国家自然科学基金(30460128)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 抗乙酰胆碱受体单链抗体酵母表达的特性鉴定
- 2007年
- [目的]探讨毕赤酵母GS115表达的重症肌无力单链抗体A7的一般特性及与大鼠肋间肌乙酰胆碱受体的结合特异性.[方法]采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹试验,检测已经转化至毕赤酵母GS115中的重症肌无力重组载体pPIC9K-ScFvA7表达的单链抗体A7蛋白的分子质量;应用间接免疫荧光技术确定表达蛋白与大鼠肋间肌乙酰胆碱受体的亲和性.[结果]毕赤酵母GS115培养上清液中有目的蛋白的表达,分子质量约为44ku;间接免疫荧光试验显示,在大鼠肋间肌细胞间有荧光出现.[结论]单链抗体A7可以在毕赤酵母中成功地表达,并且可与大鼠肋间肌乙酰胆碱受体结合.
- 穆永佳温爱萍韩晓敏李红花李英信姜京植孟繁平
- 关键词：单链抗体重症肌无力
- 由人免疫球蛋白转基因小鼠制备人抗乙酰胆碱受体单克隆抗体被引量：1
- 2006年
- 目的：从人免疫球蛋白（Ig）转基因小鼠制备人源性抗乙酰胆碱受体（AChR）单克隆抗体。方法：以电鳐（Torpedo）AChR（tAChR）作为基础免疫原，分别以tAChR或人AChR（hAChR）α亚单位1～210位氨基酸（Hα1-210）与thioredoxin（Trx）融合制备的融合蛋白Trx-Hα1-210作为加强免疫原，注射人Ig转基因小鼠。应用ELISA检查由该小鼠制备的杂交瘤细胞培养上清液中人源性抗tAChR或抗Trz-Hα1-210单克隆抗体的分泌，应用放射免疫测定法（RIA）测定抗tAChR或抗Trx-Hα1-210单克隆抗体与hAChR的交叉反应性。结果：从tAChR作为加强免疫原组小鼠得到433株分泌人源性抗tAChR单克隆抗体的细胞株，从抗Trx-Hα1-210作为加强免疫原组小鼠得到20株分泌人源性抗Trx-Hα1-210单克隆抗体的细胞株。但这些人源性抗体均不能与hAChR起交叉反应。结论：由人Ig转基因小鼠制备人源性抗AChR单克隆抗体是可行的。
- 杨康鹃孟繁平李辉齐栋李芳芳Stassen MDe Baets M
- 关键词：转基因小鼠乙酰胆碱受体单克隆抗体重症肌无力
- 重症肌无力转基因小鼠模型的建立被引量：2
- 2006年
- [目的]建立人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．[方法]用电鳐电器官分离纯化的乙酰胆碱受体免疫人免疫球蛋白转基因小鼠，以肌肉收缩力判定病情，以放射免疫测定法测定动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度及动物全身肌肉乙酰胆碱受体浓度．[结果]实验动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度为6～296nmol，全身肌肉乙酰胆碱受体损失率最高达65％，部分动物出现肌肉收缩无力表现．[结论]成功地建立了人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．
- 李红花金桂花孟繁平李英信李芳芳孙昌元金权鑫Stassen Mde Baets M
- 关键词：重症肌无力小鼠
- 电鳐乙酰胆碱受体诱导转基因小鼠重症肌无力的机制
- 2006年
- [目的]探讨电鳐乙酰胆碱受体诱导人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力的机制．[方法]将电鳐电器官分离并纯化的乙酰胆碱受体作为免疫原，免疫人免疫球蛋白转基因小鼠，以放射免疫方法测定小鼠血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度，以免疫荧光技术观察小鼠骨骼肌中抗乙酰胆碱受体抗体的结合性．[结果]小鼠血清中的抗乙酰胆碱受体抗体滴度为155～539pmol，小鼠肌肉中具有人抗乙酰胆碱受体抗体．[结论]电鳐乙酰胆碱受体刺激人免疫球蛋白转基因小鼠产生的人抗乙酰胆碱受体抗体，可与肌肉组织中的乙酰胆碱受体结合，导致肌肉收缩无力，可诱导重症肌无力．
- 金桂花李红花孟繁平李英信李芳芳孙昌元金权鑫M.StassenM.deBaets
- 关键词：重症肌无力受体胆碱能小鼠转基因
- 重症肌无力特异性免疫吸附剂的制备及对患者血清的静态吸附作用被引量：5
- 2005年
- 目的制备一种对重症肌无力(myastheniagravis,MG)致病性乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)具有特异性吸附作用的免疫吸附剂。方法利用悬浮再生法,用环氧氯丙烷活化羟基,以人乙酰胆碱受体(AChR)主要免疫原区10氨基酸多肽作为配基固定于球型纤维素上制备MG特异性免疫吸附剂,以色氨酸为配基制备非特异性免疫吸附剂。应用酶联免疫吸附试验测定其对MG患者血清的静态吸附率。结果以AChR主要免疫原区10氨基酸多肽为配基的吸附剂对AChRAb的吸附率为(4033±229)%,以色氨酸为配基的吸附剂的吸附率为(2235±147)%。结论以球型纤维素为载体,以AChR主要免疫原区10氨基酸多肽作为配基的特异性吸附剂对于MG的治疗可能是一种很有前途的方法。
- 王玉祥孟繁平俞耀庭尹春燕金桂花
- 关键词：重症肌无力免疫吸附剂
- 重症肌无力患者抗乙酰胆碱受体抗体的测定及意义被引量：5
- 2006年
- 用ELISA法对56例重症肌无力(MG)患者治疗前后的血清乙酰胆碱受体(AchR)抗体进行了检测。检测结果为MG患者治疗前后的血清AchR抗体阳性率46.4%。而且发病年龄越大,患者体内AchR抗体阳性率越高。患者患病时间越长体内AchR抗体含量降低。伴发胸腺瘤的患者AchR抗体阳性率明显高于胸腺正常者,全身型MG患者AchR抗体检测阳性率高于眼肌型患者。
- 景少巍马文环李红花马文杰李英信孟繁平
- 关键词：重症肌无力乙酰胆碱受体抗体ELISA
