广西壮族自治区科技攻关计划(1123007-3)
- 作品数：13 被引量：120H指数：6
- 相关作者：卢冰霞何颖赵武秦毅斌梁家幸更多>>
- 相关机构：广西兽医研究所广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 屠宰猪肠道沙门氏菌的分离鉴定、耐药性分析及致病性试验被引量：50
- 2012年
- 为了解广西南宁市猪源沙门氏菌的污染状况、耐药状况及致病力情况,在南宁市某生猪屠宰场随机直接从131头屠宰猪的肠道采集样品,采用鉴别培养基分离,生化鉴定的方法对样品中的沙门氏菌进行分离鉴定,并采用标准K-B纸片法对分离菌株进行25种抗生素敏感试验,最后对分离株进行小白鼠致病性试验。结果从131份屠宰猪的肠道中共分离到沙门氏菌45株,检出率为34.35%;其中鼠伤寒沙门氏菌14株,甲型副伤寒杆菌2株,肠炎沙门氏菌3株。45株分离菌株全部耐药,耐药率高达100%,其中44株为多重耐药菌株,占97.78%。45株沙门氏菌中有40株对小白鼠具有致病性,致病率达88.89%。这表明南宁市的屠宰猪存在一定程度的沙门氏菌污染,并且分离菌株存在较严重的耐药现象以及具有较强的致病性。应采取有效措施控制沙门氏菌在猪群中的污染和限制抗生素在养猪过程中的使用并严格遵守休药期,以减少细菌耐药性的产生,保障猪肉及猪肉制品的食品安全。
- 黄福标卢冰霞刘磊郭旋张民秀兰家暖廖承球赵彩群黄伟坚
- 关键词：沙门氏菌耐药性
- 猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用被引量：3
- 2013年
- [目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg;特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9%。反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用。
- 卢冰霞刘磊秦毅斌赵武梁家幸郭旋黎木兰李斌何颖苏乾莲梁保忠闭炳芬黄伟坚
- 关键词：RT-LAMP敏感性特异性
- 一起由副猪嗜血杆菌导致陆川猪呼吸障碍病例的确诊
- 2013年
- 副猪嗜血杆菌病是引起陆川猪呼吸道疾病的主要传染病之一,主要临床症状表现为咳嗽、呼吸困难、消瘦、跛行和被毛粗乱。主要剖检病变表现为胸膜炎、心包炎、腹膜炎、关节炎和脑膜炎等。2012年8月,广西陆川某猪场出现2月龄～4月龄仔猪群呼吸障碍的病例,表现为高热、咳嗽、食欲下降、可视粘膜发绀等临床症状。通过实验室检测病原为副猪嗜血杆菌,而猪肺炎支原体、圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒为阴性。确诊该猪场本次疫情由副猪嗜血杆菌感染导致。
- 李莹莹赵武秦毅斌何颖梁家幸李斌卢冰霞段群棚苏乾莲梁保忠闭炳芬陆芹章
- 关键词：副猪嗜血杆菌猪肺炎支原体圆环病毒2型猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 1986--2011年广西猪瘟流行监测及遗传变异分析被引量：7
- 2013年
- 采用Nested-PCR方法对采自广西各地1986-2011年间,199个猪场(养殖户)的1 521份样品进行CSFV、PRRSV、PCV2、PRV、HPS等病原的检测及流行病学调查,结果发现广西猪瘟以混合感染为主,病性复杂。尽管保育猪发病仍占第1位,但近年来母猪繁殖障碍、无症状带毒感染的发病率已明显提高。通过对25年来收集的77株广西CSFV流行株E2基因的比较分析,发现广西猪瘟流行株分为基因I群和II群,目前仍未发现基因III群。起源于欧洲大陆的S2.1亚型毒株已经成为广西的优势流行株,多引起临床的急性和亚急性感染;以SHIMEN株为代表的中国经典毒株S1.1亚型是造成母猪繁殖障碍、隐性带毒感染的主要毒株。流行于20世纪80-90年代间的基因S2.2及S2.3亚型毒株已经基本消失,值得进一步研究。广西CSFV流行株E2蛋白部分关键氨基酸位点已经发生变异,可能会导致疫苗的不完全保护。
- 谭颖翌毛燕吴健敏覃绍敏马玲白安斌廖文军欧阳康周松峰
- 关键词：CSFVE2
- 广西部分地区猪细环病毒的分子流行病学调查被引量：3
- 2013年
- 为了解近年来才被发现的一种新型人畜共患DNA病毒——细环病毒在广西猪群中的流行情况,采用巢式PCR方法检测95份采自广西不同猪场、屠宰场的血清和组织样品(淋巴结、脾、肺),并挑选部分阳性样品进行基因克隆。结果显示,被检猪群中普遍存在细环病毒感染,TTSuV1和TTSuV2的阳性率分别为37.9%和20.0%,两者的混合感染率为11.6%。获得的9条TTSuV1和10条TTSuV2基因序列与NCBI上发布的参考序列同源性分别为81.8%～99.7%和79.2%～99.2%;遗传进化分析表明,广西猪群中流行的TTSuVs主要为TTSuV 1a、TTSuV 1b和TTSuV 2a。
- 洪绍锋刘磊刘欢郭旋黎木兰卢冰霞莫彦宁龙凤刘德清黄伟坚
- 关键词：分子流行病学
- 猪支原体肺炎研究进展
- 猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的是一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,极大危害养猪业的健康发展。随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是...
- 李莹莹何颖赵武李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸陆芹章
- 关键词：猪支原体肺炎病原学疫苗
- 猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP 4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc 1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos 2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。
- 李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因克隆生物信息学
- 抗猪瘟病毒单链抗体基因的构建及其推导的蛋白质三级结构的分子模拟被引量：6
- 2015年
- 为利用抗猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)单链抗体基因(ScFv)建立CSFV病原快速检测方法,以抗猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),以柔性多肽(Gly4Ser)3为接头(Linker),经重叠延伸反应将VH、VL基因拼接为完整的CSFV-ScFv基因,并进行克隆、测序分析。结果显示,所克隆单链抗体基因全长732 bp,包括363 bp的VH、45 bp的Linker和324 bp的VL,为VH-Linker-VL结构,编码的氨基酸序列含有明确的互补决定区(CDR)和框架区(FR)以及特征性的半胱氨酸残基,并与多种鼠源单链抗体基因高度同源,具有重组功能性鼠源抗体可变区特征。对CSFV-ScFv基因所编码蛋白质三级结构进行预测,显示其形成口袋样形状的空间构象,理论上具有良好的抗原结合活性。表明本研究成功构建了CSFV-ScFv基因。
- 刘金凤吴健敏覃绍敏白安斌陈凤莲曹颖颖
- 关键词：猪瘟病毒单链抗体分子模拟
- 广西猪源沙门菌血清学分型及生物被膜形成能力的研究被引量：3
- 2014年
- 为了研究近年广西地区流行猪源沙门菌的血清型和生物被膜形成能力,对从广西区内不同地区规模猪场分离鉴定的35株沙门菌,用玻片凝集法进行血清学分型;应用结晶紫染色微量板定量法检测菌株的生物被膜形成能力。结果显示:试验菌株分属14种血清型,所有菌株均具有生物被膜形成能力:20株弱成膜能力,4株中等成膜能力,11株强成膜能力。其中,鼠伤寒沙门菌的成膜能力较强。
- 蹇慧黎木兰艾佛德刘芳方小文杨洋黄伟坚
- 关键词：沙门菌血清型生物被膜
- 广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析被引量：6
- 2014年
- 为了解广西陆川猪肺炎支原体（Mhp）地方流行毒株的主要免疫原性表面蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点，试验以2011至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎（MPS）阳性病料为研究对象，抽提DNA进行PCR扩增，将克隆出与目的基因大小相符的片段回收，再与载体连接，转化到大肠杆菌DH5“感受态细胞中，筛选阳性克隆及测序，扩增获得4株Mhp毒株（GXLC1、GXLC2、GXLC3和GXLC4），随后用DNAStar软件对P46基因序列进行比对分析。结果表明，已克隆出的P46基因序列长度为1104bp，编码368个氨基酸，其中该序列中含有3个编码色氨酸的TGA密码子，而不是终止密码子；1个CGG为编码精氨酸的稀有密码子，而不是其他支原体中的无义密码子。所获得的4株Mhp毒株的P46基因序列与所参考的MhpJ株、232株、7448株及168株的核苷酸同源性为98．4％～99．4％，氨基酸同源性为98．6％～99．5％，毒株之间P46基因的同源性很高，保守性较强。
- 李莹莹赵武李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸何颖周英宁陆芹章
- 关键词：猪肺炎支原体P46基因克隆
