内蒙古自治区自然科学基金(200408020405)
- 作品数:6 被引量:18H指数:2
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- 昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养被引量:7
- 2007年
- 为探索昆明白小鼠胚胎干细胞建系方法,将受孕4.5天的昆明白小鼠囊胚用免疫手术法去除滋胚层,然后将内细胞团(ICM)接种于胎鼠成纤维细胞饲养层上培养,形成的胚胎干细胞样集落用胰蛋白酶-EDTA消化法传代,培养后进行相差显微镜观察及碱性磷酸酶染色。结果饲养层上生长的ICM细胞呈典型的ES样细胞集落,传至第8代碱性磷酸酶染色呈强阳性。实验表明免疫手术法适用于昆明白小鼠ES细胞建系,获得的细胞集落具有ES细胞的主要生物学性状。
- 李煜梁琳王振飞贾瑞贞戴宝贞李瑶
- 关键词:小鼠胚胎干细胞内细胞团
- 牛体细胞核移植方法研究
- 2008年
- 研究了牛体细胞核移植过程的去核方法、融合条件等对重构胚发育的影响,旨在探索一种简化的核移植操作程序。结果表明,添加FSH,LH,最高成熟率为81.7%。在电压为2.6 kV/cm时,融合率为93.96%。激活后重构胚在压制的WOW内进行培养,采用半卵法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别为61.2%和3.27%,盲切法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别是70.8%和7.56%。
- 贾瑞贞李煜杨利军黄翔华
- 关键词:体细胞核移植
- 无透明带体细胞核移植研究进展被引量:1
- 2009年
- 目前,体细胞核移植主要还是沿用Willadsen发明的显微操作的去核、注核、融合和激活来完成。由于其核移植效率较低,且对仪器设备和技术人员的要求较高,因此,简化并建立一套更适合于生产条件下的体细胞核移植程序,从而提高核移植效率一直是人们所不懈努力的。作者就无透明带核移植技术和单个胚胎培养系统作一介绍。
- 杨利军李煜
- 关键词:体细胞核移植
- 免疫外科法制备牛供体细胞核胞体及其核移植研究
- 2009年
- 本研究利用自制的兔抗牛脾细胞免疫血清裂解供体细胞膜而获得核胞体,结果表明,自制的免疫血清可以成功的裂解供体细胞膜而获得核胞体。将该法制备的核胞体应用于牛体细胞核移植的胞质内注射中,从而为核移植中供体细胞核胞体的获得提供一种新的思路。在比较不同供体细胞对重构胚发育的影响时,结果表明,颗粒细胞与耳成纤维细胞构建的重构胚卵裂率没有显著差异(62.62%versus67.89%,P>0.05),囊胚率也没有明显的差异(23.88%versus18.92%,P>0.05);在4℃低温冷藏一定时间的供体细胞与未经冷藏的供体细胞,其卵裂率和囊胚率都没有显著性差异(63.34%versus62.03%;26.67%versus24.45%,P>0.05);同样,耳成纤维细胞也得到相同的结果(70.76%versus66.67%;21.74%versus19.56%,P>0.05)。颗粒细胞构建的重构胚在注核后3~5h进行激活较1~3h有更高的卵裂率,表现出显著性差异(73.91%versus56.52%,P<0.05),囊胚率无显著性差异(23.53%,versus15.38%,P>0.05)。
- 杨利军李瑶黄翔华李云霞赵宇航李煜
- 关键词:供体细胞体细胞核移植
- 牛体细胞核移植技术研究进展被引量:2
- 2006年
- 对近年来牛体细胞核移植技术研究的进展作一综述。其中包括:供体细胞种类、传代次数和所处细胞周期的选择;对供体细胞的特殊处理;卵母细胞的采集;传统去核方法的优化、去透明带核移植技术的建立与发展;胚胎重构、激活和体外培养条件的比较与改进等内容。
- 王振飞李煜梁琳
- 关键词:体细胞核移植
- 人肝癌细胞系HepG2生物学特性分析被引量:8
- 2007年
- 人肝癌细胞系HepG2是进行抗癌药物检测及肝细胞生理性状研究的重要细胞系.充分了解该细胞系的生长增殖和遗传特性.对于细胞系的应用具有重要意义.本研究对体外连续传代培养的HepG2细胞,进行了生长曲线、分裂指数、染色体核型等生物学特性分析.结果表明:HepG2细胞在体外培养条件下,生长曲线呈典型的S形,群体倍增时间为24h;分裂指数最高达4.5%;染色体数目为41~114.染色体众数为54~69(80%).
- 陈富强李煜李瑶王振飞贾瑞贞
- 关键词:HEPG2核型分析