江苏省卫生厅重大科研项目(H200209)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：汤成春黄峻马根山张建桥杨国平更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院东南大学南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅重大科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠心脏成纤维细胞向心肌细胞分化的可行性研究被引量：6
- 2005年
- 目的:通过观察5-氮胞苷诱导的体外培养大鼠心脏成纤维细胞(cardiacfibroblasts,CFs)中心肌特异性β肌球蛋白重链(β-myosinheavychain,β-MHC)的表达,研究CFs向心肌细胞分化的可行性。方法:实验选用SD大鼠的乳鼠10只。胰酶消化、差速贴壁法体外分离培养大鼠CFs,分治疗组和对照组,前者用不同浓度5-氮胞苷(2.50,5,7.5,10.0,15.0,20.0μmol/L)诱导,24h后正常培养,以免疫组化、反转录多聚链合酶反应(RT-PCR)方法测定两组CFsβ-MHC、连接蛋白43的表达。结果:正常培养大鼠CFs呈梭形均匀生长,不表达βMHC和连接蛋白43。经5-氮胞苷诱导后,CFs体积缩小呈克隆样生长,表达β-MHC、连接蛋白43,以10μmol/L浓度时最明显。结论:5-氮胞苷诱导体外培养大鼠CFs表达心肌特异性β-MHC,与诱导浓度相关,提示可诱导大鼠CFs向心肌样细胞分化。
- 汤成春黄峻
- 关键词：细胞分化
- 提高开胸结扎法建立猪心肌梗死模型成功率探讨被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨提高开胸结扎法建立猪急性心肌梗死模型成功率的方法。方法:幼猪16只,结扎组(10只)复合麻醉,机械通气,正中切口开胸结扎前降支中下1/3,术前、术中、术后静滴、术中浸润利多卡因;假结扎组(6只)穿线不结扎;心电图、饲养3周后冠状动脉造影、心肌核素显像检查、心脏标本HE及切片2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色。结果:结扎组手术成功率90%。心电图ST段明显抬高;3周后冠状动脉造影提示前降支中远端完全闭塞;核素心肌显像提示前壁、心尖部放射性稀疏或缺如;HE染色见均匀一致的纤维结缔组织增生;切片TTC染色不着色。结论:手术前后静滴及表面浸润利多卡因,正中切口开胸结扎冠状动脉前降支是建立猪心肌梗死模型有效的方法,可明显提高成功率。
- 汤成春马根山黄峻杨国平张建桥
- 关键词：结扎利多卡因
- 5-氮胞苷诱导的心脏成纤维细胞移植修复心肌损伤被引量：2
- 2009年
- 目的探讨5-氮胞苷诱导的大鼠心室成纤维细胞(CFs)植入急性心肌梗死(AMI)区的心肌损伤修复作用。方法取SD大鼠乳鼠心室CFs体外培养、扩增,取第三代细胞加5-氮胞苷10μmol/L诱导,并行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,收集(0.8～1.2)×106个细胞用于移植。SD大鼠20只,结扎冠状动脉前降支建立大鼠AMI模型,2周后,治疗组(10只)将诱导后的CFs注入梗死区及周边,对照组(10只)予等量不含CFs的培养液接种。6周后处死所有动物,获取心肌标本,HE及免疫组化染色观察CFs分化和转归。结果治疗组HE染色梗死区可见散在带横纹的肌肉组织,电镜下移植细胞及移植细胞与宿主细胞之间均未见闰盘连接;免疫组化染色这些细胞BrdU、β肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白I(cTnI)及连接蛋白43(Cx43)呈阳性;对照组梗死区为均匀一致的纤维瘢痕组织。结论5-氮胞苷诱导的CFs植入AMI区可分化、转归为带横纹肌细胞,修复心肌损伤。
- 汤成春马根山黄峻杨国平张建桥
- 关键词：5-氮胞苷细胞移植心肌梗死
- 局部注射5-氮胞苷改善猪心肌梗死后心功能研究
- 2009年
- 目的探讨5-氮胞苷局部注入猪急性心肌梗死(AMI)梗死区后对心功能的修复作用。方法幼猪20只,开胸结扎冠状动脉前降支建立猪AMI模型;3周后治疗组(10只)通过局部注射将1mg/ml的5-氮胞苷溶液1ml注入梗死区及其周边;对照组(10只)予以等量的培养液接种。术前、术后3周及7周分别行MPA心功能测定;7周后处死所有动物,获取心脏标本,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死的面积。结果TTC染色治疗组梗死区面积及所占百分比明显小于对照组(P<0.01)。与治疗组3周及对照组7周比较,治疗组7周的左室最高压、dP/dtmax对应的左室压和左室压上升最大变化速率(dP/dtmax)明显增高(P<0.01);左室压最低值、左室舒张末压明显降低(P<0.01);-dP/dtmax对应的左室压和左室压下降最大变化速率(-dP/dtmax)绝对值明显增高(P<0.01)。结论5-氮胞苷局部注入猪AMI梗死区后可以缩小心肌梗死面积,改善心脏的收缩和舒张功能。
- 汤成春马根山黄峻杨国平张建桥
- 关键词：5-氮胞苷心肌梗死心功能
- 局部注射5-氮胞苷修复猪心肌梗死后的心肌损伤
- 2010年
- 目的探讨5-氮胞苷局部注入猪急性心肌梗死(AMI)区后对心肌损伤的修复作用。方法幼猪20只,开胸结扎冠状动脉前降支建立猪AMI模型;3周后治疗组(10只)通过局部注射将1mg/ml的5-氮胞苷溶液1ml注入梗死区及其周边;对照组(10只)予以等量的培养液接种;术后3周及7周分别行单光子发射计算机断层扫描(PET)检查;7周后处死所有动物,获取心肌标本,HE、免疫组化及2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察损伤心肌的转归。结果PET示治疗组7周时可见前壁、心尖部放射性分布较3周时密集;对照组7周与3周比较无明显差异。TTC染色治疗组梗死区面积及所占百分比显著小于对照组,[(4.06±0.29)cm2vs(5.41±0.28)cm2;(16.34±0.89)vs(21.23±1.02)%,P<0.001]。HE染色治疗组梗死区可见散在带横纹的肌肉组织,电镜下新生细胞之间未见闰盘连接;免疫组化染色这些细胞肌球蛋白重链β(β-MHC)、心脏肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)及连接蛋白43(Cx43)呈阳性。对照组梗死区为均匀一致的纤维疤痕组织。结论5-氮胞苷局部注入猪AMI区后可以诱导产生新的带横纹的肌细胞,修复心肌损伤。
- 汤成春马根山黄峻杨国平张建桥
- 关键词：5-氮胞苷心肌梗死
