国家自然科学基金(30572093)
- 作品数：20 被引量：78H指数：7
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- 相关机构：河北医科大学第四医院中国人民解放军白求恩国际和平医院河北省人民医院更多>>
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- PI3K/Akt信号转导通路阻断剂对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响
- 2009年
- 目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸—苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号转导通路阻断剂LY294002对卵巢癌细胞顺铂(DDP)敏感性的影响。方法DDP和LY294002单独或联合作用人卵巢癌细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,倒置显微镜观察凋亡细胞形态,流式细胞术检测凋亡细胞。结果加用LY294002后,DDP对卵巢癌细胞的抑制作用增强,细胞凋亡率上升。结论PI3K/AKt信号转导通路阻断剂可有效提高卵巢癌细胞对DDP的敏感性,在卵巢癌治疗中与DDP有一定协同作用。
- 刘红房朝晖徐志红吴小华
- 关键词：LY294002信号转导通路卵巢肿瘤卵巢癌顺铂
- 卵巢癌患者血清SMRP和HE4的表达及其临床意义被引量：8
- 2011年
- 目的探讨血清可溶性间皮素相关蛋白(SMRP)和人附睾蛋白-4(HE4)在卵巢癌早期诊断及病情监测中的临床意义。方法血清标本取自44例卵巢癌、56例良性肿瘤及40例健康志愿者。ELISA试剂盒测定血清HE4和SMRP,化学发光法测定CA125。结果卵巢癌组血清CA125、HE4和SMRP高于其他两组。经过理想肿瘤减灭术的卵巢癌术后1 w血清CA125、HE4和SMRP水平明显减低。在诊断效能上,单独检测HE4特异度为100.00%,灵敏度86.36%;SMRP灵敏度77.27%,特异度97.92%;二者与CA125联合检测均可提高灵敏度或特异度。结论 HE4和SMRP补充完善了CA125用于卵巢癌的早期诊断和病情监测,具有较高的临床应用价值。
- 刘丽萍吴小华梁红霞
- 关键词：卵巢肿瘤
- 血清间皮素在卵巢上皮性癌诊断和病情监测中的价值被引量：2
- 2010年
- 间皮素（mesothelin）是一种肿瘤细胞表面的糖蛋白抗原，通常只在体腔表面的间皮细胞、恶性间皮瘤、卵巢上皮性癌（卵巢癌）、胰腺癌中表达。间皮素的cDNA编码相对分子质量为71000的多肽前体，此前体可以被酶解成两部分，一部分40000的片段通过糖基磷脂酰肌醇锚定于细胞表面称作间皮素，位于细胞膜上的间皮素经过进一步的酶修饰，形成两个异构体，其中一个异构体可以从细胞表面脱落，
- 李冬秀吴小华刘博君曹瑾吴艳霞郝明
- 关键词：卵巢上皮性癌间皮素病情监测肿瘤细胞表面血清
- 慢病毒介导的RNAi对卵巢癌细胞增殖及间皮素表达的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:构建间皮素(mesothelin,MSLN)RNAi重组慢病毒质粒,探讨其对卵巢癌OVCAR-3细胞MSLN的表达及细胞增殖的影响。方法:根据MSLN基因信息,设计了4个小干扰序列和1个阴性对照序列,利用慢病毒质粒载体pRNAT-U6.2/Lenti构建了5个重组质粒并进行了慢病毒包装,分别为LV-MSLN-negative、LV-MSLN-shRNA2、LV-MSLN-shRNA3、LV-MSLN-shRNA4;感染OVCAR-3细胞后,Westernblotting和荧光免疫组化检测干扰效率,选择干扰效率高的质粒载体进行慢病毒大量包装;感染卵巢癌细胞OVCAR-3后,用细胞增殖实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖的变化。结果:测序结果证明5种质粒载体的插入序列完全正确,鉴定证明慢病毒包装成功。慢病毒感染OVCAR-3细胞后,Westernblotting证实重组慢病毒LV-MSLN-shRNA4的干扰效率最高,对MSLN蛋白表达的抑制达90%。荧光免疫组化的共聚焦照片显示干扰组(OVC-shRNA)定位于细胞膜的MSLN蛋白表达明显弱于阴性对照组(OVC-neg)和空白对照组(OVC)。OVC-shRNA组细胞增殖[(11.2±1.3)×105]显著慢于OVC-neg组[(20.5±2.5)×105]和OVC组[(21.9±2.3)×105](P<0.05)。OVC-shRNA组克隆形成率为(15.2±2.1)%,明显低于OVC-neg组[(27.9±2.5)%]和OVC组[(28.8±3.1)%](P<0.05)。结论:成功构建MSLNRNAi重组慢病毒质粒LV-MSLN-shRNA4,它能有效抑制卵巢癌OVCAR-3细胞的MSLN表达及细胞增殖,为进一步研究MSLN应用于肿瘤基因治疗奠定了基础。
- 王莉李娜吴小华
- 关键词：间皮素RNA干扰慢病毒细胞增殖
- 小干扰RNA介导的间皮素沉默促进顺铂诱导的卵巢癌耐药细胞SKOV3/cDDP的凋亡被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)介导的间皮素(mesothelin,MSLN)沉默对顺铂(cisplatin,cDDP)诱导的卵巢癌耐药细胞SKOV3/cDDP凋亡的影响。方法:应用蛋白质印迹法检测SKOV3/cDDP细胞MSLN蛋白的表达。通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术干扰耐药细胞SKOV3/cDDP MSLN表达,建立稳定感染的细胞株SKOV3/cDDP-LV-MSLN-RNAi。应用MTT法和集落形成实验检测SKOV3/cDDP-LV-MSLN-RNAi细胞对cDDP的敏感度,FCM检测cDDP诱导的细胞凋亡。结果:SKOV3/cDDP细胞MSLN蛋白的表达水平明显高于SKOV3细胞(P=0.000);cDDP对干扰组SKOV3/cDDP-LV-MSLN-RNAi细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)值明显低于阴性组SKOV3/cDDP-LV-MSLN-neg和空白组SKOV3/cDDP细胞(P=0.000);干扰组细胞的集落形成抑制率和凋亡率明显高于阴性组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MSLN沉默可促进cDDP诱导的卵巢癌耐药细胞凋亡,在一定程度上逆转cDDP耐药。MSLN可能在卵巢癌cDDP耐药中发挥重要作用。
- 刘丽萍吴小华梁红霞
- 关键词：间皮素
- 溶血磷脂酸受体在卵巢癌细胞系3AO、OVCAR3、SKOV3及卵巢癌组织中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:研究溶血磷脂酸受体在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中蛋白的表达。方法:用免疫细胞化学和免疫组织化学法检测LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系3AO、OVCAR3、SKOV3和人卵巢癌组织中的表达水平。结果:免疫细胞化学显示LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系中均有表达;免疫组织化学显示LPA1蛋白在正常卵巢上皮和卵巢良性肿瘤中高表达,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌组织中高表达。结论:LPA1,LPA2和LPA3在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中均有广泛表达;LPA2,LPA可能与卵巢癌的发生发展密切相关。
- 刘红房朝晖王娟吴小华
- 关键词：受体溶血磷脂酸细胞系
- 血清可溶性间皮素相关肽在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断中的应用被引量：4
- 2012年
- 目的探讨血清可溶性间皮素相关肽(SMRP)在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断中的临床意义。方法血清标本取自2008年1月至2010年7月白求恩国际和平医院100例卵巢肿物患者及40例健康志愿者,ELISA试剂盒测定血清SMRP,化学发光法测定血清CA125,比较血清SMRP和CA125在卵巢良恶性肿瘤中的分布,绘制SMRP的ROC曲线,确定最佳截断值,评价诊断效能。结果卵巢癌组血清SMRP高于良性肿瘤组和健康对照组(P=0.000),良性肿瘤组与健康对照组相比差异无统计学意义(P=0.072)。SMRP的最佳截断值为1.103nmol/L,敏感度(77.27%)稍低,但特异度(97.92%)明显高于CA125。与临床诊断一致性方面,SMRP略优于CA125。结论血清SMRP可能是卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断的良好指标。
- 刘丽萍吴小华梁红霞李冬秀
- 关键词：卵巢肿瘤
- siRNA介导的间皮素基因沉默对卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:研究间皮素(mesothelin,MSLN)基因被沉默后的卵巢癌细胞SKOV3-MSLN-shRNA增殖能力的变化,以及MSLN基因沉默对裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤生长的影响。方法:利用针对MSLN基因的siRNA慢病毒液和对照组慢病毒液分别感染SKOV3细胞,建立SKOV3-MSLN-shRNA细胞和SKOV3-MSLN-neg细胞的稳定转染株;以SKOV3细胞作空白对照,用平板克隆形成法和细胞计数法检测3组细胞的增殖能力。应用3组细胞分别建立裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤模型,2周后处死裸鼠,观察每组动物的成瘤率及每只裸鼠的肿瘤质量、肿瘤数目和肿瘤种植部位等。结果:SKOV3-MSLN-shRNA细胞的体外增殖能力明显低于SKOV3-MSLN-neg细胞和SKOV3细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。SKOV3-MSLN-shRNA组裸鼠成瘤率为60%,而2个对照组SKOV3-MSLN-neg和SKOV3细胞的裸鼠成瘤率均为100%,差异无统计学意义(P>0.05)。SKOV3-MSLN-shRNA组动物的肿瘤数目、肿瘤质量及肿瘤种植部位明显低于2个对照组(P<0.05)。结论:MSLN基因沉默可以降低卵巢癌SKOV3细胞的体外增殖能力,同时可以抑制卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的生长和种植。
- 李冬秀吴小华张蕾王莉曹瑾刘博君
- 关键词：基因沉默异种移植模型抗肿瘤试验间皮素
- 复发性卵巢上皮癌干细胞标志物BCRP与相关因子的表达及其临床意义被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤干细胞标志物及相关因子在复发性卵巢上皮性癌中的表达及意义。方法:免疫组化检测30例同一位卵巢癌患者初治与复发时手术切除的配对组织标本中干细胞标志物乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及相关因子、P糖-蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)、蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达,结合临床病理及随访资料进行分析。结果:(1)BCRP过度表达与卵巢癌复发明显相关(P<0.05),而P-gp、LRP和Akt过度表达与卵巢癌复发无显著相关性(P>0.05);(2)与初发癌相比,复发卵巢癌低分化癌构成比显著上升(P<0.05);(3)BCRP的表达与患者病理分级显著相关(P<0.05),而P-gp、LRP、和Akt与患者病理分级无关(P>0.05);(4)BCRP、P-gp、LRP和Akt表达阴性患者化疗反应率明显高于表达阳性的患者(P<0.05);(5)在复发卵巢癌组织中BCRP与P-gp、LRP、Akt表达均呈正相关关系(rs=1.0,P<0.01)。结论:BCRP表达与卵巢癌复发、获得性耐药显著相关,与卵巢癌的失分化程度亦密切相关,提示肿瘤干细胞持续存在与增长可能是导致卵巢癌复发的主要原因。
- 徐志宏吴小华王小玲刘红
- 关键词：乳腺癌耐药蛋白肺耐药蛋白蛋白激酶B
- 间皮素与CA125在卵巢癌中的共定位表达及意义被引量：8
- 2008年
- 目的通过对上皮性卵巢癌中间皮素和CA125的表达、定位和细胞黏附的研究,探讨间皮素的功能。方法采用间接免疫荧光双标记染色法、Western blot检测间皮素和CA125的表达及定位,通过人工基底膜成分的黏附实验和EDTA介导的细胞分离实验检测细胞黏附功能。结果间皮素和CA125主要分布在细胞膜,间皮素蛋白在3种细胞系表达由强到弱依次为OVCAR-3、SKOV-3、3AO,3AO和SKOV-3对塑料基质和人工基底膜Matrigel的黏附能力明显低于OVCAR-3(P<0.01)。结论在3种卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中间皮素和CA125均有不同程度的表达,存在共定位关系,间皮素的表达与细胞黏附功能相关联。
- 王莉李娜吴小华
- 关键词：间皮素CA125卵巢肿瘤
