国家自然科学基金(30973911)
- 作品数：9 被引量：59H指数：5
- 相关作者：李平张浩军赵婷婷路晓光董晞更多>>
- 相关机构：中日友好医院沈阳药科大学华北煤炭医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达
- 2012年
- 目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。
- 孙斯凡古艳婷李平王红盼董晞杨靖赵婷婷王旭
- 关键词：重组质粒糖尿病肾病
- 糖肾方对糖尿病肾病大鼠纤溶功能的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠纤溶功能的影响。方法:Wistar大鼠利用单侧肾切除合并腹腔注射链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型,随机分为模型组、蒙诺组(0.833g/kg)、糖肾方大剂量组(2.67g/kg)和糖肾方小剂量组(1.33g/kg),每组10只;另取10只进行假手术后腹腔注射柠檬酸缓冲液作为空白组。各实验组每日灌胃给药1次,连续给药12周。每4周检测血糖和尿蛋白/肌酐水平。实验结束时处死大鼠,取血检测总胆固醇、甘油三酯、组织型纤溶酶原激活物(TPA)、纤溶酶原活化物抑制因子(PAI)、纤维蛋白降解产物(FDP)水平,取肾组织进行病理组织学观察。结果:糖肾方大剂量能显著降低模型大鼠尿蛋白/肌酐(P<0.05),减少血清胆固醇和甘油三酯水平(P<0.05,P<0.01);糖肾方大、小剂量均可显著上调TPA含量,下调PAI及FDP水平;减轻模型大鼠肾小球和肾小管间质损害。结论:糖肾方对糖尿病肾病大鼠具有肾保护作用,其作用机制可能与降低血脂代谢,调节纤溶功能有关。
- 郭景珍万方张浩军李忻李平董晞赵婷婷胥荣东
- 关键词：糖肾方糖尿病肾病血脂纤溶功能
- 糖尿病肾病模型大鼠中存在蛋白降解途径失调被引量：5
- 2011年
- 目的研究蛋白酶体和自噬两条主要蛋白质降解途径在细胞体外及糖尿病肾病（DN）模型大鼠体内中的变化。方法原代培养SD大鼠肾小球系膜细胞，观察该细胞在高糖环境中的增殖情况。分别给予30mmol／L葡萄糖（HG组）、5．4mmol／L葡萄糖（NC组）孵育0h、8h、16h、72h，并用Western印迹法检测蛋白酶体途径蛋白酶体α各亚基（PSMAs）和自噬途径LC3蛋白的表达。以自发性2型DN模型OLETF大鼠和正常对照LETO大鼠作体内实验，每4周动态监测血糖、24h尿蛋白量，于36周龄处死大鼠，取肾组织，观察病理形态学并进行半定量评分；利用Western印迹法分析肾皮质中PSMAs和LC3蛋白的表达。结果与NC组相比，高糖环境下8h蛋白酶体α各亚基、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白表达均降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。其他各时间点两组间差异无统计学意义。与正常对照LETO太鼠相比，OLETF大鼠血糖水平和24h尿蛋白量逐渐升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。OLETF大鼠肾小球硬化指数和肾小管间质纤维化指数均显著高于LETO大鼠，差异有统计学意义（P〈0．01）；OLETF大鼠36周龄肾皮质中PSMAs蛋白表达明显减少，与正常对照LETO大鼠差异有统计学意义（P〈0．05），LC3Ⅱ蛋白表达也有降低趋势，但差异无统计学意义。结论蛋白降解途径失调可能在DN的发生、发展中起了一定的作用。
- 李治国张浩军董晞王红盼杨方沈宏李平
- 关键词：糖尿病肾病自噬氧化应激蛋白酶体
- 柴黄益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠保护作用的脂质组学研究被引量：10
- 2012年
- 目的:研究柴黄益肾颗粒干预对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏脂质代谢异常的调节作用。方法:采用单侧肾切除加i.p.链脲佐菌素诱导的方法复制DN大鼠模型,将38只Wistar大鼠分成4组,包括空白组、模型组、模型+柴黄益肾颗粒组、空白+柴黄益肾颗粒组。模型+柴黄益肾颗粒组ig给予0.56 g·kg-1柴黄益肾颗粒,于造模成功后第20周,采集肾皮质样品进行基于超高压液相-四级杆飞行时间质谱联用仪(UPLC-QTOF MS)的脂质组学研究,考察干预前后脂质代谢物组的变化。结果:造模成功第20周时,大鼠肾皮质中多种甘油磷脂酰胆碱、甘油磷脂酰乙醇胺、甘油磷脂酰甘油醇、甘油磷脂酰肌醇、鞘磷脂酰胆碱等都显著下调,而胆固醇酯和甘油三酯则显著上升。柴黄益肾颗粒干预对部分异常脂质代谢表现出明显的改善作用,包括4种鞘磷脂酰胆碱和2种甘油磷脂酰胆碱,即SM(d18∶1/16∶1),SM(C33∶1),SM(C42∶2),SM(C42∶3),PC(36∶4)和PC(42∶10),其相对变化倍数分别为1.38,1.50,1.29,1.23,1.15和1.30。结论:柴黄益肾颗粒干预可以延缓大鼠DN的进展,该机制可能与其对脂质尤其是鞘脂代谢异常的调节有关。
- 赵铁张浩军殷婷婷路晓光赵婷婷李平
- 关键词：糖尿病肾病柴黄益肾颗粒
- 昆仙胶囊对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的治疗作用被引量：6
- 2011年
- 目的:观察昆仙胶囊对阿霉素诱导大鼠肾病综合征的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠尾静脉一次性注射阿霉素6mg/kg建立大鼠肾病综合征模型,分为模型组、激素组(7.5 mg/kg)、昆仙胶囊大(30 g/kg)、中(15 g/kg)及小剂量组(7.5 g/kg),正常对照组大鼠注射等体积生理盐水。连续灌胃52天,每周检测各组大鼠大鼠24 h尿蛋白水平,实验结束时取血测定血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐;取肾组织观察病理学改变并对其损害程度进行半定量评分。结果:与模型组比较,昆仙胶囊各剂量组24 h尿蛋白水平显著降低,血清总胆固醇水平显著升高,昆仙胶囊15g/kg、7.5g/kg组能显著降低模型大鼠血清甘油三酯水平,减轻肾小球病理损伤(P<0.01);昆仙胶囊30g/kg和15g/kg也能显著改善模型大鼠肾小管间质损害(P<0.01)。结论:昆仙胶囊对阿霉素诱导的大鼠肾病综合征有良好的治疗作用,其作用机制与改善脂代谢紊乱和减少尿蛋白有关。
- 严美花张浩军王康杨丽平郑柳涛罗月会路晓光郭景珍沙洪付桂香李克明李平
- 关键词：昆仙胶囊阿霉素肾病综合征蛋白尿
- 糖肾方对自发性2型糖尿病模型大鼠脂代谢及肝脏脂变的影响被引量：10
- 2010年
- 目的:观察糖肾方对自发性2型糖尿病模型(OLETF)大鼠脂代谢及肝脏脂变的作用,探讨相关的作用机制。方法:45只雄性OLETF大鼠随机分成OLETF组、糖肾方组(1.60g/kg)和蒙诺组(0.833mg/kg)。18只LETO大鼠作为正常组。各实验组从动物12周龄起开始给药。分别在36周龄和56周龄取材,检测血脂水平,观察肝组织病理组织学变化并进行半定量分析,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析SREBP-1及G6PDmRNA在肝组织中的表达。结果:糖肾方能显著降低OLETF组大鼠总胆固醇(TC)水平(P<0.01),减轻肝脂病变,显著改善肝脏组织大、小空泡的发生面积(P<0.05);抑制SREBP-1mRNA在肝脏中的表达(P<0.05);上调G6PDmRNA在肝脏中的表达(P<0.001)。结论:糖肾方可以改善OLETF大鼠的血脂水平异常及肝脂变,其可能的机制是通过降低SREBP-1和增加G6PDmRNA在肝脏的表达,减少脂肪在肝脏中的淤积及降低TG的合成。
- 董晞张浩军赵世萍李治国路晓光郭景珍赵婷婷王泰龄李平
- 关键词：糖肾方2型糖尿病
- 风湿性疾病湿热证实质的脂质组学研究被引量：14
- 2013年
- 目的:以强直性脊柱炎(AS)和痛风性关节炎(GA)为切入点,对风湿性疾病湿热证实质的脂质组学特征进行研究。方法:采用超高效液相色谱/飞行时间质谱联用技术,对61例AS患者、29例GA患者及44名健康志愿者的血清样本进行脂质组学研究,比较AS湿热证患者、AS非湿热证患者、GA湿热证患者以及健康志愿者血清中与湿热证相关的特异性及共性差异脂质代谢物。结果:AS湿热证组与AS非湿热证组血清脂质指纹图谱存在明显差异,其中差异较明显的脂类代谢物主要是甘油磷脂酰胆碱类(GPC)和甘油三酯类(TG);与健康对照组相比,GA湿热证组和AS湿热证组共同表现的溶血甘油磷脂酰胆碱类(Lyso-GPC)明显下降。结论:部分GPC和TG类代谢物可能为AS湿热证脂质代谢的特异性本质,而Lyso-GPC(18:2)、Lyso-GPC(16:0)和Lyso-GPC(18:1)可能为风湿性疾病湿热证脂质代谢的共性实质,为风湿性疾病湿热证实质的探讨提供了新的依据。
- 殷婷婷赵春杰张英泽李平陆进张相林阎小萍王国春祖宁赵铁
- 关键词：痛风性关节炎湿热证
- 二氢生物喋呤还原酶参与调控HEK293T细胞自噬作用的初步研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨二氢生物喋呤还原酶(dihydropteridine reductase,QDPR)对HEK293T细胞自噬作用的影响。方法构建野生型QDPR和突变型QDPR重组质粒分别转染HEK293T细胞,并设空载体对照组。采用RT-PCR及Western blot方法检测空载体组,野生型QDPR组和突变型QDPR组自噬相关蛋白LC3和Beclin 1的表达量变化。结果 1)测序结果证实PCR扩增得到编码正常QDPR的cDNA序列正确以及突变的cDNA也在正确的位置突变;2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,野生型QDPR和突变型QDPR融合蛋白成功表达;3)RT-PCR结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3基因水平明显上调(P<0.05),突变型QDPR组LC3基因水平与对照组相比无统计学差异;与对照组相比,野生型和突变型组Beclin1基因水平无统计学差异;4)Western blot结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3-II和Beclin1的蛋白表达量明显上调(P<0.05),但LC3-I的蛋白表达量无统计学差异,突变型QDPR组与对照组相比LC3-I,II和Beclin1的蛋白表达量均没有统计学差异(P>0.05)。结论二氢生物喋呤还原酶能增强HEK293T细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1的表达,提示其可能具有激活自噬作用的功能;二氢生物喋呤还原酶93位氨基酸的突变影响了其对细胞自噬作用的调控,降低了自噬标志分子LC3-I和Beclin1的基因表达。
- 古艳婷赵婷婷李平张浩军朱斌韩文兵董晞费敏孙斯凡
- 关键词：自噬LC3BECLIN1
- L-FABP在肾脏疾病中的研究进展被引量：6
- 2012年
- 肝型脂肪酸结合蛋白（liver-type fatty acid binding protein,L-FABP,FABP1）属于脂肪酸结合蛋白（fatty acid binding protein,FABP）家族的成员之一,是一组低分子量（14～15kD左右）的可以结合长链脂肪酸的高保守性胞质蛋白。
- 王红盼路晓光李平
- 关键词：L-FABP肾脏疾病肝型脂肪酸结合蛋白PROTEIN低分子量保守性
