内蒙古自治区自然科学基金(200408020402) 作品数:4 被引量:75 H指数:4 相关作者: 吴应积 罗奋华 张岩 侯越 多曙光 更多>> 相关机构: 内蒙古大学 更多>> 发文基金: 内蒙古自治区自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
牛乳腺上皮细胞的分离培养及其生物学特性 被引量:55 2006年 采用胶原酶消化法和胰蛋白酶选择性消化法分离、培养和纯化牛乳腺上皮细胞。形态学观察表明,培养的细胞具有典型的上皮细胞形态特征;染色体分析结果表明,培养的细胞具有正常的染色体数目。通过荧光免疫细胞染色方法鉴定了培养的细胞表达上皮细胞特异的角蛋白5和8。该细胞在添加胰岛素、氢化可的松以及羊催乳素的无血清培养液中诱导培养时,用RT-PCR方法检测到了β-酪蛋白基因的转录。这些结果表明,分离培养的细胞是乳腺上皮细胞,这些细胞在诱导培养的条件下能够转录表达β-酪蛋白。 多曙光 吴应积 罗奋华 旭日干关键词:牛乳腺上皮细胞 细胞培养 核型分析 大鼠曲细精管生殖细胞体外共培养和精子发生过程的观察 被引量:9 2007年 目的建立体外长期共培养体系和观察方法,为精子发生过程的研究提供细胞模型。方法采用大鼠曲细精管生殖细胞及支持细胞共培养的方法,对睾丸生精细胞作显微镜观察。结果共培养的支持细胞和生精细胞在体外存活超过6个月。在共培养期间,观察到精母细胞、圆形精子细胞和长形精子细胞。结论在不添加任何细胞因子和生长因子的情况下,大鼠曲细精管生殖细胞长期增生分化,不断产生精子细胞。这一结果暗示组织块和共生的支持细胞可为生殖细胞的增生和分化提供必需的细胞因子。该方法为体外研究精子发生过程提供了实验依据。 张岩 罗奋华 吴应积关键词:生殖细胞 共同培养技术 精子发生 绒山羊Scp3基因的克隆及睾丸中第一轮减数分裂的发生 被引量:5 2009年 联会复合体蛋白3(synaptonemal complex protein 3,Scp3)是雄性生殖细胞减数分裂中联会复合体形成必需的组成部分,在哺乳动物生殖细胞减数分裂中具有重要功能。通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法首次克隆到了绒山羊Scp3基因的编码区片段。测序结果表明,绒山羊与牛的Scp3基因编码序列同源率达到98%。根据测得的DNA序列,设计引物,用RT-PCR方法分析测定了青春前期绒山羊不同个体中睾丸组织的Scp3的转录表达。结果显示,雄性绒山羊青春前期睾丸发育存在个体差异,已分析的样品第一轮减数分裂发生的时间普遍为73天之后。这一结果为绒山羊的睾丸发育和精子发生过程的相关研究打下了基础。 侯越 吴应积 罗奋华 苏慧敏 张学明 张岩 白音巴图 刘陶迪关键词:绒山羊 克隆 睾丸发育 减数分裂 抗体分离纯化技术的研究进展 被引量:6 2008年 制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低,将直接影响试验的成败。抗体的制备有两个途径:一是一般通用的方法,以纯化的抗原免疫动物,获得多克隆抗体;二是应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。但不论用何种技术制备的抗体都需要进行纯化。重要的是根据抗体的性质和来源选择一个合适的分离纯化方法。对当前的纯化方法进行了一个简要的综述。 侯越 罗奋华 吴应积关键词:抗体 纯化