国家教育部博士点基金(20060246074)
- 作品数：3 被引量：22H指数：2
- 相关作者：戴文达董健林红方涛林李熙雷更多>>
- 相关机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人骨髓间充质干细胞结合多孔β-TCP构建生物相容性人工骨被引量：3
- 2009年
- 研究人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)结合多孔β磷酸三钙(β-TCP)的生物相容性与体内成骨作用。密度梯度离心结合差异贴壁法分离HBMSCs,常规扩增传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR;分别在成骨、成软骨和成脂肪细胞培养基中定向诱导分化,验证其多向分化能力。将HBMSCs在低压下载入多孔β-TCP立方块,形成MSCs/β-TCP复合物,电镜观察材料内部与细胞结合情况。继续成骨诱导培养2周后植入裸鼠背部皮下,于植入4周和8周后取出复合物做组织学检查。设非成骨诱导培养复合物为对照。原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好;流式细胞仪检测间充质细胞来源表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,造血细胞来源表面标记物CD34、CD45和HLA-DR阴性;能成功高效定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞;细胞在β-TCP材料表面贴附、增殖良好;MSCs/β-TCP复合物植入皮下4周后即有少量新骨生成,至8周时更明显;对照组新骨生成量较少。本方法快速、高效分离扩增HBMSCs;HRMSCs与多孔可降解β-TCP材料生物相容性良好;二者结合能显著提高体内新骨生成,提示其可用于临床作为骨移植替代物,可提高骨移植修复骨缺损的疗效。
- 戴文达林红方涛林李熙雷董健陈峥嵘
- 关键词：人骨髓间充质干细胞成骨细胞Β-TCP骨生成
- 间充质干细胞与其诱导血管内皮细胞联合种植构筑血管化组织工程骨修复兔大段骨缺损被引量：1
- 2008年
- 目的研究间充质干细胞（MSC）与其诱导的血管内皮细胞（Ec）联合种植于多孔β-磷酸三钙（β-TCP）构筑血管化组织工程骨修复大段骨缺损的作用。方法制备兔双侧尺骨1．5cm骨缺损共64侧，分4组修复（n=16），A空白未治疗组，B单纯材料组（植入β-TCP），C组织工程骨组（植入MSC＋β-TCP），D血管化组织工程骨组（植入MSC＋EC＋β-TCP），各组交叉配对。术后4、8、12、16周行X线片、放射性核素骨显像、大体解剖、组织切片、生物力学等检查，观察各组骨缺损修复效能及移植物血管化情况。结果D血管化组织工程骨组完美修复骨缺损，且修复效能及血管化情况优于C组织工程骨组，C组织工程骨组优于B单纯材料组，A空白组未能修复骨缺损。各组结果差异有统计学意义（均P〈0.05）。结论MSC与其诱导EC联合种植构筑的血管化组织工程骨能促进成骨过程和新生骨的血管化，显著提高组织工程骨修复大段骨缺损的能力。
- 林红戴文达方涛林董健
- 关键词：组织疗法骨生成
- 人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定被引量：18
- 2008年
- 目的探索一个高效分离和扩增人骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。方法抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR。在地塞米松、左旋VitC、β-磷酸甘油、FK506作用下向成骨细胞诱导分化;在TGF-beta3、重组人胰岛素、丙酮酸钠、亚硒酸等作用下向软骨细胞诱导分化;在地塞米松、IBMX、吲哚美辛的作用下向脂肪细胞诱导分化;在VEGF、bFGF作用下向血管内皮细胞分化。结果原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好。细胞表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性。经定向诱导分化后,细胞分别呈现成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的表型特征。结论该方法能从人骨髓中高效分离和扩增MSCs,能成功定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞。
- 戴文达方涛林李熙雷林红董健陈峥嵘
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养细胞分化
