国家自然科学基金(30340055)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：韩黎朱世俊陈世平陈运奇吴旭琴更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人磷脂酶D1/腺病毒表达载体的构建与表达被引量：2
- 2004年
- 将磷脂酶D1基因及其功能缺陷点突变基因从真核表达载体pCGN PLD1亚克隆至带有绿色荧光标记蛋白的穿梭质粒pAdTrack CMV中 ;再与腺病毒骨架载体一起在大肠杆菌BJ5 1 83中进行同源重组 ;阳性重组子经PacⅠ线性化后 ,转染入病毒组装细胞系 2 93细胞 ,成功构建磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D1重组腺病毒 ;并用该病毒颗粒感染嗜铬细胞瘤细胞PC1 2细胞 ,高效表达磷脂酶D1蛋白。证明大蛋白基因 ,如磷脂酶D1基因的同源重组腺病毒表达构建切实可行 。
- 韩黎吴桂芝朱世俊陈运奇陈世平
- 关键词：腺病毒同源重组
- G_(12)亚型G蛋白对M_3乙酰胆碱受体介导的磷脂酶D调控
- 2006年
- 目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3mAChR)并介导PLD的激活。方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3mAChR介导的PLD及PLC活性。结果:Gα12、Gα13亚型野生型及功能增强型蛋白的过度表达,导致胞内M3mAChR介导的PLD活性明显升高(P<0.001);而过度表达Gα12、Gα13功能缺陷型蛋白,则使胞内M3mAChR介导的PLD活性明显降低(P<0.001);但Gαq野生型及功能增强型蛋白的过度表达仅影响胞内PLC活性,对M3mAChR介导的PLD激活没有影响。结论:M3mAChR介导的胞内PLD激活极有可能是Gα12、Gα13而不是Gαq亚型G蛋白。
- 韩黎吴桂芝吴旭琴孟玉芬
- 关键词：磷脂酶D
