目的研究抗白细胞介素8（IL-8）单克隆抗体对子宫颈癌生长和转移的抑制作用。方法选取高表达IL-8的子宫颈鳞状细胞癌细胞株CaSki和已转染IL-8的SiHa细胞株（pcDNA3.1-IL-8-SiHa），体外实验采用Boyden法观察抗IL-8抗体对高表达IL-8的子宫颈癌细胞趋化能力的影响。体内实验通过建立裸鼠子宫颈癌移植瘤模型，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、TUNEL法，观察抗IL-8抗体对子宫颈癌细胞和裸鼠移植瘤生长的影响。实验用裸鼠随机分为10组（CaSki和pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞各5组），每组各5只，空白对照组（Ⅰ组）注射等体积的磷酸盐缓冲液（PBS）；阴性对照组（Ⅱ组）注射等体积的IgG；治疗组（Ⅲ组）注射抗IL-8抗体，100 μg/次，每2 d 1次；治疗组（Ⅳ组）注射抗IL-8抗体，500 μg/次，每3 d 1次；治疗组（Ⅴ组）注射抗IL-8抗体，1 000 μg/次，每周1次。结果体外趋化实验结果显示，CaSki细胞和pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞中不同浓度抗IL-8抗体治疗组的细胞趋化能力均低于空白对照组，差异均有统计学意义（CaSki细胞：F=289.6，P=0.000；pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞：F=79.0，P=0.005）。体内实验中，以抗瘤效果最好的Ⅳ组为例，Ⅳ组肿瘤重量小于Ⅰ组，差异具有统计学意义[接种CaSki细胞：（0.172±0.031）g比（0.735±0.015）g，P〈0.05；接种pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞：（0.400±0.029）g比（1.430±0.199）g，P〈0.05]。Ⅳ组移植瘤体积小于Ⅰ组，差异具有统计学意义[接种CaSki细胞：（0.049±0.028）cm3比（0.214±0.016）cm3，P〈0.05；接种pcDNA3.1-IL-8-SiHa细胞：（0.063±0.022）cm3比（0.600±0.072）cm3，P〈0.05]。肿瘤生长曲线提示抗IL-8抗体治疗组肿瘤生长缓慢，成瘤时间和裸鼠存活时间也相应延长。Ⅳ组IL-8 mRNA表达低于Ⅰ组，差异具有统计学意义（接种CaSki细胞：0.58±0.06比1.15±0.13，P〈0.05；接种pcD
目的通过RNA干扰技术研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌Caski细胞上皮-间质转化(EMT)的影响作用。方法通过构建重组真核表达载体p Genesil-1-MIF si RNA,转染宫颈癌Caski细胞(Caski-p Genesil-MIF si RNA组),同时设空载体转染组(Caski-p Genesil-1组)和空白对照组(Caski组),采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Caski细胞中MIF m RNA相对表达量的变化,并检测转染前后Caski细胞中EMT相关指标E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果 p Genesil-1-MIF si RNA转染Caski细胞后MIF m RNA的表达量减少,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RNA干扰抑制MIF基因表达后,与对照组相比,p Genesil-1-MIF si RNA组Caski细胞上皮标记物E-cadherin m RNA及蛋白表达水平上调(P<0.05),间叶标记物Vimentin m RNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论抑制MIF基因表达可抑制宫颈癌Caski细胞发生EMT的能力。
