教育部科学技术研究重点项目(211038)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
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- 玉米弯孢叶斑病菌NADPH氧化酶生物信息学分析和ATMT敲除载体的构建被引量：1
- 2014年
- 从JGI数据库玉米弯孢叶斑病菌(Curvularia lunata)基因组中获得2个编码NADPH氧化酶基因ClNox1和ClNox2。采用生物信息学方法对2个基因编码的蛋白质进行性质、结构和功能等方面的预测。结果表明,ClNox1和ClNox2的分子量分别为6.35和6.41 KD,等电点PI为8.87和8.93,不稳定指数为44.50和39.45;ClNox1是亲水性膜蛋白,包含6个明显的跨膜结构域;ClNox2也是膜蛋白,包含8个明显的跨膜结构域。在亚细胞水平上,ClNox1定位于线粒体上,而ClNox2定位于细胞质膜上;在氨基酸序列方面,ClNox1和ClNox2都含有多个苏氨酸、丝氨酸和酪氨酸激酶磷酸化位点;在功能方面,ClNox1和ClNox2都包含NADPH氧化酶特征结构域,并且与Cochliobolus heterostrophus的NADPH氧化酶基因具有较高的同源性。根据ClNox1和ClNox2序列设计特异性引物扩增目的片段,与标记基因NPTII和HphGFP分别连入骨架载体pPZP100,构建完成ClNox1和ClNox2基因的敲除载体pPZP100NPTIIClNox1和pPZP100HphGFPClNox2,为根癌农杆菌介导的遗传转化提供基础材料。
- 李辉刘畅李国福路媛媛何瑞玒薛春生
- 关键词：玉米生物信息学
- 玉米圆斑病菌非核糖体肽合成酶6基因ATMT敲除载体构建
- 2013年
- 以双元载体pPZP100为骨架,通过酶切、连接将标记基因(潮霉素-绿色荧光蛋白,HygR-GFP)及碳色长蠕孢(Helminthosporium carbonum)非核糖体肽合成酶基因(HcNPS6)侧翼序列插入目标载体pPZP100,构建HcNPS6基因敲除载体,并采用冻融法将pPZP100HygR-GFPHcNPS6转入农杆菌菌株AGL-1。挑取经氨苄/氯霉素筛选的重组子进行菌落PCR鉴定。结果表明,敲除载体已成功转入农杆菌AGL-1。
- 张跃文张美丽张莉薛春生
- 关键词：农杆菌介导
- 玉米大斑病菌非核糖体肽合成酶NPS6基因ATMT敲除载体的构建被引量：1
- 2012年
- 载体构建是利用农杆菌介导建立真菌遗传转化体系的基础。以双元载体pPZP100为骨架,通过限制性内切酶酶切、连接以及去磷酸化将标记基因NptⅡ及StNPS6基因侧翼序列导入目标载体pPZP100中,构建玉米大斑病菌非核糖体肽合成酶6基因敲除载体,并采用冻融法将pPZP100NptⅡNPS6转入农杆菌菌株AGL-1。
- 张美丽肖淑芹张莉张跃文薛春生
- 关键词：玉米大斑病菌
- 玉米大斑病菌Cu/Zn-SOD基因的克隆、鉴定及功能分析
- 由凸脐蠕孢菌[Exserohilum turcicum (Pass.) Leonard et Suggs]侵染引起的玉米大斑病是我国东北地区玉米生产上的主要病害之一,其致病性强弱是影响流行的关键因素.Cu/Zn-SOD是...
- 张莉肖淑芹张美丽张跃文李耀路媛媛隋韵涵薛春生
- 关键词：玉米大斑病菌
- 一种适于玉米灰斑病菌快速扩繁的方法被引量：4
- 2014年
- 介绍了一种适于玉米灰斑病菌快速扩繁的方法.该方法通过快速研磨灰斑病菌菌丝,制成研磨液后直接涂抹在培养基上进行培养,从而达到快速扩繁的目的.结果表明,取100 μL均匀涂抹在直径为90 mm的PDA平板上,第7天菌落面积最多可达3.35×103 mm2,占培养皿面积的52.57％;采用本方法获得的灰斑病菌第3天开始产生孢子,4～6d就能够获得大量分生孢子,可达2.365×106个/mL,并且产孢时间缩短.研究结果显示：该方法简便易行,快速高效,污染少,为玉米灰斑病菌的生物学、致病机制等进一步研究奠定了基础.该方法可用于其他生长速度缓慢真菌的快速扩繁.
- 路媛媛肖淑芹赵丽琨杨宁薛春生
- 关键词：玉米灰斑病菌菌丝生长扩繁技术
