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小鼠角膜基质细胞的KSFM培养基培养法: 2012年; 目的研究使用KSFM培养基能否获取具有增殖能力且保持生物学特性不变的小鼠角膜基质细胞（CSCs）。方法实验研究。将中央区角膜置于EDTA液（20mmol／L）内孵育45min后，用手术显微镊小心剥离角膜上皮层以及内皮层，并将获取的角膜基质置于含300U／mlⅠ型胶原酶的溶液中消化4h。离心后采用DMEM基础培养基、DMEM完全培养基（含10％FBS）以及KSFM培养基重悬细胞常规培养，并以含1U／m1分散酶的EDTA液消化传代细胞。同时，观察细胞并绘制细胞生长曲线；采用逆转录聚合酶链式反应（RT．PCR）检测细胞角膜蛋白多糖（keratocan）mRNA和乙醛脱氢酶（ALDH）mRNA表达情况；采用细胞免疫荧光染色以及蛋白质印迹方法检测细胞keratocan蛋白的表达情况。采用独立样本≠检验对数据进行统计学分析。结果通过胶原酶消化的方法可以从每只小鼠的角膜基质获取约l×l04个单个细胞。RT-PCR结果显示，原代细胞表达CSCs标记物keratocan和ALDH；免疫荧光染色和蛋白质印迹结果显示：原代细胞表达keratocan蛋白。培养于DMEM基础培养基内的原代CSCs无法增殖。培养于DMEM完全培养基内的CSCs可增殖，但第3代细胞不表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白。培养于KSFM培养基内的CSCs也可增殖，第3代细胞仍表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白，且与原代细胞相比，表达强度差异无统计学意义。结论KSFM培养基不仅能维持小鼠CSCs的生物学特性不变，还能有效促进细胞增殖。; 卢建民李小磊王会芳宋秀君; 关键词：基质细胞角膜细胞增殖生物学特性小鼠

角膜内树突状细胞及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用被引量：2: 2011年; 树突状细胞是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞。成熟树突状细胞可引发机体免疫反应,而未成熟树突状细胞则会诱导机体免疫耐受。最近研究表明,角膜中央区内的树突状细胞完全处于未成熟状态,而角膜周边区内的树突状细胞则大多处于成熟状态;树突状细胞在角膜移植免疫排斥反应中发挥着重要作用。本文就角膜内的树突状细胞以及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用作一综述。; 卢建民宋秀君; 关键词：树突状细胞角膜角膜移植免疫排斥反应

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河北省科技支撑计划项目(11276103D-20)

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