现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金(SDAIT-13-011-01)
- 作品数：14 被引量：100H指数：7
- 相关作者：于可响宋敏训马秀丽黄中利李桂明更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东农业大学青岛蔚蓝生物股份有限公司更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金公益性行业(农业)科研专项山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理更多>>
- 北五味子多糖的分离纯化及其对鸡外周血淋巴细胞的影响被引量：9
- 2019年
- 本研究在传统水提醇沉法基础上辅以酶消化法提取北五味子多糖,并用离子凝胶柱层析法对其进一步纯化,分离得到三种分子量的多糖组分(SCP-Ⅰ、SCP-Ⅱ和SCP-Ⅲ)。为分析多糖三种组分对鸡外周血淋巴细胞的作用,首先用高浓度(最高10mg/mL)的三种多糖组分作用于淋巴细胞,结果显示≤1mg/mL的多糖对细胞没有显著的毒性作用。以不同浓度的三种SCP组分(0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0、800.0、1600.0μg/mL)作用于淋巴细胞,发现SCP-Ⅲ对细胞因子IL-2、IL-6和IFN-γ的分泌具有显著的增强作用,但最佳作用浓度不同,SCP-Ⅰ和SCP-Ⅱ对这三种细胞因子的作用效果不显著。本研究为北五味子多糖的精制和应用奠定了理论基础。
- 董雯雯林树乾李桂明赵增成黄中利傅剑殷斌刘月月贾凤娟杨世发
- 关键词：北五味子多糖分离纯化淋巴细胞细胞因子
- 新常态下我省肉鸡产业发展的新思考被引量：1
- 2015年
- 山东省是肉鸡生产大省,肉鸡存养量和产量均居全国第一位,养殖水平也处于国内领先地位。但是,过于密集的饲养对生态环境、产品质量、养殖成本等方面都造成一定压力。本文根据山东省肉鸡养殖现状,对肉鸡产业面临的问题逐一进行阐述,并提出了相应的发展对策。
- 宋敏训石天虹
- 关键词：肉鸡
- 山东省血清4型禽腺病毒的分离鉴定被引量：23
- 2016年
- 近期从山东省许多地区爆发的以心包积液为主要病变特征的发病鸡中分离到10株病毒,经PCR检测和血清型鉴定,确定为血清4型禽腺病毒。SPF鸡回归试验证实,分离到的病毒能完全复制出与临床自然发病鸡相同的症状与病变。用该病毒制备的灭活疫苗具有良好的免疫保护作用,制作的抗体也具有良好的治疗效果。
- 于可响黄兵凌红丽庞运倩王友令李峰亓丽红宋敏训
- 关键词：心包积液
- 鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株的选育被引量：5
- 2016年
- 【目的】将鸭坦布苏病毒BZ_2010株在SPF鸡胚上进行连续传代致弱;旨在选育安全性高、免疫原性好的活疫苗候选毒株。【方法】以SPF鸡胚为增殖宿主,将BZ_2010株连续传代,直至第120代;以1日龄雏鸭和30周龄的产蛋种鸭为试验对象,对第120代次毒株(命名为VC2)的安全性进行评价;以1d雏鸭为试验对象,对VC2株的返强情况进行评价;以18周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的中和抗体进行监测;以25周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的保护效果进行评价;利用RT-PCR方法分别扩增BZ_2010株和VC2株的E基因和N54A基因,进行测序分析。【结果】传代病毒对鸡胚的平均死亡时间逐渐缩短,而病毒毒价有逐)渐提高的趋势,ELD_(50)由第20代的10^(-5.3)/0.1 mL提高到第120代的10^(-5.8)/0.1mL,而且第80代之前提高较快,后期基本稳定。将VC2株通过颈部皮下接种1d雏鸭和肌肉接种30周龄产蛋种鸭,接种后试验鸭无异常临床表现,肝脏也无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的安全性。将VC2在1d雏鸭进行连续5次传代,未发现试验鸭有任何异常症状,将第5代组织悬液接种1d雏鸭,采集肝脏进行病理切片观察,发现无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的稳定性。基因测序分析结果显示,VC2株E蛋白的第86、157、189、301和312位氨基酸发生改变,而NS4A蛋白只有一个氨基酸发生突变,即第54位氨基酸由F变为L。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,第4周即可达到高峰,并且维持较长时间;VC2免疫后于第2周和第50周利用强毒株进行攻毒试验,结果VC2免疫组在攻毒后未出现异常症状,粪便正常,产蛋率保持正常,这说明VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。【结论】通过鸡胚连续传代成功获得了一株安全性高、免疫原性好的鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,可维持较长时间。攻毒试验结果表明,VC2株
- 于可响马秀丽袁小远刘存霞胡峰凌红丽李玉峰黄兵
- 关键词：鸡胚弱化活疫苗
- 春季禽病防控技术要点被引量：1
- 2014年
- 春季往往是干旱少雨、多风、气温变化大的季节，有利于细菌、病毒等病原微生物的传播，因此，春季也是家禽养殖场疾病高发季节。要做好养殖场的疫病防控工作，在生产管理技术上应注意抓好以下几点。
- 宋敏训尹燕博李玉峰刘玉山
- 关键词：防控技术禽病病原微生物气温变化疫病防控养殖场
- 表达1型和3型鸭甲型肝炎病毒VP1基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性被引量：6
- 2017年
- 为进一步研发安全有效的鸭甲型肝炎病毒(DHAV)多价疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株为载体,构建出共表达DHAV-1和-3型VP1基因的重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1,并对其毒力、生物学特性进行鉴定。通过间接免疫荧光试验(IFA)验证DHAV-1和-3型VP1蛋白在细胞内能够有效表达。利用Western blot进一步验证重组病毒产生的中和抗体能和DHAV-1和DHAV-3VP1表达蛋白发生较强的反应。重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1保持了原重组疫苗株rLS-RFP对鸡胚的高滴度生长适应和低致病的特性。将重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1免疫种鸭1次,通过中和试验检测该重组病毒能够在鸭体内产生针对DHAV-1和DHAV-3的中和抗体,平均效价分别为1∶18.17和1∶16.60。本研究结果表明重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1具有作为鸭肝炎重组病毒活载体疫苗用于种鸭的潜力。
- 郑文卿宋敏训李建亮黄兵李玉峰于可响刘存霞马秀丽崔言顺
- 关键词：反向遗传操作重组新城疫病毒
- 山东省鸡源致病性大肠杆菌O-抗原混合血清型分析被引量：7
- 2017年
- 采用抗原抗体凝集反应,用常见的18种O因子血清测定从临床上分离鉴定的182株大肠杆菌的O抗原血清型。结果显示,山东地区鸡源大肠杆菌的优势血清型为O24,O15,O2,O127,O1,O18,O78,占检测菌株的41.21%,同时出现大量混合血清型,占检测菌株的24.18%。这是国内首次报道检测到大量的大肠杆菌O因子混合血清型,印证了国外研究人员对O-AGC核苷酸序列研究的结果,有助于最终对O抗原血清型进行更加准确的分类以及大肠杆菌疫苗的研制。
- 冯敏燕林树乾房玉波李桂明杨世发赵增成黄中利傅剑商晶宋敏训
- 关键词：大肠杆菌O-抗原
- 樱桃谷肉鸭“大舌病”研究简报被引量：3
- 2016年
- 2014年下半年以来,我国江苏、山东、安徽、河北、江西等主要养鸭地区的樱桃谷肉鸭中暴发了一种以喙短、舌长、骨脆、发育不良为主要临床特点的疾病,生产中称为"大舌病"或"长舌病",给当地的肉鸭养殖造成了很大的冲击。我们从山东地区发病鸭中分离到一株能在番鸭胚和鹅胚繁殖的病毒(命名为YZ15-1),经PCR鉴定,确定为小鹅瘟病毒。VP3基因系统进化树显示,YZ15-1与GPV处于同一个分支,特别与GPVa2006和GPVb1999这两个台湾分离株的遗传关系最近。流行病学调查发现,出现大舌症状的鸭子体内均能检测GPV,泄殖腔棉拭子的阳性率为78.8%;而发病鸭群中未出现大舌症状的鸭子体内病毒检测的阳性率为58.3%,泄殖腔棉拭子的阳性率为37.5%;同时从10个不同地区健康鸭群采集的100份泄殖腔棉拭子中未检测到GPV。但是肉鸭回归试验未复制出"大舌"症状。这些结果说明,鸭"大舌病"可能是以变异的GPV为传染性因素,其他辅助性因素共同作用的结果。
- 于可响黄兵马秀丽刘存霞胡峰李峰宋敏训
- 关键词：樱桃谷鸭小鹅瘟病毒
- 鸭甲肝病毒与新型呼肠孤病毒复合RT-PCR检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 根据鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)的3D基因序列和新型鸭呼肠孤病毒(Novel Duck reovirus,NDRV)的S3基因序列,分别设计了1对特异性引物,通过条件优化建立了鉴别DHAV和NDRV的复合RT-PCR方法。该方法对DHAV和NDRV的最低检出量均为100 copies,而对番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)、鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)和鸭副粘病毒(Duck paramyxo virus,NDV)的检测结果均为阴性。临床样品的检测结果显示,该方法是一种快速鉴别诊断DHAV和NDRV感染的有效手段。
- 孙晓军王晓艺韩宏宇迟海华杨宏禹于可响
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒复合RT-PCR
- 用荧光定量RT-PCR方法检测新型鸭呼肠孤病毒被引量：9
- 2015年
- 根据新型鸭呼肠孤病毒（novel duck reovirus,NDRV）S1基因序列设计1对特异性引物,建立了基于SYBR GreenⅠ的实时荧光定量RT-PCR检测方法。根据含目的基因的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。敏感性试验显示,该方法最低可检出15个拷贝的病毒c DNA,其病毒最低检出量为0.5TCID50。该方法具有良好的特异性,对鸭坦布苏病毒（DTMUV）、A型鸭甲肝病毒（DHV-1）、C型鸭甲肝病毒（DHV-3）、番鸭呼肠孤病毒（MDRV）、减蛋综合征病毒（EDSV）、鸭新城疫病毒（NDV）、鸭瘟病毒（DPV）、鸭疫里默氏杆菌（RA）的检测结果均为阴性。该方法重复性好,组内变异系数为0.32%~0.91%,组间变异系数为1.03%~1.51%。利用该方法对人工感染雏鸭的粪便排毒情况进行检测,结果发现,攻毒后2~12 d是粪便排毒期,其中3~6 d是排毒高峰期。临床样品检测结果表明,该方法比常规RT-PCR具有更高的敏感性,而且从收到样品到得出检测结果只需4 h。
- 韩宏宇马秀丽黄兵李建亮张玉瑶于可响崔言顺
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒SYBR实时荧光定量RT-PCR
