广东省自然科学基金(4009358)
- 作品数：4 被引量：11H指数：1
- 相关作者：王海军徐伟光朱永红黄锦桃李海标更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 垂体腺瘤细胞的体外培养及其应用研究进展被引量：1
- 2006年
- 垂体腺瘤的细胞培养已有40多年的历史,是研究该瘤生物学特性、病因、发病机制、药物的筛选和诊疗措施等方面的重要手段,它包括鼠和人各种垂体腺瘤细胞的培养,鼠垂体腺瘤细胞的培养技术较为成熟,已成功建立了许多稳定的细胞系,在基础研究领域起重要作用。人垂体腺瘤细胞的培养较为困难,培养方法主要包括悬浮细胞培养,单层细胞培养,灌流系统和反相溶血空斑试验(RHPA),其中单层细胞培养为目前常用方法。垂体腺瘤细胞的培养主要研究内容包括腺瘤细胞的体外增殖情况,基础激素分泌和动力学研究,在各种类型的垂体腺瘤的基础和临床研究中得到广泛应用。
- 徐伟光王海军
- 关键词：垂体腺瘤细胞体外培养
- 侵袭性垂体腺瘤成纤维细胞的体外培养及其生物学特性被引量：1
- 2007年
- 目的建立入侵袭性垂体腺瘤成纤维细胞分离培养的方法,探讨其生物学特性及其在垂体瘤侵袭性生长中的作用。方法差速贴壁筛选法分离培养侵袭性垂体腺瘤成纤维细胞,进行原代及传代培养,倒置相差显微镜下观察原代及传代细胞形态及生长特性,免疫组化染色进行成纤维细胞鉴定,MTT法绘制传代细胞的生长曲线,电镜观察其超微结构。结果侵袭性垂体腺瘤成纤维细胞体外培养生长状况良好,具有活跃的增殖能力。细胞胞体较大,形态不规则,细胞质中可见丰富的粗面内质网和核糖体,高尔基复合体发达,I型胶原及波形蛋白表达率在95%以上。结论应用差速贴壁筛选法成功培养出侵袭垂体腺瘤成纤维细胞,其具有旺盛的增殖能力,可能在垂体瘤侵袭性生长过程中起重要作用。
- 徐伟光朱永红黄锦桃王海军
- 关键词：垂体腺瘤成纤维细胞细胞培养
- 侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤成纤维细胞的生长及凋亡比较被引量：1
- 2006年
- 目的分析比较侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤原代细胞培养中成纤维细胞的增殖及凋亡的差别,探讨成纤维细胞在垂体腺瘤侵袭性生长中的作用。方法分别对10例侵袭性和10例非侵袭性垂体腺瘤组织进行原代和传代细胞培养,对成纤维细胞进行形态学及细胞增殖速度观察, 免疫组织化学染色法检测成纤维细胞Ⅰ型胶原和波形蛋白的表达,比较两组成纤维细胞的DNA合成代谢,流式细胞仪(FCM)检测两组成纤维细胞凋亡。结果侵袭性垂体腺瘤原代细胞培养过程中,第1～2天即可见到成纤维细胞,到第8天左右几乎长满单层,非侵袭性垂体腺瘤原代细胞培养过程中,第10天左右才可见到极少数的成纤维细胞生长,1个月后长满单层,成纤维细胞呈Ⅰ型胶原及波形蛋白阳性表达,侵袭组成纤维细胞的DNA合成量明显高于非侵袭组成纤维细胞(t= 28．28,P<0．05),侵袭组细胞凋亡占细胞总数的(1．4±0．4)％,非侵袭组凋亡细胞占总数的 (5．8±1．2)％,两组差别有统计学意义(t=11．00,P<0．05)。结论侵袭性垂体腺瘤中的成纤维细胞增殖快,凋亡少,垂体腺瘤的侵袭性生长可能与成纤维细胞的增殖有关。
- 徐伟光朱永红王海军何东升黄锦桃冯雷
- 关键词：垂体腺瘤侵袭性成纤维细胞细胞凋亡
- 人垂体腺瘤细胞原代培养的纯化及其激素的表达与分泌被引量：8
- 2006年
- 目的探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。方法采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养,方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法,方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸(D-valineDMEMD-valine)培养液,方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征,放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素(growthhormone,GH)、泌乳素(prolactin,PRL)的表达。结果3种方法均能成功培养出垂体腺瘤细胞,呈圆形或椭圆形,其纯度随培养时间的延长逐渐下降,培养第20天其平均纯度分别为40%,46%,96%。方法Ⅲ明显高于方法Ⅰ和方法Ⅱ,差异具有显著性意义(P<0.01);培养液中均含有相应激素,且3种方法的激素分泌量没有统计学差异(P>0.05);腺瘤细胞分别呈GH,PRL阳性表达,成纤维细胞表达I型胶原。结论方法Ⅲ可得到纯度达95%以上的人垂体腺瘤细胞,纯化后的细胞可分别呈GH和PRL阳性表达并具有良好的激素分泌功能,为进一步研究人垂体腺瘤的发病机理、药物治疗和颅外移植等方面奠定了实验基础。
- 徐伟光王海军黄锦桃刘爱军李海标朱永红
- 关键词：垂体腺瘤细胞培养生长激素泌乳素
