广东省高等学校科技创新团队项目(cxzd1111)
- 作品数：10 被引量：102H指数：6
- 相关作者：叶春玲叶开和张晓琦王小康叶文才更多>>
- 相关机构：暨南大学卡罗林斯卡医学院广东省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：广东省高等学校科技创新团队项目国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 番石榴叶总三萜对2型糖尿病大鼠的降血糖和血脂作用被引量：35
- 2012年
- 目的:探讨番石榴叶总三萜(TTPGL)对2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响。方法:采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,35 mg.kg-1)方法建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为5组:糖尿病模型组,TTPGL低、中、高剂量组(60、120、240 mg.kg-1),罗格列酮阳性对照组(3 mg.kg-1)。另取12只正常大鼠设为正常对照组。给药组每天灌胃给药1次,连续给药6周;模型组和正常对照组则给予同体积的生理盐水灌胃。给药6周后,采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠的空腹血糖(FBG);放射免疫法测定空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI);酶联免疫法测定大鼠的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、游离脂肪酸(FFA)和糖化血红蛋白(GHb);果糖胺法测定糖化血清蛋白(GSP);Western blotting检测脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况。结果:与正常对照组相比,糖尿病模型组血脂、FBG以及GHb显著升高,FINS及ISI显著下降,脂肪细胞PPARγ蛋白表达水平降低。与模型组相比,TTPGL中、高剂量组大鼠的FBG和GSP显著降低,FINS以及ISI显著升高,脂肪组织PPARγ蛋白的表达水平升高(P<0.01或P<0.05);此外,TTPGL能显著降低糖尿病大鼠血脂水平,TG、TCH和FFA含量均明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:TTPGL能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂水平,明显改善糖尿病动物的糖脂代谢紊乱,升高血清胰岛素水平,提高胰岛素敏感指数;其抗糖尿病作用机制可能与其增加PPARγ蛋白的表达有关。
- 王婧茹赵晶晶叶春玲叶开和张晓琦王英叶文才
- 关键词：血糖血脂过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
- 番石榴酸抗H_2O_2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化损伤作用及其机制分析被引量：3
- 2015年
- 目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞氧化损伤的作用。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予番石榴酸0.3、1、3、10、30 nmol·L-1,并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组,药物作用时间均为48 h。650μmol·L-1H2O2干预细胞2 h建立氧化损伤模型,用四甲基偶氮唑蓝法检测药物对INS-1β细胞氧化损伤的保护作用,用核染色法观察细胞核变化,用流式细胞术检测药物对细胞活性氧生成的作用,用双染-流式细胞术检测药物对细胞凋亡的保护作用。结果与氧化损伤模型组比较,低剂量的番石榴酸(0.3、1 nmol·L-1)能显著保护INS-1β细胞活力(P<0.05或P<0.01);核染色结果显示,与氧化损伤模型组相比,低浓度番石榴酸(0.3 nmol·L-1)作用下,细胞荧光强度较弱。0.3、1、3 nmol·L-1番石榴酸均能十分显著地降低二氯荧光黄(DCF)荧光强度(P<0.01),即减少细胞内活性氧的产生。0.3 nmol·L-1番石榴酸能显著抵抗细胞凋亡的发生(P<0.05)。结论番石榴酸能对抗INS-1细胞氧化损伤,可能与其抑制细胞内活性氧的产生、对抗细胞凋亡有关。
- 王婧茹叶开和吕艳青魏崧丞张晓琦叶文才叶春玲
- 3′-羟基葛根素对脂肪细胞3T3-L1胰岛素抵抗的影响及其机制研究被引量：19
- 2014年
- 目的探讨3′-羟基葛根素改善胰岛素抵抗的作用及其机制。方法采用MTT法检测3′-羟基葛根素对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;油红O染色法检测其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。以地塞米松诱导分化成熟的脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,分别采用葡萄糖氧化酶法和比色法检测细胞培养上清液中葡萄糖消耗量和游离脂肪酸（FFA）生成量;实时荧光定量PCR法分析脂肪细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxysome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ）和蛋白酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B）的基因表达。采用嵌合蛋白基因试验检测3′-羟基葛根素的PPARγ配体结合活性和比色法检测其对PTP1B酶活性的影响。结果与溶媒对照组相比,1～10μmol/L 3′-羟基葛根素显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖及细胞分化（P〈0.05、0.01）。与模型组相比,无论在基础状态还是胰岛素刺激状态,3′-羟基葛根素均能显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖利用率、减少FFA的产生（P〈0.05、0.01）;同时显著上调胰岛素抵抗脂肪细胞PPARγ基因的表达,但对PTP1B基因表达无明显影响（P〉0.05）。与溶媒对照组相比,3′-羟基葛根素在0.1、10.0μmol/L时能对PPARγ产生激活作用（P〈0.05、0.01）,但对PTP1B酶活性没有明显抑制作用（P〉0.05）。结论 3′-羟基葛根素能促进胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖利用、抑制FFA产生,从而改善胰岛素抵抗,其机制可能与上调PPARγ基因表达有关。
- 王小康刘清霞叶开和魏崧丞马锦锦叶春玲
- 关键词：3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗过氧化物酶体增殖物激活受体Γ蛋白酪氨酸磷酸酶1B
- 番石榴叶总三萜改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗被引量：5
- 2016年
- 目的：观察番石榴叶总三萜（TTPGL）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化,给予TTPGL（0.3、1、3、10μg/L）,并设溶媒（0.1%DMSO）组、阳性药正钒酸钠（Van,10μmol/L）组、正常对照（control）组和模型（model）组,药物作用48 h。MTT法检测药物对前脂肪细胞活力的影响,油红O染色法观察其对细胞分化的影响。建立IR模型后,药物处理48 h,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD）检测IR脂肪细胞上清液中葡萄糖消耗量;比色法检测游离脂肪酸（FFA）水平;ELISA法检测脂肪因子分泌水平;real-time PCR检测IR脂肪细胞蛋白酪氨酸激酶1B（PTP1B）的mRNA表达量;Western blot检测磷酸化胰岛素受体底物1/胰岛素受体底物1（p-IRS-1/IRS-1）和磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B（p-Akt/Akt）的蛋白水平。结果：与溶媒组比较,TTPGL显著提高了前脂肪细胞的活力并抑制其分化（P〈0.01）。与IR溶媒组比较,无论在基础状态下还是胰岛素刺激状态下,TTPGL（1-10μg/L）均显著地促进了IR脂肪细胞葡萄糖消耗（P〈0.01）;TTPGL（0.3～3μg/L）显著抑制FFA的产生（P〈0.01）。与模型组比较,TTPGL（0.3和3μg/L）显著增加IR脂肪细胞脂联素的分泌（P〈0.05）并抑制TNF-α的分泌（P〈0.01）,TTPGL（3μg/L）对抵抗素的分泌有显著抑制作用（P〈0.05）,对瘦素分泌无显著作用;TTPGL（3μg/L）显著下调IR脂肪细胞PTP1B的mRNA表达（P〈0.01）;TTPGL（3μg/L）极显著上调p-IRS-1/IRS-1的水平;TTPGL（0.3和3μg/L）显著上调p-Akt/Akt的蛋白水平（P〈0.05）。结论：TTPGL具有显著改善3T3-L1脂肪细胞IR的作用,其作用机制可能与TTPGL下调了IR脂肪细胞PTP1B mRNA的表达、同时上调p-IRS-1/IRS-1和p-Akt/Akt的蛋白水平有关。
- 李秀存马锦锦赵晶晶叶开和吕艳青王小康魏崧丞张晓琦叶春玲
- 关键词：胰岛素抵抗胰岛素受体底物1蛋白激酶B
- 番石榴酸改善INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗被引量：3
- 2015年
- 目的考察番石榴酸对INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预INS-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素抵抗模型组,正钒酸钠组(1 mmol/L)和罗格列酮组(1 mmol/L),药物作用48 h。分别以5.6、16.7 mmol/L葡萄糖干预细胞1 h作为基础胰岛素分泌(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌(GSIS)条件,用放射免疫法检测药物对胰岛素分泌的影响,结果以该细胞总蛋白量校正。荧光定量PCR法检测药物对胰岛素抵抗INS-1细胞内PTP1B、PPARγmRNA表达的作用。结果与胰岛素抵抗模型组比较,0.3 nmol/L番石榴酸便能促进胰岛素抵抗INS-1细胞的GSIS(P<0.05或P<0.01);1 nmol/L番石榴酸即可显著促进基础胰岛素分泌(P<0.01)。0.3、3、30 nmol/L番石榴酸均能显著下调胰岛素抵抗INS-1细胞的PTP1B mRNA相对表达(P<0.05或P<0.01),其中0.3和3 nmol/L番石榴酸下调作用优于正钒酸钠,上调PPARγmRNA相对表达作用优于罗格列酮。结论番石榴酸能够改善INS-1细胞胰岛素抵抗,可能通过下调PTP1B和上调PPARγ基因表达有关。番石榴酸可能通过改善胰岛β细胞自身胰岛素抵抗而发挥抗糖尿病作用。
- 魏崧丞王婧茹叶开和王小康马锦锦张晓琦叶文才叶春玲
- 关键词：胰岛素抵抗PTP1BPPARΓ
- 积雪草酸改善小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的:观察番石榴叶三萜化合物积雪草酸对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化以及胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢的影响并探讨其作用机制。方法:MTT法检测药物对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;油红O染色法观察药物对其分化的影响。地塞米松诱导建立脂肪细胞胰岛素抵抗模型,药物干预后采用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗量;比色法检测游离脂肪酸浓度;ELISA法检测脂联素水平;Western blotting法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)蛋白表达的变化。结果:与溶媒对照组相比,积雪草酸在10～100μmol/L时能显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,但明显抑制其分化(P<0.05或P<0.01);在30和100μmol/L时,无论是基础状态还是胰岛素刺激状态,均能显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖的消耗,减少游离脂肪酸的产生(P<0.05);其对胰岛素抵抗脂肪细胞的脂联素分泌和PPARγ蛋白表达无明显影响(P>0.05),但能显著下调PTP1B蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:积雪草酸能显著改善脂肪细胞胰岛素抵抗,增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖的消耗和减少游离脂肪酸的产生,其机制可能是其下调胰岛素信号转导的负性调节因子PTP1B的表达,增强胰岛素信号转导,从而改善胰岛素抵抗。
- 刘清霞叶开和王婧茹叶春玲黄仪张晓琦叶文才
- 关键词：积雪草酸3T3-L1前脂肪细胞胰岛素抵抗蛋白酪氨酸磷酸酶1B
- 葛根异黄酮类化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及构效分析被引量：18
- 2015年
- 目的观察葛根异黄酮类化合物对α-葡萄糖苷酶活性的影响,并分析其构效关系。方法以蔗糖作为底物,优化反应条件,建立α-葡萄糖苷酶-蔗糖筛选模型,观察葛根异黄酮类化合物(0.1、1、10、100μmol/L)对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果大豆素、刺芒柄花素、大豆苷、3'-甲氧基大豆素、葛根素、3'-甲氧基葛根素对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用,其中大豆素、刺芒柄花素在100μmol/L时对α-葡萄糖苷酶的抑制作用明显强于阿卡波糖(P<0.01),其抑制率分别达37.56%和32.11%。3'-羟基葛根素在0.1μmol/L时的抑制作用较强,但在100μmol/L的作用减弱。经构效分析发现:在大剂量时,异黄酮母核的3位和5位的取代基为羟基且其他位未被取代时,其抑制作用增强;4位取代基为糖氧基,活性将减弱;若为多糖氧基,其活性会更弱;6位为取代基为羟基,在低浓度时有较强的抑制作用,而在高浓度下作用很弱;若6位为甲氧基时,且4位被糖氧基取代时,活性减弱。结论葛根异黄酮类化合物对α-葡萄糖苷酶活性具有一定抑制作用,其中大豆素、刺芒柄花素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较强。
- 马锦锦林娟娜魏崧丞叶开和刘清霞王小康叶春玲
- 关键词：异黄酮类化合物Α-葡萄糖苷酶构效关系
- 番石榴叶三萜化合物乌苏酸对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化及胰岛素抵抗的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨番石榴叶三萜化合物乌苏酸对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化及胰岛素抵抗的影响及其机制。方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,给予不同药物作用48 h后,采用MTT法检测对细胞增殖的影响;采用油红-O染色法对细胞分化的影响。以地塞米松诱导分化成熟的脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,给予相应的药物后干预48 h。采用GOD-POD法、比色法和ELISA法检测细胞培养上清液中葡萄糖、游离脂肪酸含量及脂联素水平;Western blotting分析脂肪细胞中PPARγ和PTP1B的表达。结果:与溶媒对照组比较,30、100μmol/L乌苏酸能显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化(P<0.05或P<0.01)。乌苏酸在30μmol/L时即可显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗,同时能明显减少胰岛素抵抗脂肪细胞游离脂肪酸的产生(P<0.05),也能显著促进脂联素分泌(P<0.05);在100μmol/L时上调PPARγ蛋白表达(P<0.05),但对PTP1B蛋白表达无明显影响(P>0.05)。结论:乌苏酸促进3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化,增加脂肪细胞葡萄糖摄取,抑制游离脂肪酸产生,促进脂联素分泌,对脂肪细胞胰岛素抵抗有明显的改善作用,其机制可能与上调PPARγ蛋白表达、提高胰岛素敏感性有关。
- 林娟娜匡乔婷叶开和叶春玲黄仪张晓琦叶文才
- 关键词：乌苏酸胰岛素抵抗PTP1B
- 番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析被引量：10
- 2014年
- 目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％ DMSO）、分泌模型组及阳性药组（150 nmol·L^－1格列苯脲含1‰DMSO），药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^－1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型（BIS）、高糖刺激胰岛素分泌模型（GSIS），用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响，结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较，GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖（P ＜0.01）并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量（P ＜0.01），0.3～30 nmol·L －1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用（P ＜0.05或 P ＜0.01），0.3～30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖；增加细胞内胰岛素含量与分泌量，可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。
- 叶开和王婧茹马锦锦王小康张晓琦叶文才叶春玲
- 关键词：增殖胰岛素分泌基因表达
- 番石榴叶总三萜改善糖尿病周围神经病变被引量：9
- 2016年
- 目的观察番石榴叶总三萜(TTPGL)对糖尿病大鼠周围神经病变(DPN)的改善作用,并探讨其作用机制。方法采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为6组,石榴叶总三萜低、中、高剂量组[30、60、120 mg/(kg·d)],正常组,模型组和罗格列酮组。测定坐骨神经运动传导速度(MCV)并对组织HE染色;利用RT-PCR检测坐骨神经组织肿瘤坏死因子-α(Tnfa),白细胞介素-6(Il6)和一氧化氮合酶(i NOS)mRNA的表达量;印迹法检测蛋白激酶B(AKT)、核转录因子κB激酶抑制因子IKKα、p65及其各自磷酸化蛋白表达。结果与模型组比较,石榴叶总三萜(120 mg/kg)组显著地改善了坐骨神经的神经病变(P<0.05);石榴叶总三萜显著性抑制各炎症因子mRNA的表达(P<0.05),并显著下调p-AKT/AKT、p-IKKα/IKKα、p-p65/p65的表达(P<0.01或P<0.05)。结论石榴叶总三萜具有显著改善DPN的作用,其机制可能通过下调NF-κB介导的信号通路,从而减少炎症介质产生。
- 叶开和王小康吕艳青魏崧丞李秀存张晓琦叶春玲
- 关键词：糖尿病周围神经病变炎性介质NF-ΚB通路
