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重组蔗糖异构酶的制备及应用条件优化被引量：3: 2015年; 对重组菌株E.coli BL21(DE3)/p ET-24a-pal I摇瓶发酵产酶进行研究,探讨了3 L发酵罐中不同乳糖诱导浓度对菌体高密度发酵产酶的影响。结果表明,摇瓶发酵得到胞外上清酶活253.1 U/m L,3 L发酵罐高密度发酵时,在0.4 g/(L·h)乳糖诱导浓度下,发酵上清酶活可达到最大值654 U/m L。对重组蔗糖异构酶转化蔗糖生成异麦芽酮糖的酶转化条件进行了优化,结果表明,当底物浓度为400 g/L,反应初始p H 6.5,温度30℃,加酶量20 U/g蔗糖,转化时间8 h,异麦芽酮糖可以达到最大转化率87.9%。; 程胜段绪果吴敬; 关键词：异麦芽酮糖酶转化摇瓶发酵高密度发酵

壳寡糖提高小麦低温抗性的作用效果初探: 分别以1mg/L,10mg/L,25mg/L,50mg/L,75mg/L,100mg/L六个浓度的壳寡糖浸泡处理小麦种子,浸种时间为10h,将生长出的小麦苗进行0℃低温胁迫,间隔2h取样,检测叶片相对电导率,丙二醛、脯氨...; 王梦雨王文霞赵小明杜昱光尹恒; 关键词：壳寡糖小麦低温胁迫次生代谢物; 文献传递

新型α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶RuAra1的表达与鉴定: 2014年; 随着能源问题的日益突出,半纤维素资源的利用逐渐受到人们的重视.α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-Larabinofuranosidase,EC 3.2.1.55)属于半纤维素酶系,能水解以α-1,3、α-1,2或α-1,5键连在木聚糖主链上的阿拉伯糖单体或低聚阿拉伯糖侧支.本实验室将克隆得到的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因RuAral在大肠杆菌中重组表达,得到的重组阿拉伯呋喃糖苷酶RuAral能够水解4-硝基酚-α-L-阿拉伯糖苷(4-Nitrophenyl-α-Larabinofuranoside,pNPA)、4-硝基酚-β-D-吡喃木糖苷(4-Nitrophenyl-β-D-xylopyranoside,pNPX)以及从小麦阿拉伯木聚糖中水解释放阿拉伯单糖.以pNPX为底物时,该酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为50℃.RuAral与瘤胃真菌(Neocallimastix patriciarum)内切木聚糖酶XynCIDBFV、瘤胃细菌木糖苷酶RuXynl的组合使用可以实现对小麦阿拉伯木聚糖的协同降解,且降解效率优于德国AB酶制剂公司的商品酶ROHALASE WP.; 夏婷颖周峻岗吕红; 关键词：宏基因组

产褐藻胶裂解酶菌株的分离与鉴定被引量：6: 2013年; 以褐藻酸钠为唯一碳源，从海南省红树林、天涯海角、黎安镇及海口等地采集的样品中分离获得4株高产褐藻胶裂解酶的菌株。通过3，5-二硝基水杨酸法监测该4株菌的发酵液酶活随培养时间的变化，结果表明当达到产酶高峰时，菌株E03的发酵液酶活最高（0．58U／mL），菌株$20和W14的发酵液酶活相当（0．23～0．27U／mL），W13的发酵液酶活稍低（0．13U／mL），但产酶规律呈现明显差异。由菌落形态特征结合16SrDNA系统发育分析，初步确定菌株E03属于假单孢菌属，菌株W14和W13属于弧菌属，而菌株$20属于黄杆菌属。; 黄李淑馨刘钢刘钢岳敏曹海龙谭海东赵小明尹恒; 关键词：褐藻胶裂解酶黄杆菌弧菌假单胞菌

人工胃液作用牛蒡低聚果糖分子质量的变化体外研究初探被引量：1: 2019年; 探究牛蒡低聚果糖在体外模拟人工胃液中动态变化过程。以牛蒡根为原料,热水浸提、Sevage法脱蛋白、过Sephadex G-50凝胶层析柱最终得到水溶性多糖BFO-2。在体外模拟人工胃液的环境中,经0.5、1、1.5、2、4、6 h胃液作用后,检测牛蒡低聚果糖分子质量的变化。实验结果表明,牛蒡低聚果糖在模拟人工胃液环境中,随胃酸与胃酶作用时间的延长,其分子质量并没有发生显著地改变。从研究中可以看出牛蒡低聚果糖在消化过程中具有较好的稳定性,研究结果为进一步研究牛蒡低聚果糖在生物体内的代谢规律提供参考。; 徐磊张秀娟鹿艳杜佳雪陈靠山; 关键词：人工胃液

壳寡糖抑制脂多糖诱导的PIECs表达IL-8和VCAM-1作用的初步研究被引量：2: 2013年; 目的:观察壳寡糖对脂多糖(LPS)诱导的猪髋动脉内皮细胞(PIECs)炎症损伤的影响以及潜在的分子机制。方法:以脂多糖(1 g/mL)刺激PIECs细胞,建立炎症损伤模型,以RT-PCR和Western blot的方法观察壳寡糖(COS)预保护PIECs细胞24 h,对白介素-8(IL-8)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达水平的影响,以及对JNK信号蛋白磷酸化和c-Fos转录因子表达的影响。结果:壳寡糖可抑制脂多糖刺激的PIECs表达IL-8和VCAM-1,并抑制JNK信号通路的磷酸化和转录因子c-Fos的表达。结论:壳寡糖对脂多糖刺激的PIECs细胞中IL-8和VCAM-1表达的抑制作用是通过抑制上游的JNK信号通路磷酸化和转录因子c-Fos的表达实现的,从而缓解脂多糖对细胞造成的炎症损伤。; 李昱许青松魏鹏彭强李曙光杜昱光; 关键词：壳寡糖脂多糖炎症

聚合度7-15的壳寡糖抑制脂多糖刺激的单核细胞产生TNF-α和IL-8的作用研究被引量：1: 2014年; 本文通过建立脂多糖刺激的单核细胞炎症损伤模型,观察聚合度7-15的壳寡糖对炎性单核细胞白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,及对p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38MAPK)信号通路磷酸化的影响。采用p38信号通路抑制剂(SB203580)验证抑制p38信号通路对脂多糖诱导的单核细胞表达IL-8和TNF-α的作用,从而探索壳寡糖抑制单核细胞炎性损伤的分子机制。结果表明壳寡糖可抑制脂多糖诱导的单核细胞表达IL-8和TNF-α,并且抑制p38信号蛋白的磷酸化水平。因此,初步认为壳寡糖可能通过抑制炎性U937细胞中p38MAPK信号通路抑制IL-8和TNF-α的表达。; 李昱王文霞许青松李曙光杜昱光; 关键词：壳寡糖脂多糖 P38MAPK信号通路白细胞介素-8

猕猴桃溃疡病防治技术初步研究: 猕猴桃溃疡病是猕猴桃的癌症,严重时可造成毁园,造成很大的损失,目前生产上尚无有效的方法防治。本试验在生长期喷施壳寡糖免疫诱导剂与噻霉酮,在冬季来临前喷施壳寡糖,对猕猴桃溃疡病有明显的防治效果。壳寡糖免疫诱导剂与噻霉酮处理...; 赵小明周天仓陈银潮王文霞尹恒; 关键词：猕猴桃溃疡病壳寡糖; 文献传递

重组β-半乳糖苷酶的制备及转化条件优化被引量：3: 2017年; 以前期构建的产Bacilluscirculansβ-半乳糖苷酶重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET-20b-lac为菌种,进行摇瓶发酵诱导培养,培养24 h胞外上清酶活达15 U/mL。利用制备的β-半乳糖苷酶粗酶液进行酶转化实验。优化了酶转化条件,考查了初始pH、反应温度、乳糖质量浓度、加酶量和反应时间等因素对低聚半乳糖产率的影响。确定最优转化条件为:初始pH 6.5、反应温度55℃,起始乳糖质量浓度为700 g/L,加酶量为8 U/mL。在此条件下反应16 h,低聚半乳糖转化率可达57%。; 胡树兵段绪果吴敬; 关键词：低聚半乳糖 Β-半乳糖苷酶摇瓶发酵酶转化

海南土地杆菌Pedobacter hainanensis 13-Q^T发酵生产κ-卡拉胶酶的条件优化被引量：3: 2013年; 采用响应面法对海南土地杆菌Pedobacter hainanensis 13-QT生产κ-卡拉胶酶的发酵条件进行了优化,通过Plackett-Burman实验方法研究碳源含量、氮源含量、无机盐、初始pH值、温度等9个发酵因子对菌株发酵产κ-卡拉胶酶活力的影响。结果表明,影响产酶的显著因子是温度、蛋白胨浓度和初始pH值。根据最陡爬坡实验结果确定显著影响因子的取值范围,并采用Box-Behnken设计实验进行优化,然后应用响应面模拟预测和摇瓶发酵实验验证。结果表明,产κ-卡拉胶酶的最佳条件为κ-卡拉胶1.5g/L,蛋白胨3.9g/L,NaCl 20g/L,K2HPO41g/L,MgSO40.40g/L,CaCl20.12g/L,FeSO40.008g/L,发酵培养基初始pH值为6.9,温度30.3℃。经过优化后,发酵液中κ-卡拉胶酶酶活力达到3.387IU/mL,与优化前相比提高了5.04倍。; 孟彦羽岳敏张建平王梦雨赵勇尹恒杜昱光; 关键词：发酵条件响应面法

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国家高技术研究发展计划(2012AA021501)

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