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三条新颖短肽筛选及抑菌作用的初报: 2011年; 【目的】为了发现新的农作物病原菌抗菌肽,人工设计并构建了大容量短肽文库,从中筛选并合成96条短肽用于鉴定其对农作物病原菌的抑菌活性。【方法】采用琼脂扩散法,对靶标菌—棉花枯萎病菌(Fusarium f.sp.vasinfecum)、棉花红腐病菌(Fusarium moniliforme)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)和马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)进行抑菌初筛,并测定了有抗菌作用短肽的最小抑菌浓度和抑菌持久性。【结果】得到了A6、D4和F10对上述四种病原真菌抑菌效果较强,抑菌时间较长的抗菌肽,通过与抗菌肽数据库氨基酸序列对比,未见这3条抗菌肽的同源序列。【结论】研制的3条短肽属于新颖抗菌肽,为防治农作物真菌病害提供了新的基因资源。; 兰金苹李莉云汪洋王宪云刘丽娟刘国振成雄鹰; 关键词：病原真菌抑菌作用

商品化转基因植物的外源基因及其检测技术被引量：4: 2008年; 随着多种生物基因组的测序、分子生物学及转基因技术的发展,被批准大田释放的转基因植物越来越多。本文总结了转基因植物涉及的外源基因,包括辅助转化的基因、改良植物性状的目的基因及调控目的基因表达的序列等3大类44个基因;列举了美国和欧盟批准大田释放的转基因植物及品系;我国农业部批准的可进口用作加工原料的转基因植物。对转基因植物及加工产品的定性、定量检测技术进行了介绍,包括普通、定量及多重PCR技术、多重PCR结合芯片或肽核酸检测技术,以及基于表达蛋白质的检测技术等,最后对转基因植物及检测技术的发展进行了总结和展望。; 李俊郑秀丽邓平建刘国振; 关键词：转基因植物外源基因 PCR

基于抗体的水稻蛋白质组学——开端与展望被引量：14: 2011年; 为了深入开展水稻基因功能研究,借鉴人类蛋白质研究中的相关理念,提出了基于抗体的水稻蛋白质组学的策略.AbRP的要点在于,建立针对水稻蛋白质的抗体资源库,利用大规模免疫分析技术,揭示水稻蛋白质在不同时空条件下的表达状态并了解其相关功能.用AbRP策略可以对特定的基因家族或途径相关蛋白质进行研究,可以检测蛋白质的表达量及修饰的变化等.AbRP的实施将为水稻基础和应用研究创建一个重要的支撑平台,基于抗体的蛋白质表达数据与基因组、转录组数据相整合,可望进一步丰富水稻乃至其他植物研究的公共数据资源.; 刘国振刘斯奇吴琳徐宁志; 关键词：水稻抗体免疫印迹

转基因抗虫棉中cry1Aa基因表达盒的序列测定和检测被引量：4: 2011年; 从转基因抗虫棉南农6号F1中克隆了一种新的Bt基因表达盒—cry1Aa基因表达盒,与已经测定的我国转基因棉花中的cry1Ac基因和cry1Ab/Ac基因的表达盒序列比较发现,它们在Bt基因与7S UTR的连接区域存在较大差异。根据这个差异区域的序列,设计特异性引物对cry1Aa-F/cry1Aa-R,建立了cry1Aa基因表达盒特异性检测方法。在18份来自江苏省的棉花材料中,有8份材料检测出含有cry1Aa基因表达框。建立的构建特异性检测方法为转基因棉花的Bt基因表达盒的鉴别和转基因谱系分析等提供了有效的技术手段。; 孙爻谢家建范荫荫李蕊彭于发; 关键词：转基因棉花 PCR检测

豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)及其在抗虫转基因作物中的应用被引量：27: 2008年; 豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsin inhibitor,CpTI)来自豇豆的可食用部分,由于其具有抗虫谱广且昆虫不易对其产生耐受性的特点,cpti基因被作为抗虫植物基因工程一个重要的候选基因。目前,cpti基因已经被转到烟草、水稻、棉花和番茄等多种作物中。本文介绍了CpTI的特性、抗虫机理、基因工程研究进展,以及转cpti基因水稻的安全性研究,并对蛋白酶抑制剂的分类和安全性问题做了相关介绍。CpTI在分类上属于Bowmun-Birk家族,大量医学研究表明,该家族蛋白质对于癌症的预防和辅助治疗都有积极作用,对人体不存在任何危害。; 徐鸿林翟红利王锋朴建华杨晓光朱祯; 关键词：转基因作物水稻生物安全性

一种适合转基因棉CpTI和cry1A基因剂量测定的标准质粒的构建和应用被引量：1: 2011年; 在转基因检测领域,标准质粒以容易获得、纯度高、成本低和稳定性好的优点逐渐被广泛应用,适合同时检测多个靶标基因的需求。本研究针对我国抗虫棉(Gossypium hirsutum L.)的主要外源基因类型,构建含有豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)、苏云金杆菌晶体杀虫蛋白基因(cry1A)和棉花内标准基因硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶基因(Sad1)的多靶标质粒pMD-CCS作为标准物质,建立了CpTI和cry1A基因的实时荧光定量PCR方法。测定了我国9个抗虫棉品种中的CpTI和cry1A基因剂量,显示科棉3号等3个抗虫棉品种中CpTI基因的平均剂量为0.020～0.018拷贝/基因组,cry1A基因的平均剂量为1.377～2.136拷贝/基因组;鄂杂棉1号F1等6个抗虫棉品种中cry1A基因的平均剂量为0.887～2.564拷贝/基因组,定量结果的标准差(SD)范围在0.001～0.149之间。结果说明,pMD-CCS适合作为标准物质用于抗虫棉中CpTI和cry1A基因的定量测定。; 苏长青谢家建孙爻彭于发; 关键词：抗虫棉 CPTI基因

水稻RNA纯化方法的比较和改进被引量：4: 2008年; 本实验利用TRIZOL试剂提取水稻苗期叶片总RNA,对三种常用的RNA纯化方法和改进的纯化方法进行了比较。通过凝胶电泳、紫外分光光度法和RT-PCR法检测提取的RNA样品的品质,结果表明,应用改进的RNA纯化方法可有效去除水稻RNA中的DNA污染,电泳条带清晰无降解;OD260/OD280为1.91~1.98,具有较高的纯度;改良方法纯化的RNA逆转录为cDNA,作为PCR扩增的模板,以不同的循环数进行扩增,在反应适宜循环数内检测不到DNA片段污染,说明用改进方法提取的RNA,其质量和纯度可以满足下一步分子生物学研究的需要。; 刘凌谢家建王锡锋彭于发; 关键词：RNA

转基因抗虫水稻对生物多样性的影响被引量：12: 2011年; 水稻是我国最重要的粮食作物,然而虫害造成的产量损失每年高达一千万吨以上。研究表明,转基因抗虫水稻对二化螟、三化螟和稻纵卷叶螟等水稻主要鳞翅目害虫具有高抗性,可以大幅度减少化学杀虫剂的使用。在不使用农药的情况下,在抗虫转基因水稻田中的害虫密度大幅度减少的同时,可以显著地增加中性昆虫及捕食性天敌数量和种类,显示出稻田生态系统和生物多样性的向良性发展的趋势。转基因水稻花粉向非转基因水稻品种的基因飘流实验表明,随着栽种距离的增大而显著减小,到间隔6.2 m时基因飘流频率已低于0.01%。转基因抗虫水稻的应用,对于保障我国粮食安全,保持农业可持续发展,保护生物多样性和生态环境尤其是在大幅度减少农药使用量方面具有重要意义。文章综述了转基因抗虫水稻研制进展及其对生物多样性的影响,并对农作物害虫防治的未来研究方向和发展趋势进行展望,以期为转基因抗虫水稻更好的应用提供借鉴。; 张磊朱祯; 关键词：转基因作物抗虫水稻生物多样性生态环境

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国家重点基础研究发展计划(2007CB109201)