国家重点基础研究发展计划(2005CB522905)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王钰郭东春耿宏伟张云韩宗玺更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学黑龙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 番鸭呼肠孤病毒p10.8蛋白致细胞凋亡功能被引量：2
- 2009年
- 为确定番鸭呼肠孤病毒(DRV)p10.8蛋白的生物学功能,本研究采用RT-PCR方法扩增DRVS14株p10.8编码基因,将其克隆到真核表达载体中,构建了重组表达质粒pcDNA-p10.8;通过转染鸭胚成纤维细胞(DEF),首次对p10.8蛋白的凋亡功能进行了研究。细胞转染48h后,Hoechest、DNALadder和TUNEL法的细胞凋亡检测结果显示:光镜下可见细胞形态学上出现的细胞皱缩,Hoechest染色后可见细胞核固缩,染色质凝固成团块状;DNALadder法可检测到凋亡细胞DNA样品呈梯形条带;TUNEL法可观察到褐色调亡细胞的存在。以上结果均表明,p10.8在DEF中的表达具有诱导宿主细胞凋亡的作用,是番DRV的凋亡蛋白。
- 张云郭东春耿宏伟王钰魏萍
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒凋亡细胞
- 抗番鸭呼肠孤病毒σB蛋白单克隆的制备和鉴定（英文）
- σB蛋白是番鸭呼肠孤病毒的主要结构蛋白,可诱导机体产生群特异性中和抗体。但是,目前抗σB蛋白的单克隆抗体还没有制备和鉴定。经大肠杆菌中表达、纯化的His-σB融合蛋白免疫雌性BALB/c小鼠制备抗σB蛋白的单克隆抗体。共...
- 张云陈小丹李永峰刘明童光志
- 文献传递
- 犬蝠源呼肠病毒的分离与鉴定
- 2007年
- 【目的】从野生蝙蝠体内分离病毒,为开展蝙蝠的病原监测奠定基础。【方法】从广东省韶关采集了30份野生犬蝠样品,研磨后接种Vero E6细胞,从中分离到2株病毒,对其中一株病毒进行研究,使用生物学与分子生物学方法确定其分类学地位。【结果】该毒株在Vero E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落。反复冻融3次后,收集细胞及培养液,电镜观察发现,病毒粒子无囊膜,有双层衣壳,呈正二十面体对称,将病毒命名为Bat/China/2003(B/03)。红细胞凝集试验表明该病毒能凝集健康人O型血红细胞,不能凝集SPF鸡、实验用普通级牛、大鼠和豚鼠的红细胞。理化特性试验表明该病毒对氯仿有抵抗力、能耐受pH3.0的酸性环境、50℃水浴1h病毒丧失感染能力、1mol·L-1MgCl2能提高病毒对热的抵抗力。病毒基因组经琼脂糖凝胶电泳分大、中、小3个区段。用哺乳动物呼肠病毒特异性引物进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增得到了预期大小的片段。测序结果经NCBI BLAST分析表明,与呼肠病毒科正呼肠病毒属的Ndelle virus核苷酸同源性最高为91.2%。用DNAMAN Multiple Alignment进行序列同源性分析,与哺乳动物呼肠病毒血清1、2、3型的代表株T1L,T2J,T3D的核苷酸同源性分别为89.9%、76.9%、89.9%。【结论】由以上结果推断该病毒为呼肠病毒科的成员。
- 冉旭华邵昱昊韩宗玺陈露菲孔宪刚刘胜旺
- 关键词：犬蝠呼肠病毒
- 果子狸源呼肠孤病毒的分离鉴定
- 在广东省采集的果子狸样品共192份,处理后接种Vero-E6细胞,从中分离到1株病毒。该病毒在Vero-E6细胞上盲传至第4代开始出现细胞病变,表现为细胞内颗粒增多,细胞收缩、变圆,最后细胞从瓶壁脱落。经电镜观察发现,病...
- 邵昱昊韩宗玺陈露菲孔宪刚刘胜旺
- 关键词：果子狸呼肠孤病毒
- 文献传递
