浙江省自然科学基金(393105)
- 作品数：8 被引量：136H指数：6
- 相关作者：王慧中赵培洁周晓云徐祥彬应奇才更多>>
- 相关机构：杭州师范大学浙江大学浙江工业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转基因甜瓜植株的获得及其抗病性被引量：16
- 2000年
- 甜瓜(Cucumis melo)子叶外植体能被含双元载体的根瘤农杆菌菌株LBA4404感染。该载体内含1个NPT-Ⅱ基因(新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因),以供选择卡那霉素抗性的转化甜瓜细胞和1个WMV-2 CP基因(西瓜花叶病毒2号外壳蛋白基因)。卡那霉素抗性植株经PCR-Southem杂交试验表明,外源的WMV2CP基因确已通过农杆菌介导的转化途径导入甜瓜细胞。目前转基因甜瓜已开花结果。攻毒试验表明,与对照相比,转基因植株可以推迟发病时间,减轻发病程度,表现出对WMV-2具有较强的抗性。
- 王慧中赵培洁周晓云
- 关键词：甜瓜转基因植株抗病性
- 农杆菌法转化获得转基因西瓜植株被引量：32
- 2000年
- 西瓜子叶外植体能被含双元载体 p BPMWMV的根瘤农杆菌感染 .该质粒载体含有一个 npt- 基因以供选择 Kanr的转基因西瓜植株以及一个 WMV- 2 CP基因 . Kanr西瓜植株经 NPT- 酶活性检测、DNA分子点杂交及 Southern杂交试验证明 ,外源的 WMV- 2 CP基因已导入西瓜细胞 .
- 王慧中赵培洁周晓云
- 关键词：西瓜转基因植株抗病育种
- 转WMV-2外壳蛋白基因西瓜植株的病毒抗性被引量：31
- 2003年
- 西瓜是夏季的重要水果 ,病毒病是影响其品质和产量的重要原因之一。植物基因工程的发展为抗病育种提供了新途径。利用外壳蛋白 (coatprotein)基因转化高等植物 ,赋予转基因植物以相应抗病性的成功例子已很多。本文报道WMV - 2CP基因在转基因西瓜植株中的遗传、分离、表达以及转基因植株对病毒病的抗性实验结果。通过自交结合PCR检测 ,发现WMV - 2CP基因在自交子一代的分离符合孟德尔 3∶1的分离比。经过连续 4代的选择鉴定 ,已从T7、T11和T32 3个独立转化子的后代中筛选获得 8个转基因纯合株系 ,性状表现整齐一致。Westernblot结果表明 ,R4 T7-1、R4 T11-3以及R4 T32 -73个不同来源的株系均能表达产生外壳蛋白。转基因纯合株系WMV - 2感染后的病毒抗性实验表明 ,与未转基因对照相比 ,转基因株系可以推迟发病时间 ,减轻发病程度。实验筛选获得的转基因株系R4 T32 -7表现出对WMV - 2的高度抗性 。
- 王慧中赵培洁徐吉臣赵怀张红生
- 关键词：西瓜花叶病毒植株病毒抗性
- 转WMV-2 CP基因西瓜的安全性评价被引量：8
- 2009年
- 以转WMV-2CP基因西瓜(Citrullus lanatus var. lanatus)为例,对转基因食品进行了安全性评价。对转WMV-2CP基因西瓜进行小鼠急性和亚急性毒性试验、致突变试验以及30 d喂养试验。结果表明,小鼠经口急性毒性半数致死量LD50>150 g.kg-1,属实际无急性毒性物质;经微核实验、精子畸变实验及Ames实验均未发现有致突变作用;30 d喂养试验,90 g.kg-1、180 g.kg-1、270 g.kg-1各剂量组小鼠发育、增重、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学观察等各项指标与基础对照组比均无显著性差异。初步表明转WMV-2CP基因西瓜对小鼠没有毒性,属安全食品。
- 应奇才薛大伟徐祥彬施农农王慧中
- 关键词：毒性试验致突变试验
- 根癌农杆菌介导的甜瓜基因转化及其转基因植株的再生被引量：41
- 2000年
- 含双元载体 p BEWMV的根癌农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens) L BA4 4 0 4感染甜瓜 (Cucumismelo)子叶外植体 ,获得了可育的转基因甜瓜植株 .该质粒载体内含选择标记基因 npt- (新霉素磷酸基转移酶 基因 )和 WMV- CP基因 (西瓜花叶病毒 1号外壳蛋白基因 ) . NPT- 酶活性检测、DNA分子点杂交、PCR检测及 Southern杂交试验表明 ,外源的 WMV-
- 王慧中李亚南赵培洁
- 关键词：甜瓜根癌农杆菌转基因植株
- 转WMV-2CP基因西瓜中间试验的农艺性状评价被引量：3
- 2010年
- 为研究转WMV-2CP基因浙密2号西瓜及野生型在农艺性状方面是否存在差异,提供转基因浙密2号西瓜的环境安全性评价数据,本研究对供试材料部分农艺性状进行统计学分析。结果表明,转WMV-2CP基因浙密2号西瓜与受体品种在长势、生物学性状、含糖量、越冬能力等性状上没有显著差异,而抵抗病毒的能力得到了显著提高。
- 应奇才徐祥彬施农农王慧中
- 关键词：西瓜转基因农艺性状
- 转WMV-2CP基因黄瓜植株的再生被引量：41
- 2000年
- 以黄瓜无菌苗子叶切段为外植体 ,通过叶盘转化法与根瘤农杆菌进行共培养建立了黄瓜的转基因系统。农杆菌菌株为LBA44 0 4,内含双元载体pBPMWMV。该质粒载体带有一个npt Ⅱ基因 (筛选具有卡那霉素抗性的植株 )和一个WMV 2CP基因。抗卡那霉素 (Kanr)的黄瓜植株经DNA分子点杂交、PCR检测以及Southernblot证实 ,外源的WMV 2CP基因确实已导入黄瓜细胞且能稳定地遗传到子一代。对WMV 2CP基因在子一代的分离进行了统计。获得的转基因子一代植株对WMV 2表现出较强的抗性 ,可以延迟发病时间 。
- 王慧中赵培洁周晓云
- 关键词：黄瓜WMV-2抗病育种
- 转WMV-2CP基因甜瓜饲喂小鼠的安全性研究被引量：3
- 2011年
- 转WMV-2CP基因甜瓜的小鼠急性和亚急性毒性试验、致突变试验以及30d喂养安全性分析试验.其小鼠经口急性毒性半致死量LD50>90g/kg体重试验,表明该转基因食品属实际无急性毒性物质;微核实验和精子畸变实验及Ames实验均未发现有致突变作用;30d喂养试验,54、108、162g/kg体重各剂量组小鼠发育、增重、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学等各项指标和基础对照组比较均无显著性差异.上述结果初步表明转WMV-2CP基因甜瓜对小鼠没有毒性,属安全食品.
- 应奇才徐祥彬薛大伟潘慧娟王慧中
- 关键词：毒性试验致突变试验
