福建省发展和改革委员会项目([2004]477)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：黄建忠江贤章林晓华田宝玉李力更多>>
- 相关机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省发展和改革委员会项目引进国际先进农业科技计划福建省科技厅重大项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 木聚糖酶高产菌株的鉴定及产酶条件的优化被引量：3
- 2009年
- 目的:通过了解木聚糖酶高产菌株A79的遗传背景,并优化其产木聚糖酶的液体发酵条件,为下一步工业化生产和木聚糖酶制剂的研制奠定基础。方法:通过形态观察和18S rDNA基因的分子系统进化分析,对菌株A79进行鉴定;通过单因素和均匀设计试验,优化其产胞外木聚糖酶的液体发酵条件。结果:通过对18S rDNA基因的分子系统进化分析,菌株A79被鉴定为黑曲霉(Aspergillus nigerA79)。其最佳产酶培养基为:玉米芯5.0%,麸皮0.5%,纤维物质1.0%,玉米浆1.1%,(NH4)2SO40.8%,蛋白胨0.8%,CaCO30.5%,KH2PO40.23%,MgSO4.7H2O 0.08%,微量元素(Mandels)0.08%,pH自然。最佳发酵条件为:接种量5%(2.0×107),28℃2、50r/min振荡培养96h。结论:经优化培养,酶活力由前期的50 000u/ml提高到90 000u/ml,增加了近50%。
- 徐燕田宝玉江贤章黄钦耿王春香黄建忠
- 关键词：木聚糖酶系统进化分析产酶条件
- 酿酒酵母SNF4基因敲除缺失菌株的构建被引量：8
- 2011年
- 构建一株酿酒酵母SNF4基因缺失菌株并研究其对乙醇产量的影响。扩增带有SNF4基因上下游同源序列和Kanr筛选标记的SNF4基因敲除组件,转化到酿酒酵母YS2获得阳性克隆子,然后将质粒pSH65转到阳性克隆子中,半乳糖诱导pSH65表达Cre酶切除Kanr筛选标记,获得SNF4等位基因完全缺失菌株YS2-△SNF4。发酵实验结果表明,缺失菌株YS2-△SNF4乙醇产量较出发菌株提高了7.57%。利用Cre-LoxP系统,成功构建了SNF4等位基因完全缺失菌株并提高乙醇产生量。
- 林晓华柯崇榕吴毕莎郑永标李力陈由强黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 酿酒酵母HOR2基因缺失突变株的构建被引量：2
- 2010年
- 目的:构建酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株并研究其对甘油和乙醇产量的影响。方法:以PCR为基础,通过同源重组的方式使目的基因缺失。结果:通过设计含有与HOR2(GPP2)基因两侧序列同源的长引物,以质粒PUG6为模板进行PCR构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母HOR2基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS2,获得为loxP-kan-loxP序列组件所替换而产生kanr的阳性克隆子。然后再将质粒PSH65转入阳性克隆子诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得HOR2单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除。发酵实验表明,突变株甘油产量降低3.34%,乙醇产量提高1.96%。结论:成功获得了酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株,并命名为YS2-HOR2。
- 陈永金林晓华王艳尊雷娟娟黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除乙醇甘油
- γ-亚麻酸产生菌Mucor sp. EIM-10的筛选及分子鉴定被引量：4
- 2009年
- 为了获得高产γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)的菌株,利用苏丹黑染色法筛选获得1株GLA产生菌EIM-10,通过摇瓶培养,其生物量可达11.882 g/L,菌丝体油脂含量可达18.86%。气相色谱-质谱(GC-MS)分析表明其γ-亚麻酸质量分数(占总脂肪酸)高达27.68%。为进一步鉴定该菌株,克隆测定了该菌18S rRNA基因序列,并对其进行系统进化树分析,结果表明该菌属于毛霉属,与Mucor racemosus、Mucor plumbeus、Mucor ramosissimus与Mucorcircinelloides同属一个分支。
- 于爱群江贤章夏晓峰吴松刚黄建忠
- 关键词：Γ-亚麻酸MUCOR进化树RRNA
- 破囊壶菌Δ~4-脂肪酸脱饱和酶基因5'端侧翼区域的克隆与鉴定被引量：5
- 2008年
- 应用衔接头PCR(LA-PCR)技术,扩增得到约1000 bp的海洋破囊壶菌Δ4-脱饱和酶基因5’端侧翼区域的单一产物.对该产物测序,经启动子软件与序列比对分析,发现该序列(Genkbank登录号EU074209)具有真核启动子序列的基本结构特征,含有TATA盒、CAAT盒、INR等元件.将扩增得到的脱饱和酶基因5’端侧翼序列亚克隆到含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒pGlow-TOPO中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞.荧光显微观察大肠杆菌阳性转化子发出荧光,侧翼序列含有启动子功能得到确认.
- 江贤章陈金卿田宝玉高媛媛舒正玉李欣蓝灿华黄建忠
- 关键词：破囊壶菌启动子绿色荧光蛋白
