国家科技重大专项(2011ZX08005-005)
- 作品数：27 被引量：72H指数：5
- 相关作者：张薇柴蒙亮何兰兰李会会蒋玉蓉更多>>
- 相关机构：石河子大学浙江农林大学新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 拟南芥At4g05060基因的酵母双杂交诱饵表达载体的构建、表达及自激活检测被引量：3
- 2015年
- 为研究At4g05060基因功能,采用PCR扩增拟南芥VAMP(vesicle-associated membrane protein)家族基因At4g05060的ORF序列,定向克隆至酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7,经酶切鉴定并测序后将其转化至酵母Y187细胞;然后采用Western blotting技术分析At4g05060基因在酵母中的表达水平,通过缺陷型培养基培养进行自激活检测。结果表明,成功构建酵母诱饵表达载体pGBKT7-At4g05060,并在酵母细胞正确表达,表达产物对报告基因无自激活作用。
- 萨娜瓦尔.艾比布拉陈全家
- 关键词：拟南芥酵母双杂交诱饵载体
- 利用棉花纤维品质相关QTL评价海陆渐渗品种品质初探被引量：3
- 2013年
- 选用第7、13、25号染色体上纤维品质相关QTL(Quantitative trait locus)密集分布区间的48对SSR(Sim-ple sequence repeat)引物,对48份棉花种质进行多态性检测,研究结果显示在实验材料中3对SSR引物具有陆海差异多态性,相关分析表明3个优质基因SSR位点与纤维长度和纤维强度达到极显著相关。通过与海岛棉带型比对、追踪,从分子水平上明确了这些品种中来源于海岛棉渐渗于陆地棉的优异基因区段,为下一步分子标记辅助聚合育种提供了理论参考。
- 张建宏郭宝生赵贵元耿军义崔瑞敏王兆晓刘存敬刘素恩张香云
- 关键词：棉花
- 转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因棉花的获得及其耐盐性鉴定被引量：5
- 2015年
- 甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)是合成甜菜碱的关键酶,广泛用于植物的耐盐转基因研究。为获得耐盐性提高的棉花植株,本研究通过花粉管通道法将山菠菜甜菜碱醛(BADH)基因转化到陆地棉品种——中棉所35。经卡那霉素田间抗性鉴定、标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH的PCR检测,以及Southern杂交检测,结果表明BADH已整合到棉花的基因组中,并获得转标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH棉株5株。通过对T2种子在0.6%Na Cl盐池发芽实验结果表明,转化植株的出苗率高达63.4%,对照材料出苗率2.4%,转化植株耐盐性较对照有明显提高。本研究获得转基因植株可作为抗逆育种的种质材料。
- 蒋玉蓉袁俊杰陈国林祝水金
- 关键词：棉花甜菜碱醛脱氢酶基因花粉管通道法耐盐性
- 应用Solexa测序技术分析棉花不同抗病品种的数字表达谱被引量：6
- 2015年
- 棉花枯萎病是一种危害严重的世界性病害,构建棉花枯萎病不同抗病品种的基因表达谱将为进一步研究棉花抗枯萎病的分子调控机制及筛选抗枯萎病相关基因奠定基础。本研究选用高抗枯萎病的陆地棉品种中棉所12和高感枯萎病的陆地棉品种新陆早7号为材料,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗根部组织中的基因表达情况。Solexa高通量测序后构建了多达350万个reads的标签文库,根据已知序列信息,显著差异表达基因1 080个,其中上调基因302个,下调基因778个。基因功能分析表明,已注释的显著差异表达基因可划分为分子功能、生物过程和细胞组件3个功能注释本体,并进一步细分为37个功能类别。鉴定出112条代谢通路,注释了1 238个显著差异表达基因,共涉及氨基酸代谢、多糖的生物合成和代谢、脂类代谢、能量代谢及信号转导等方面。在植物激素信号转导通路分析中,涉及到26个已知功能基因,4个基因编码AP2/ERF转录因子,4个基因与LRR类受体丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或蛋白激酶有关,5个基因与蛋白磷酸酶2C有关,而这些基因都参与植物的抗病反应。随机抽取5个基因进行实时荧光定量PCR验证,其结果与测序结果一致。本研究初步揭示了棉花枯萎病抗感品种在转录组水平上的表达差异,获得了大量差异表达基因。
- 韩泽刚赵曾强何兰兰柴蒙亮李会会张薇
- 关键词：陆地棉枯萎病基因表达谱
- 彩叶芋组织快速繁殖技术研究被引量：3
- 2019年
- 【目的】研究最适宜彩叶芋组织快速繁殖的激素浓度,为其工厂化生产提供借鉴和帮助。【方法】以漆斑彩叶芋和红艳彩叶芋为材料,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA和NAA进行组培繁殖,对幼叶外植体的愈伤组织诱导以及愈伤组织增殖分化体系进行优化。【结果】在不同浓度范围内,不同的植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导、增殖分化有不同影响,但均能促使彩叶芋产生愈伤组织,再生出完整植株。炼苗后移栽至由泥炭土、蛭石和珍珠岩混合的基质中,瓶苗的成活率可达90%以上。【结论】MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L是适合彩叶芋愈伤组织诱导的最佳培养基,启动时间短,产愈率高;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L是适合彩叶芋分化增殖的最佳培养基,愈伤组织分化率最高,试管苗的生长情况最好。
- 吴雅露王颖陈梦涛应鹏飞蒋玉蓉陆国权
- 关键词：彩叶芋生长调节剂快速繁殖增殖
- 棕色棉茎尖基因枪遗传转化被引量：2
- 2016年
- 为了建立高效的棉花茎尖遗传转化体系,以棕色棉品种新彩棉5号为材料,采用茎尖培养和基因枪遗传转化方法,通过对凝固剂种类、活性炭含量、卡那霉素浓度、渗透处理时间、轰击压力、轰击距离等因素的优化,建立了棕色棉新彩棉5号茎尖基因枪遗传转化技术体系。结果表明,不同凝固剂种类、活性炭含量、卡那霉素浓度、渗透处理时间、轰击压力和轰击距离对棕色棉茎尖转化率有明显影响。最佳的遗传转化体系为:前渗处理4 h,轰击压力7.586 MPa(1100 psi),轰击距离9 cm,轰击后恢复培养4 d,然后在MSB+8 g·L^(-1)琼脂+125mg·L^(-1)卡那霉素筛选培养基中筛选25 d。获得抗性芽后,在添加1 g·L^(-1)活性炭的生根培养基中诱导抗性芽生根,并获得抗性再生植株。通过PCR和q PCR检测,5200个茎尖共获得16株阳性转基因植株,转化率为0.31%。该技术体系的建立为棕色棉的遗传转化奠定了基础,为彩色棉育种提供了新的材料。
- 侯云鹏冯鸿杰程文瀚张新宇孙杰刘永昌
- 关键词：棕色棉茎尖转化率
- 转Bt基因抗虫低酚棉新品种邯无198的选育及利用价值被引量：1
- 2013年
- 以常规低酚棉品种冀棉19为母本、转基因抗虫棉品种邯5158为父本,通过杂交选育的方法,将抗虫Bt基因转育到低酚棉品种并得到充分表达,育成转Bt基因抗虫低酚棉新品种邯无198。该品种具有丰产、抗病、抗虫、低酚等特点,棉仁中的蛋白质可作为饲料或加工制作食品,具有较高的利用价值。
- 米换房权月伟
- 关键词：棉花抗病虫低酚棉选育
- 枯萎病菌诱导感、抗陆地棉品种的基因表达谱分析被引量：4
- 2015年
- 选用陆地棉抗枯萎病品种中棉所12和感枯萎病品种新陆早7号,利用Solexa高通量测序技术分析棉花幼苗受到枯萎病菌侵染后3 h和6 h根部组织的基因表达谱。中棉所12受病菌侵染后3 h与0 h相比,6 h与0 h相比以及6 h与3 h相比,分别鉴定出4447、5481和2559个差异表达基因;新陆早7号分别鉴定出8615、6727和2078个差异表达基因;2个品种比较,在3 h和6 h分别鉴定出1879个和500个差异表达基因。基因功能分析表明,差异表达基因划分为生物学过程、细胞组分和分子功能注释本体,并进一步细分为48个功能类别。代谢通路分析显示,中棉所12和新陆早7号在枯萎病菌侵染后的6 h与0 h相比鉴定出的代谢通路(Pathway)最多,均有126条;在枯萎病菌侵染后6 h,2个品种相比鉴定出的代谢通路最少,仅有89条。各个比对组的代谢通路涉及的基因可被划分为次生代谢产物的生物合成、多糖的生物合成和代谢、环境适应和免疫系统等13类。在环境适应和免疫系统分类中存在着植物与病原菌相互作用代谢通路,涉及到996个已知功能的差异表达基因,有444个基因上调表达,552个基因下调表达。其中,差异表达基因最多的是WRKY转录因子家族基因,其次为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因,而DNA损伤修复/耐受性蛋白,JAZ1、RAR1和RPM1互作蛋白,S位点的特异性糖蛋白S6前体以及钙牵引蛋白等6类基因参与该代谢通路的数目最少。最后随机抽取6个基因进行实时荧光定量PCR验证,其结果与测序结果一致。
- 韩泽刚赵曾强李会会张析李潇玲张薇
- 关键词：陆地棉枯萎病基因表达谱
- GhWRKY44基因在烟草中遗传转化及功能分析被引量：5
- 2016年
- 为了进一步验证GhWRKY44(登录号:KJ801807)基因在烟草异位表达后的功能,构建了Ca MV35S启动子调控、Nos为终止子的棉花抗枯萎病相关基因(GhWRKY44)的过表达载体;电击法将其导入农杆菌GV3101,菌液PCR筛选鉴定阳性菌株,采用农杆菌介导法转化烟草;T0转化植株经卡那霉素筛选、PCR检测后,随机从转基因T0中选取5株进行RT-PCR检测,均为阳性株,说明GhWRKY44基因不仅整合到烟草基因组中而且还能正常转录。对过表达GhWRKY44基因的转基因烟草T1株系进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析。结果表明,在正常生长情况下,PR5和NPR1的表达量在转GhWRKY44株系中明显增加,枯萎病菌侵染后,在转GhWRKY44株系中,PR1a、PR2和NPR1的表达量迅速增加,明显高于野生型株系,而PR5的表达量则低于野生型株系,说明该目的基因能在烟草中异位表达并能激活病程相关蛋白基因的表达,但其功能仍需进一步研究。
- 赵曾强韩泽刚李会会李潇玲张析张薇
- 关键词：烟草病程相关蛋白基因
- 棉花抗枯萎病相关转录因子基因GhERFB101的克隆与表达分析被引量：7
- 2015年
- 为了探究ERF转录因子家族与棉花枯萎病抗性之间的关系,也为海岛抗枯萎病品种的选育工作提供新的基因资源,从Solexa高通量测序技术建立的棉花基因表达谱中筛选探针序列,通过电子克隆结合RT-PCR技术从高抗枯萎病的棉花品种中棉所12中克隆到一个新的ERF-B1亚组转录因子基因,命名为Gh ERFB101(Gen Bank:KF850521)。序列分析表明,该基因开放阅读框738 bp,编码245个氨基酸,含有一个保守的AP2/ERF结构域,在进化上与拟南芥At ERF11的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,枯萎病菌诱导后,Gh ERFB101基因在抗病品种根中的表达量呈现下降趋势;而在感病品种中,该基因呈上调表达,随着病菌处理后时间延长,其表达量呈现先增加后降低的变化趋势,在病菌处理后12 h表达量达到最大,在48 h下降到最低。乙烯和茉莉酸诱导后,该基因表达量均呈现明显的先增加后降低的变化趋势,在乙烯处理后2 h基因的表达量达到最大;茉莉酸则在处理后1 h基因的表达量达到最大;而水杨酸诱导后基因的变化幅度不大;推测该基因可能通过茉莉酸、乙烯信号传导途径参与对枯萎病菌的防御反应。
- 韩泽刚赵曾强何兰兰柴蒙亮李会会张薇
- 关键词：棉花枯萎病菌
