国家重点基础研究发展计划(2005CB522601)
- 作品数：95 被引量：273H指数：9
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- 肌内皮缝隙连接对失血性休克大鼠血管收缩反应的影响被引量：11
- 2006年
- 目的研究肌内皮缝隙连接(MEGJ)对失血性休克大鼠内皮依赖性和非依赖性血管收缩反应的影响。方法56只SD大鼠按随机数字表法分为去甲肾上腺素(NE)组和杨梅黄酮组;NE组分为正常对照以及休克0、0.5、1和2h5个亚组;杨梅黄酮组分为正常对照以及休克0、0.5、1、2、3和4h7个亚组。各组取其肠系膜上动脉(SMA)制成血管环,分别测量在18α甘草次酸(18αGA)作用前后血管环对NE和杨梅黄酮反应性的变化。结果SMA血管环对NE的反应性表现为:休克0h和0.5h组明显高于正常对照组和其他休克时间点组,休克1h和2h组明显低于正常对照组和休克0h和0.5h组;18αGA对NE诱导的SMA血管环收缩反应性无明显影响。SMA血管环对杨梅黄酮的反应主要表现为:休克0、0.5、1和2h组明显高于正常对照组,于休克2h达最高点;休克3h和4h组明显低于正常对照组,运用18αGA阻断MEGJ后,各组血管环的收缩反应性较18αGA作用前明显下降,其中以休克1、2和3h组下降幅度明显大于其他组。结论失血性休克后早期,内皮依赖和非依赖性的血管收缩反应均有不同程度代偿性增加,休克1h和2h表现为非内皮依赖性血管收缩反应下降,休克3h和4h表现为内皮依赖性血管收缩反应明显降低;MEGJ在休克后内皮依赖性血管收缩反应的变化中起重要调节作用。
- 明佳刘良明李涛杨光明徐竞
- 关键词：内皮依赖性血管收缩反应
- 内皮细胞屏障与烧伤后血管通透性的关系及机制被引量：14
- 2007年
- 正常血管通透性的维持有赖于血管内皮细胞屏障的完整性，内皮细胞与内皮细胞间、细胞与基底膜间的连接以及胞内骨架蛋白收缩这3种力量，经蛋白质相互作用，在功能和调节上互相关联。烧伤休克的主要临床特点是低血容量性休克，其主要原因之一是毛细血管扩张，血管通透性增加，毛细血管静水压增加，促进了血浆样液体的渗出，导致血容量锐减。关于内皮细胞屏障功能在烧伤后血管通透性变化中的作用，我们近年来做了一些研究工作。
- 黄巧冰
- 关键词：烧伤通透性细胞骨架紧密连接部肌动蛋白类
- 一种安全高效的血红蛋白纯化方法被引量：4
- 2011年
- 目的:建立一种适用于大量制备的,安全、高效的血红蛋白纯化方法。方法:将压积红细胞装入透析袋,以含有还原剂的Tris缓冲液透析破碎,破碎的上清经两级硫酸铵沉淀后透析至上样缓冲体系,离心后取上清即得血红蛋白提取液;红细胞提取液通过阴离子交换柱层析进一步分离,计算回收率。纯化产物浓缩后以SDS-PAGE及HPLC鉴定纯度,进行紫外-可见光谱扫描并以ABL800血气分析仪分析血气指标,以鲎试剂测定内毒素含量,以磷测定法测定脂质含量。结果:血红蛋白提取液中脂质去除率98%,容易通过0.45μm滤膜;经阴离子交换层析纯化的血红蛋白经SDS-PAGE(银染法)及WB分析没有杂蛋白条带,HPLC分析纯度>99%、总回收率>85%;内毒素含量<2 EU,高铁血红蛋白含量<5%。结论:该血红蛋白纯化方法安全高效、成本低廉、易于放大生产,具有较好的应用前景。
- 臧家涛刘建仓徐竞李东红刘良明
- 关键词：血红蛋白硫酸铵沉淀纯化
- 依那普利拉对严重烫伤大鼠早期心肌损害的防治作用被引量：12
- 2007年
- 目的了解依那普利拉对烧伤后早期心肌损害的防治效果。方法将60只SD大鼠制成30%TBSAⅢ度烫伤模型,分为单纯烫伤组(30只,伤后常规补液)和依那普利拉组(30只,伤后立即一次性腹腔注射依那普利拉1 mg/kg并行常规补液)。另取6只大鼠不致伤作为正常对照组。检测正常对照组及2组烫伤大鼠伤后1、3、6、12、24 h血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)的含量、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)的活性,并观察心肌组织病理学变化。结果(1)单纯烫伤组大鼠伤后各时相点cTnI、CK-MB均显著高于正常对照组(P<0.01)。依那普利拉组伤后各时相点cTnI为(1.32±0.12)～(2.47±0.22)μg/L,均显著低于单纯烫伤组[(6.42±0.96)～(15.10±3.69)μg/L,P<0.01];其各时相点CK-MB活性为(438±68)～(5569±322)U/L,亦均低于单纯烫伤组[(2556±74)～(8047±574)U/L,P<0.05或P<0.01]。(2)与正常对照组比较,单纯烫伤组伤后出现心肌细胞浊肿、间质血管扩张充血、炎性细胞浸润等病理改变;依那普利拉组病变程度较之减轻。结论大鼠严重烫伤后早期心肌组织受损明显,依那普利拉能显著减轻这些损害。
- 张兵钱黄跃生张家平张东霞党永明王广胡炯宇雷泽源肖荣
- 关键词：烧伤心肌依那普利拉
- Cx40和Cx43调节大鼠肠系膜上动脉收缩反应性与钙敏感性的机制被引量：6
- 2008年
- 目的:研究连接蛋白Cx40/Cx43对大鼠肠系膜上动脉内膜依赖的血管收缩反应性与钙敏感性的调节作用机制。方法:以SD大鼠肠系膜上动脉(SMA)为研究对象,用Cx40或Cx43反义寡脱氧核苷酸(Cx40/Cx43AODN)阻断SMA Cx40或Cx43表达,观察缺氧处理后SMA的收缩反应性、钙敏感性、肌球蛋白轻链磷酸酶/激酶(MLCP/MLCK)的活性、20kD的肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化程度的变化。结果:Cx40AODN可以降低正常组、1h和3h缺氧组SMA MLCP活性,增加MLC20磷酸化水平,改善血管的钙敏感性和内膜依赖的收缩反应性;Cx43AODN可以增加各组血管的MLCP活性,减少MLC20磷酸化水平,降低血管的钙敏感性和内膜依赖的收缩反应性。Cx40和Cx43AODN对SMA MLCK活性无明显作用。结论:Cx40和Cx43主要通过调节血管平滑肌细胞的MLCP活性和MLC20磷酸化水平调节血管的钙敏感性,从而调节休克后内膜依赖的血管收缩反应性。
- 明佳杨光明李涛张瑗徐竞刘良明
- 关键词：血管低反应性连接蛋白40连接蛋白43钙敏感性
- 热休克蛋白90对大鼠缺氧心肌细胞丝氨酸苏氨酸蛋白激酶表达的影响
- 2007年
- 目的探讨内源性热休克蛋白90(HSP 90)在缺氧心肌细胞丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)相关信号通路中的作用。方法建立新生Wistar大鼠心肌细胞缺氧模型,将细胞分为正常组、缺氧组、加入HSP 90特异性阻断剂格尔德霉素后再缺氧组(格尔德霉素+缺氧组)。于缺氧后1、3、6、12、24、48 h用噻唑蓝法检测心肌细胞的活力;缺氧24 h,原位缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡指数(AI);缺氧1、3、6、12、24 h,蛋白质印迹法检测大鼠心肌细胞中内源性HSP 90及AKT表达水平。结果(1)缺氧24、48 h,缺氧组、格尔德霉素+缺氧组细胞活力均较正常组明显下降(P<0.05);格尔德霉素+缺氧组细胞活力缺氧12 h即开始明显下降,缺氧48 h时明显低于缺氧组(P<0.05)。(2)缺氧24 h,缺氧组细胞AI为(10.7±1.2)%,明显高于正常组[(1.9±0.3)%,P<0.05];格尔德霉素+缺氧组细胞AI为(26.3±5.3)%,明显高于缺氧组(P<0.01)。(3)缺氧12 h,缺氧组心肌细胞内源性HSP 90及AKT表达水平高于正常组与格尔德霉素+缺氧组;缺氧24 h,缺氧组有所下降,格尔德霉素+缺氧组则下降更明显。结论内源性HSP 90对维持心肌细胞的活力有重要作用,缺氧心肌细胞AKT表达水平可受内源性HSP 90表达水平的影响。
- 赵晓辉彭毅志王元元黄跃生
- 关键词：缺氧HSP蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 缺氧诱导因子-1α对失血性休克血管反应性的调控作用及机制被引量：3
- 2007年
- 目的探讨失血性休克(hemorrhagic shock,HS)后大鼠肠系膜上动脉血管组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)表达变化规律及其调控血管低反应性发生的相关机制。方法取大鼠HS模型肠系膜上动脉(superior mensenteric artery,SMA),离体血管环技术检测SMA血管反应性,RT-PCR法分析HIF-1α及内皮型一氧化氮合酶(endothelial-nitro oxide nitroxide synthase,eNOS)和环氧合酶-2(cy-clooxygenase-2,COX-2)的mRNA表达变化规律。分别采用硝酸还原酶法和放射免疫法测定其血浆NO和PGI含量变化。结果与正常组相比,HS后HIF-1α、eNOS和COX-2 mRNA表达及其相应血浆产物NO和PGI含量显著增加。血管反应性表现为早期增高、晚期降低的双相变化。寡霉素处理可使eNOS和COX-2mRNA及其产物NO和PGI表达表现不同程度受抑,对血管反应性表现为对早期的升高趋势的部分抑制和晚期低反应性的改善作用。结论HIF-1α可能通过对eNOS-NO和COX-2-PGI通路,在休克后血管反应性双相向变化的形成中发挥重要调节作用。
- 张瑗刘良明林秀来李涛徐竞
- 关键词：缺氧诱导因子失血性休克血管反应性
- 连接蛋白37，40，43在失血性休克大鼠肠系膜上动脉中的表达变化及其意义
- 2008年
- 目的连接蛋白（Cx）37，40，43在失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA）中的表达变化及其意义。方法取休克后不同时相点的SD大鼠SMA，运用RT—PCR和Western blot检测Cx37，40，43的表达变化；运用反义寡脱氧核苷酸（AODN）转染技术检测Cx40，43对SMA反应性的影响。结果Cx37，40在休克后表达逐渐下降，休克后2h表达最低，休克后3，4h表达逐渐升高；Cx43在休克后即刻表达迅速降低，以后进行性表达升高，在休克后2h达最高点，休克后3，4h表达再次降低；Cx40 AODN可以增加血管环内膜依赖性的收缩和舒张反应；Cx43 AODN可以抑制血管环的收缩和舒张反应。结论Cx40和Cx43参与了失血性休克后内膜依赖的血管舒缩反应性的调节。Cx40具有抑制休克后内膜依赖的血管舒缩反应性的作用；Cx43具有促进休克后内膜依赖的血管舒缩反应性的作用。
- 明佳李涛杨光明徐竞张瑗刘良明
- 关键词：休克肠系膜上动脉连接蛋白类血管收缩血管舒张
- 缺血预适应诱导PKCα、PKCε活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性保护的机制
- 2010年
- 目的观察缺血预适应是否通过腺苷受体,诱导蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性保护。方法采用高效液相色谱法测定缺血预适应过程中腺苷浓度变化;采用western blot技术,观察A1、A2A、A2B、A3腺苷受体(A1、A2A、A2B、A3adenosine receptor,A1R、A2AR、A2BR、A3R)抑制剂对缺血预适应诱导PKCα和PKCε表达和转位的影响;采用离体微血管环张力测定技术,观察腺苷受体抑制剂对缺血预适应诱导失血性休克血管反应性和钙敏感性保护作用的影响。结果 (1)休克2小时后血浆腺苷浓度较正常对照组显著增高,5%失血量预适应可进一步增高休克后的血浆腺苷浓度,以在休克前30分钟缺血预适应组的腺苷浓度最高(P<0.01);(2)5%失血量休克前30分钟预适应可促进PKCα和PKCε由胞浆向胞膜的转位(P<0.01),A1R拮抗剂可显著抑制缺血预适应导致的PKCα和PKCε的转位,使PKCα的胞膜/胞浆部分比值分别由1.071回降至0.583,使PKCε的胞膜/胞浆部分比值由1.280回降至0.606(P<0.01),A2AR、A2BR和A3R拮抗剂没有明显作用;(3)5%失血量休克前30分钟预适应可诱导血管反应性和钙敏感性的保护作用(P<0.01),A1R拮抗剂可以显著抑制其保护作用,使去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和Ca2+的最大收缩力(Emax)分别降低59.3%和53.4%(P<0.01),A2AR、A2BR、A3R拮抗剂均无显著抑制作用。结论缺血预适应通过A1R,诱导PKCα和PKCε活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性的保护。
- 徐竞李涛杨光明刘良明
- 关键词：血管反应性钙敏感性腺苷受体
- 抗内毒素Fab’对严重烧伤早期炎症细胞因子的影响
- 2008年
- 目的观察抗内毒素Fab’对严重烧伤早期肠源性内毒素血症小鼠肠道损伤的保护作用。方法采用严重烧伤早期肠源性内毒素血症小鼠模型，分为烧伤组、治疗组及对照组，分别于6、12、24、48h四个时相点测定血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-10的浓度。结果与正常对照组比较，烧伤后血清TNF-α、IL-1β、IL-10水平增高，差异有统计学意义（P〈0．01）；治疗组血清TNF-α、IL-1β、IL-10水平较烧伤组显著降低（P〈0．01）。病理检查结果提示治疗组较烧伤组肠黏膜损伤明显减轻。结论抗内毒素Fab’能抑制内毒素所诱导的TNF-α、IL-1β产生，同时调节血清中的IL-10水平，减轻内毒素对机体的损害，从而起到对严重烧伤后肠源性脓毒症的防治作用。
- 庄颖张雅萍马思远
- 关键词：白细胞介素-10肠源性脓毒症
