕉(Musa Pisang Awak,ABB)进行了BSV的调查检测。结果表明,参试无症状或症状各异的样品血清学检测结果均为阴性,说明这些被测品中可能不含有游离BSV粒子;上述样品中部分样品的PCR检测结果却为阳性,将PCR扩增的特异条带回收、测序和比对,显示确实扩增到BSV部分基因组序列。结合血清学检测结果,说明海南部分香蕉的基因组已经整合了BSV的基因组序列。
- 陈善辉王健华曾燕君刘志昕
