山西省自然科学基金(2012011038-6)
- 作品数：8 被引量：11H指数：3
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- 相关机构：山西医科大学第二医院山西医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒载体及其在肿瘤基因治疗中的研究应用被引量：3
- 2014年
- 慢病毒载体（LV）是逆转录病毒载体中的特殊成员，已成为当前基因治疗载体研究的热点。研究表明LV可使目的基因稳定表达于肿瘤细胞，在消化系统、血液系统及妇科肿瘤等基因治疗中作为转运工具发挥了重要作用，为肿瘤基因治疗提供了新途径。
- 牛鑫邓志华
- 关键词：慢病毒属肿瘤基因疗法
- 短发夹RNA沉默YAP表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的本实验通过短发夹RNA(shRNA)抑制Yes相关蛋白(YAP)基因的表达,并观察其对肝癌细胞SMMC-7721的增殖、凋亡和周期影响。方法以人YAP mRNA编码区中的4条序列作为RNA干扰靶点,分别构建4个真核表达载体质粒YAP-shRNA-1、YAP-shRNA-2、YAP-shRNA-3、YAP-shRNA-4,用阳离子聚合物转染法瞬时转染,筛选出2个干扰效果较好的质粒,将它们瞬时转染肝癌细胞SMMC-7721,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测SMMC-7721细胞中YAP在mRNA和蛋白水平表达的变化。噻唑蓝(MTT)法检测转染后细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化。结果转染后293T细胞中shRNA-YAP-2组与shRNA-YAP-4组YAP mRNA表达明显降低,在SMMC-7721中shRNA-YAP-2组与shRNAYAP-4组的YAP mRNA及蛋白表达水平分别为(0.871±0.081,0.106±0.013)和(1.010±0.097,0.192±0.013),与未转染组(2.399±0.148,0.372±0.007)比较差异有统计学意义(P<0.01)。MTT显示,shRNA-YAP-2、shRNA-YAP-4组细胞生长明显抑制,但未出现阻滞;流式细胞仪分析显示,shRNA-YAP-2组和shRNA-YAP-4组细胞凋亡率分别为(12.0±0.81)%和(5.03±1.01)%,明显高于空质粒组的(2.89±0.08)%(P<0.01)。细胞被阻滞在G2期,G0/G1期出现DNA亚二倍体峰。结论运用shRNA干扰技术,可以有效地干扰肝癌SMMC-7721细胞YAP的表达并能降低YAP的生成,抑制SMMC-7721细胞的增殖和促进细胞的凋亡。
- 王琪邓志华
- 关键词：肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡短发夹RNA
- 重组慢病毒LV-hTERT-tumstatin的构建及其对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的构建重组慢病毒LV-hTERT-tumstatin并探讨其对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同病毒感染复数(MOI)LV-hTERT-tumstatin感染肝癌细胞HepG2及正常肝细胞L02,荧光显微镜下观察转染情况,MTT法检测两种细胞增殖情况,流式细胞术检测两种细胞凋亡情况。结果重组慢病毒LV-hTERT-tumstatin转染后在肝癌HepG2细胞中特异表达,在L02细胞中无表达。肝癌细胞HepG2的生长抑制率随MOI增加而逐渐增加,L02细胞生长无明显变化。慢病毒治疗组HepG2细胞凋亡率达(48.39±3.32)%,明显高于空白对照组(3.96±0.94)%(P<0.05),而对L02细胞作用不明显(P>0.05)。结论重组慢病毒LV-hTERT-tumstatin可靶向抑制肝癌HepG2细胞增殖和促进HepG2细胞凋亡。
- 孟昱希邓志华牛鑫
- 关键词：肿瘤抑素增殖凋亡
- 慢病毒介导hTERTp-TK与hTERTptumstatin联合对HepG2细胞的抑制作用
- 2015年
- 目的观察重组慢病毒Lv-hTERTp—TK与Lv-hTERTp-tumstatin在肝癌HepG2细胞中的靶向表达，探讨二者联合在体内外对HepG2细胞的抑制作用。方法用不同MOI重组慢病毒Lv-hTERTp-TK、Lv-hTERTp-tumstain转染肝癌细胞HepG2、正常肝细胞L02，72h后荧光显微镜观察转染情况；逆转录PCR检测TK、tumsmtin mRNA在HepG2、L02细胞中的表达；四甲基偶氮唑蓝法观察两种细胞增殖情况；流式细胞术检测两种细胞凋亡情况；RT-PCR、Western blot检测HepG2细胞bcl-2、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白的表达；将HepG2细胞接种于30只BALB／c裸鼠皮下，构建动物移植瘤模型，随机分为5组，空白对照组、空载体组、tumstain组、TK组及联合组，每组6只，瘤内分别注射磷酸盐缓冲溶液、空载体慢病毒Lv—hTERTp-eGFP、重组慢病毒Lv-hTERTp-tumstatin、重组慢病毒Lv-hTERTp—TK和重组慢病毒Lv-hTERTp-tumstatin＋Lv-hTERTp-TK；4周后处死裸鼠，观察各组移植瘤体积及质量的变化；行HE染色进行各组肿瘤组织及主要脏器的形态学观察；免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度；TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率。数据采用方差分析。结果转染后TK、tumstatin基因在HepG2细胞中特异表达，在L02细胞中无表达。TK组、tumstatin组及联合组均对HeDG2细胞生长有抑制作用，联合组抑制率明显高于单基因作用组（F=731．679，P〈0．05），各组L02细胞抑制率差异无统计学意义（F=0．774，P〉0．05）；联合组HepG2细胞总凋亡率达72．61％±3．29％，明显高于TK组（53．63％±3．06%）、tumstatin组（45．13％±2．15％）、空白对照组（13．29％±1．15％）（F=365．022，P〈0．05），各组L02细胞凋亡率差异无统计学意义（F=0．391，P〉0．05）；与对照组相比，实验组HepG2细胞bcl-2及VEGF表达水平均下降（bcl-2mRNA：F=322．780，P〈0．05；VEGFmRNA：F=561．136，P〈0．05;bcl-2蛋白：F=34．203，
- 孟昱希牛鑫邓志华
- 关键词：慢病毒自杀基因肿瘤抑素
- IL-2在原发性肝癌中的作用及潜在临床应用价值被引量：3
- 2015年
- 作为T淋巴细胞亚群生长因子，白细胞介素-2（IL-2）一方面可有效抑制癌细胞增殖、降低致瘤性及转移性、改善癌组织局部微环境、增强癌细胞抗原性、降低肝炎病毒载量、强化机体抗肿瘤能力。另一方面IL-2增强了肿瘤的高凝状态。IL-2对于原发性肝癌的作用及其潜在临床应用价值有光明的研究前景。
- 庞婧邓志华
- 关键词：白细胞介素2肝肿瘤
- 误诊为肾炎的Castleman病1例并文献分析
- 2015年
- Castleman病是一种发病机制尚不清楚的淋巴组织增生性疾病,该疾病在国内外均不常见,容易误诊,须与淋巴瘤、浆细胞病及转移性肿瘤等疾病相鉴别。对全身多系统多部位受累特别是有淋巴结增大患者,要考虑Castleman病可能,并及时行病理活检和免疫组化检查，以实现早期诊断和治疗。
- 杨森林邓志华王高玲范晓红洪峰
- 关键词：CASTLEMAN病淋巴组织增生淋巴瘤
- 人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素联合人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷系统对肝癌HepG2细胞的作用被引量：1
- 2014年
- 目的 观察人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷（phTERT-TK/GCV）联合人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素（phTERT-tumstatin）对肝癌细胞HepG2凋亡以及肝癌相关基因甲胎蛋白（AFP）、RhoC的mRNA及蛋白表达情况的影响.方法 细胞分为未转染组、转染空质粒hTERT-EGFP组（空质粒组）、转染phTERT-tumstatin组（TM组）、转染phTERT-TK后加50 μg/ml GCV组（TK/GCV组）、共转染phTERT-tumstatin和phTERT-TK后加50μg/ml GCV组（MK组）.荧光显微镜观察转染肝癌细胞HepG2和肝细胞L-02中EGFP与MCHERRY的表达;采用实时荧光定量PCR与Western blot检测各组AFP与RhoC在mRNA及蛋白水平表达的变化,流式细胞术检测各组转染后HepG2凋亡状况.结果 phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV转染后两基因在肝癌细胞HepG2特异性表达;TK/GCV组、TM组及MK组AFPmRNA相对表达量分别为0.76±0.09、0.62±0.09、0.49±0.07,RhoC mRNA相对表达量分别为0.80±0.04、0.40±0.02、0.54±0.03,与空质粒组（0.94±0.04、0.94±0.02）比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,且MK组较TK/GCV组、TM组AFP、RhoC mRNA相对表达差别显著.TK/GCV组、TM组、MK组、空质粒组和未转染组的AFP蛋白相对表达水平分别为0.97±0.02、0.83±0.02、0.69±0.01、1.19±0.03、1.15±0.05,RhoC蛋白相对表达水平分别为1.17±0.01、0.99±0.02、0.77±0.02、1.32±0.05、1.29±0.30（均P＜ 0.01）.phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV共同转染HepG2细胞的凋亡率较二者单独转染组显著升高,二者单独及共转染组凋亡率较转染空质粒组及未转染组差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 phTERT-TK/GCV及phTERT-tumstatin对肝癌细胞HepG2有显著促凋亡的作用,二者联合作用更强.
- 王静邓志华
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶肿瘤抑素肝肿瘤HTERT启动子
- 腹膜假性黏液瘤的病理特征及潜在的治疗前景
- 2015年
- 1884年Werth首次引入了术语腹膜假性黏液瘤（PMP）,其发病率约为一百万分之二[1],由NIH罕见病研究办公室（ORDR）和罕见疾病国家组织（NORD）列为一种罕见的疾病。PMP是一种无痛性肿瘤,常在疾病的晚期发现,易被误诊。尽管联合应用外科手术与腹腔化疗,但它仍然易复发且严重影响患者的生活质量。
- 王高玲邓志华范晓红杨森林洪峰
- 关键词：腹膜假性黏液瘤腹腔化疗黏蛋白腹腔积液减瘤术
