国家林业局重点科研项目([2007]-74)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 锥栗叶样保存时间对DNA提取质量的影响被引量：4
- 2009年
- 以野生锥栗幼叶为对照,采用硅胶干燥法,设置不同保存时间(10 d,2、4、6、8、10、11、12、13、14、15、16、17、18个月),对保存不同时间的锥栗叶样抽提基因组总DNA,利用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检测提取DNA的浓度、纯度、得率及质量等指标,评价不同保存时间对基因组DNA的影响。结果表明:随着保存时间的延长,基因组DNA的浓度呈逐渐降低趋势,12个月后,降解加剧,纯度很低。叶样硅胶保存时间在10 d至10个月之间为最佳DNA抽提时间,所得DNA浓度、得率高,纯度较好,电泳谱带清晰。
- 刘国彬龚榜初罗正荣
- 关键词：锥栗DNA提取
- 锥栗自然居群ISSR-PCR分析技术的建立被引量：6
- 2009年
- 提取野生锥栗的基因组DNA作为ISSR-PCR模板,对反应体系中的模板用量、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和TaqDNA聚合酶用量5个主要影响因素进行梯度试验,并对扩增程序中的退火温度与循环次数进行了探讨,初步确立了适合野生锥栗的ISSR-PCR分析技术体系,即25μL反应体系中,模板DNA40或50ng、Mg2+2.25mmol.L-1、dNTPs0.2mmol.L-1、引物0.2μmol.L-1、TaqDNA聚合酶1.0U;PCR扩增程序为:94℃预变性3min;然后94℃变性45s,(Tm+2～4℃)退火45s,72℃延伸2min,共32个循环;最后72℃充分延伸5min;1.5%琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物。
- 刘国彬龚榜初罗正荣
- 关键词：锥栗自然居群ISSR
