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广东省博士启动基金(8451064201001131)

作品数：6 被引量：4H指数：1
相关作者：廖明樊惠英程晓亮林文耀陈筱薇更多>>
相关机构：华南农业大学四川农业大学更多>>
发文基金：广东省博士启动基金国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
相关领域：农业科学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇农业科学

主题

  • 5篇病毒
  • 4篇杆状
  • 4篇杆状病毒
  • 2篇蛋白
  • 2篇圆环病毒
  • 2篇重组杆状病毒
  • 2篇猪圆环病毒
  • 2篇猪圆环病毒2...
  • 2篇鸡传染性
  • 2篇鸡传染性支气...
  • 2篇S1蛋白
  • 2篇传染
  • 2篇传染性
  • 2篇传染性支气管...
  • 1篇电泳
  • 1篇衣壳
  • 1篇衣壳蛋白
  • 1篇疫病
  • 1篇圆环病毒2型
  • 1篇真核

机构

  • 6篇华南农业大学
  • 1篇四川农业大学

作者

  • 6篇樊惠英
  • 6篇廖明
  • 5篇林文耀
  • 5篇程晓亮
  • 4篇陈筱薇
  • 2篇任涛
  • 2篇叶煜
  • 1篇罗开健
  • 1篇张桂红
  • 1篇严常燕
  • 1篇叶昱
  • 1篇张停婷
  • 1篇卢受昇
  • 1篇罗琼
  • 1篇陈春丽

传媒

  • 6篇华南农业大学...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 1篇2009
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
双表达H9N2禽流感病毒HA基因的假型重组杆状病毒系统的构建
2011年
以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9-HA.然后将含有CMV启动子、H9HA及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-G,得到重组质粒pFastBac-G-H9-HA.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组穿梭载体Bacm id-G-H9-HA.利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-Dual-H9-HA.间接免疫荧光实验表明,该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达HA蛋白.免疫电镜观察结果表明,HA蛋白可以在该重组杆状病毒表面展示.
林文耀樊惠英程晓亮陈筱薇叶煜廖明
关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因
表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建
2011年
利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白.
程晓亮林文耀叶煜陈筱薇严常燕廖明樊惠英
关键词：猪圆环病毒2型
对不同表达系统的猪圆环病毒2型Rep蛋白的电泳特性分析被引量：1
2010年
利用特异性引物从圆环病毒2型(PCV2)毒株克隆出Rep基因,并将其插入到原核表达载体pET28 a和杆状病毒转移载体pFastbacHT(B)上,利用大肠杆菌BL21(DE3)株原核系统以及Bac-to-Bac杆状病毒系统表达Rep蛋白.Western-blotting表明,原核和真核表达系统均能表达出圆环病毒2型Rep蛋白,电泳分析表明,不同系统表达得到的Rep蛋白有不同的电泳特性,揭示Rep蛋白存在翻译后修饰.
张停婷程晓亮林文耀陈筱薇张桂红廖明樊惠英
关键词：圆环病毒2型REP蛋白真核表达杆状病毒表达系统
表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建
2012年
以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白.
陈筱薇樊惠英林文耀程晓亮叶昱陈春丽廖明
关键词：鸡传染性支气管炎病毒M41S1蛋白重组杆状病毒
表达鸡传染性支气管病毒S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建被引量：2
2010年
根据鸡传染性支气管炎病毒M41株的基因序列(GenBank:AY851295.1),设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增其S1基因,并将扩增产物克隆到杆状病毒转移质粒pFast-VSV-G-CMV中,获得重组质粒pFast-VSV-G-CMV-S1,进一步将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组穿梭载体Bacm id-CMV-S1,再利用脂质体转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒Ac-V-S1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达S1蛋白.
罗琼樊惠英罗开健林文耀程晓亮任涛廖明
关键词：鸡传染性支气管炎S1基因
口蹄疫病毒实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
2009年
基于口蹄疫病毒聚合酶3D蛋白基因的序列分析,设计合成了特异的引物和探针,通过反应条件的优化,建立了实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.试验表明,实时TaqMan荧光定量RT-PCR能特异性检测A、O、Asia I 3种血清型的口蹄疫病毒,对猪水泡病、猪瘟、蓝耳病等猪常见病原检测结果均为阴性.对比检测试验表明,实时Taq-Man荧光定量RT-PCR的检测敏感性比常规的多重RT-PCR提高达105倍,对口蹄疫病毒细胞增殖病毒液的检测灵敏度可达0.063个TCID50.对临床样品的检测试验证实,该方法可以有效检测临床样品中的猪水泡皮、组织、血清及O-P液中的口蹄疫病毒.
卢受昇樊惠英孙彦伟任涛卢洪芬闫晓菊孔令辰查云峰廖明
关键词：口蹄疫病毒病毒检测TAQMAN探针
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