国家高技术研究发展计划(715-009-0150)
- 作品数：9 被引量：100H指数：6
- 相关作者：胡蕴玉滕勇白建萍王臻熊卓更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院清华大学兰州军区乌鲁木齐总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划兰州军区医药卫生科研基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- PLLA/TCP复合骨组织载体框架的低温挤出成形被引量：12
- 2003年
- 为制备骨组织工程的细胞与因子的三维载体框架,提出了聚左旋乳酸/磷酸三钙(PLLA/TCP)复合材料快速成形的低温挤出成形工艺,研究了此工艺制备骨组织载体框架的设备与工艺过程。分析了制备的载体框架的孔隙结构、孔隙率、力学性能,并通过犬桡骨20mm节段性缺损的修复实验分析了制备的载体框架的生物相容性、体内降解性能和骨传导性能。制备的载体框架具有良好的综合性能,可以作为骨组织再生修复的载体框架。
- 熊卓颜永年张超胡蕴玉徐建强郑卫国
- 关键词：骨组织工程聚左旋乳酸磷酸三钙PLLATCP
- 快速成型聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架修复兔桡骨缺损被引量：25
- 2011年
- 背景:理想的骨修复材料除必须具有生物相容性、可吸收性、利于血管化及迅速被新生组织替代的孔隙率,还需要有与骨组织相似三维结构。目的:检验快速成型工艺制作的聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架复合骨形态发生蛋白修复兔桡骨缺损的效果。方法:将乳酸乙醇酸共聚物溶于1,4-二氧六环中并混合粉末状磷酸三钙制备成液态的浆料,放入生物材料快速成形机TissFormTM制备出直径5mm,长15mm的圆柱形人工骨载体材料。按每个材料15mg的标准,采用预湿、负压复合骨形态发生蛋白、冻干3步处理,制备出活性人工骨材料。健康新西兰大白兔20只,制备右前肢桡骨中上段15mm骨缺损模型,实验组和对照组分别植入复合骨形态发生蛋白的活性人工骨和未复合骨形态发生蛋白的单纯支架。通过影像学、组织学、材料降解及骨密度评价修复兔桡骨缺损的效果。结果与结论:12周时实验组骨缺损愈合,新生骨痂连接缺损断端并塑形,支架材料近于完全降解,各检测指标与对照组比较差异均有显著性意义,对照组骨缺损内未见新骨形成。结果表明复合骨形态发生蛋白的聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架可以很好的修复兔15mm骨缺损,且降解速度与成骨速度匹配良好。
- 孙梁熊卓
- 关键词：磷酸三钙骨形成蛋白桡骨缺损骨组织工程
- 人松质骨来源基质细胞克隆培养与成体干细胞特性研究被引量：4
- 2007年
- 目的观察培养的人松质骨来源基质干细胞是否具有骨髓来源基质干细胞的多向分化的成体干细胞特性。方法取股骨、髂骨3 mm×3 mm×3 mm松质骨,剪碎冲洗,用有限稀释法进行克隆培养,然后对传代细胞用化学药物或生长因子进行成骨、成软骨以及心肌细胞分化诱导培养,并检测成骨、成软骨及心肌细胞表型。结果克隆培养细胞培养2周开始表达CD29、CD59、CD116;成骨诱导条件下2周细胞开始表达Ⅰ型胶原、骨钙素,至第28天碱性磷酸酶阳性率可达95%;成软骨诱导条件下细胞表达Ⅱ胶原,甲苯胺蓝染色阳性;心肌细胞诱导条件下细胞表达肌钙蛋白,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测有MLC-2V的mRNA表达,4周左右可见细胞连接形成合胞体样结构生长,并有自发性搏动。结论人松质骨来源基质干细胞具有多向分化能力的基质干细胞,在临床和实验研究中可以替代骨髓来源的间充质干细胞。
- 滕勇胡蕴玉王臻关玉成白建萍
- 关键词：细胞培养分化成体干细胞克隆
- 永生化人骨髓基质干细胞系的生物学特征被引量：2
- 2010年
- [目的]明确永生化人骨髓基质干细胞系MSCxj的生物学特征。[方法]MSCxj细胞在连续体外培养过程中,相差显微镜及透射显微镜观察细胞的形态特征;计算群体倍增时间,测定细胞增殖周期,计算克隆形成率等生长增殖特征并与原代人骨髓基质干细胞BMSCs-2比较。[结果]细胞形态为成纤维细胞样,细胞器发达;群体倍增时间40.8 h,较BMSCs-2的43.82 h短,MSCxj生长增殖活跃;MSCxj克隆形成率10.9%,BMSCs-2为11.5%,具有克隆形成能力。[结论]MSCxj细胞保持了人骨髓基质干细胞的生物学特征。
- 滕勇胡蕴玉宿学家李旭升白建萍张德志
- 关键词：骨髓基质干细胞生物学细胞系
- 骨组织工程聚左旋乳酸多孔框架快速成形研究被引量：16
- 2002年
- 为制备用于骨组织工程的细胞载体框架结构 ,对快速成形技术制备聚左旋乳酸多孔框架结构的若干基础问题进行了研究。提出了聚左旋乳酸快速成形的精密挤出成形工艺 ,研究了此工艺制备多孔框架结构的设备与工艺过程 ,分析了制备的多孔框架结构应用于组织工程人工骨的可行性。制备的多孔框架结构具有合适的分子量、孔隙结构、孔隙率、机械强度和生物降解性能 。
- 熊卓颜永年张人佶孙磊张曙明
- 关键词：骨组织工程聚左旋乳酸孔隙结构孔隙率机械强度
- hTERT激活人骨髓间充质干细胞端粒酶活性被引量：3
- 2007年
- [目的]明确外源性人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)能否激活人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchyme stem cell,hBMSC)的端粒酶活性。[方法]培养人骨髓间充质干细胞,采用脂质体转染法,将编码hTERT基因的真核表达质粒pCIneo-hTERT导入单克隆培养的人骨髓间充质干细胞。利用G418加压筛选,稳定后,用RT-PCR检测hTERT mRNA的表达,Western Blot检测其蛋白质表达,专用检测盒RT-PCR法检测端粒酶的活性。[结果]骨髓间充质干细胞转染质粒pCIneo-hTERT后,生长状态良好。加G418后第2d,细胞开始悬浮,逐渐死亡。第10d,未转染组细胞在G418作用下全部死亡,转染组细胞开始克隆增殖。G418浓度降至100μg/ml维持筛选,20d左右开始出现明显抗G418细胞克隆。转染后细胞,表达hTERT的 mRNA及其蛋白,同时端粒酶活性显著增高。[结论]将外源性hTERT导入人骨髓间充质干细胞可以激活细胞的端粒酶活性,为建立永生化细胞系奠定了基础。
- 滕勇胡蕴玉王捍国宿学家王臻关玉成高杰
- 关键词：人端粒酶逆转录酶端粒酶人骨髓间充质干细胞基因
- 铜铬合金连续定向凝固工艺与缺陷分析
- 本文研究了铬相增强铜的连续定向凝固的工艺条件,如结晶器长度、冷却距离、金属液温度、牵引速度、冷却水量等相互之间的匹配关系。研究了铜铬合金的显微组织及其表面缺陷形成的原因,并提出了防止其表面缺陷的措施。
- 刘杏王自东谢建新王贵清吴春京胡汉起
- 关键词：连续定向凝固
- 文献传递
- 高性能铜合金线材制备加工技术
- 电子信息技术、交通运输、国防部门等对铜及铜合金线材性能的要求越来越高,其需求量也越来越大,高性能铜及铜合金线材的制备与成形加工技术也日益受到重视。本文介绍了制备高性能铜及铜合金线材的现有主要方法——单晶连铸法、合金化法、...
- 谢建新王自东
- 文献传递
- 端粒酶反转录酶基因介导的人骨髓基质干细胞永生化研究被引量：6
- 2010年
- 目的建立永生化人骨髓基质干细胞系,为组织工程提供种子细胞库及标准化细胞系。方法取单克隆培养的人骨髓基质干细胞,采用脂质体转染法将人端粒酶反转录酶(hTERT)基因导入细胞,G418筛选后获得阳性克隆,体外连续扩增培养,RT-PCR检测转染细胞内hTERT基因的整合与表达。取转染后第100代细胞,用成骨诱导条件培养基(普通培养基加地塞米松、β-甘油磷酸、维生素C)、软骨诱导条件培养基(普通培养基加地塞米松、TGF-β、维生素C)、心肌细胞诱导条件培养基(普通培养基加5-氮胞苷)分别向成骨、软骨、心肌细胞诱导培养。于培养后第7、14、21、28天,采用免疫细胞化学染色观察成骨细胞诱导Ⅰ型胶原、骨钙素的表达;采用茜素红染色观察钙结节形成;采用免疫细胞化学染色观察软骨细胞诱导Ⅱ型胶原的表达,同时进行甲苯胺蓝染色;采用免疫细胞化学染色观察心肌细胞诱导横纹肌肌动蛋白的表达,分析细胞系向成骨、软骨及心肌细胞分化的能力。结果 hTERT稳定转染入人骨髓基质干细胞,转化细胞端粒酶表达阳性。转化细胞在体外长期连续培养下生长良好,已传至136代。取第100代细胞进行诱导分化,结果显示其能向成骨、软骨及心肌细胞分化。结论外源性hTERT的导入可致人骨髓基质干细胞永生化,并维持成体干细胞的多向分化特性,可为组织工程提供种子细胞库并为组织工程种子细胞研究提供标准化细胞。
- 滕勇胡蕴玉王捍国王臻关玉成高杰
- 关键词：基因细胞永生化骨髓基质干细胞
- 骨膜成骨细胞分离培养的方法被引量：25
- 2001年
- 目的 探讨骨膜成骨细胞分离培养的最佳方法 ,为骨组织工程的研究提供稳定可靠的种子细胞来源 .方法 分别以组织块法、酶消化法和联合法分离培养兔骨膜成骨细胞 ,观察原代培养的成功率、细胞生长曲线、成骨细胞的表型特征 .结果 组织块法原代培养耗时较长 ,成功率低 ;酶消化法细胞增殖快但有大量的杂细胞掺入 ;联合法提高了组织块成活率 ,并维持了较高的成骨细胞表型 .结论 胶原酶短时预消化的联合法能够在较短时间内获得高纯度的成骨细胞 ,效果优于传统的组织块法和酶消化法 。
- 张超胡蕴玉白建萍徐建强
- 关键词：细胞培养成骨细胞骨移植骨组织工程
