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国家自然科学基金(30860019)

作品数：9 被引量：13H指数：3
相关作者：韩润林许丽萍白文成代霄燕纪智星更多>>
相关机构：内蒙古农业大学内蒙古医学院更多>>
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文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 9篇球菌
  • 6篇A群
  • 6篇A群链球菌
  • 5篇溶酶
  • 5篇纤溶
  • 5篇纤溶酶
  • 5篇纤溶酶原
  • 4篇烯醇化酶
  • 3篇葡萄球菌
  • 3篇相互作用
  • 3篇链球菌
  • 3篇金黄色葡萄球...
  • 3篇黄色葡萄球菌
  • 2篇受体
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇人纤溶酶原
  • 1篇突变体
  • 1篇葡萄球菌感染
  • 1篇球菌感染

机构

  • 9篇内蒙古农业大...
  • 1篇内蒙古医学院

作者

  • 6篇韩润林
  • 5篇白文成
  • 5篇许丽萍
  • 3篇代霄燕
  • 2篇纪智星
  • 2篇刘杨
  • 2篇李培峰
  • 1篇许颖
  • 1篇李培锋

传媒

  • 6篇内蒙古农业大...
  • 1篇生命科学
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇生命的化学

年份

  • 1篇2017
  • 2篇2012
  • 4篇2011
  • 2篇2010
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
重组金黄色葡萄球菌次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用被引量：3
2011年
次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶(IMPDH)是金黄色葡萄球菌(S.aureus)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,它可以通过赖氨酸结合位点(LBS)与Plg相结合。脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg有很高的同源性,即两者的Kringle结构域都含有LBS,其中Apo(a)的KIV10含有强的LBS。因此本实验提出了Lp(a)应该能够与S.aureus表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制S.aureus与Plg结合的假说。本研究克隆了S.aureus的IMPDH基因,酶切后将其连接到表达载体pASK-IBA37中,并在大肠杆菌BL21中表达了该重组蛋白(rIMPDH)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、亲和色谱层析及Western blot对rIMPDH与Lp(a)的相互作用机制进行了研究。结果表明rIMPDH可以通过LBS与Lp(a)和rKIV10发生特异性结合,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合,然而本研究并未发现Lp(a)和rKIV10对rIMPDH与Plg的相互作用有明显的抑制。
许颖纪智星韩润林
关键词：金黄色葡萄球菌纤溶酶原
A群链球菌利用人纤溶酶原的机制被引量：4
2010年
A群链球菌是一种常见的人类致病菌,可以引起人类的化脓性感染和非化脓性后遗症。A群链球菌能表达或分泌多种毒力因子参与其致病性。大量文献报道,纤溶酶原也是A群链球菌侵入机体的重要因子,A群链球菌通过其纤溶酶原受体能与纤溶酶原特异性结合,从而使与A群链球菌结合的纤溶酶原更易被激活为纤溶酶。纤溶酶能降解宿主的细胞外基质和基底膜,有利于A群链球菌在人体内的扩散。本文就A群链球菌如何激活并利用人纤溶酶原的机制进行了综述。
许丽萍李培峰韩润林
关键词：A群链球菌纤溶酶原受体
纤溶酶原在金黄色葡萄球菌感染中的作用被引量：7
2010年
金黄色葡萄球菌菌体表面有多种纤溶酶原受体,包括次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶、核糖核苷酸还原酶、α-烯醇化酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶等,它们均可以与纤溶酶原结合。与细菌结合的纤溶酶原可被宿主的纤溶酶原激活剂(组织型纤溶酶原激活剂和尿激酶型纤溶酶原激活剂)或葡萄菌属的纤溶酶原激活剂(葡激酶)激活为纤溶酶。细菌表面的纤溶酶有利于其降解宿主胞外基质,穿越组织屏障,因此哺乳动物的纤溶酶原可能在金黄色葡萄球菌感染宿主过程中起重要作用。
纪智星韩润林
关键词：金黄色葡萄球菌纤溶酶原纤溶酶受体
链球菌表面烯醇化酶及其变异体重组蛋白的表达纯化被引量：1
2011年
目的:表达并纯化M6型GAS表面烯醇化酶以及其敲除C末端赖氨酸残基重组蛋白(rSEN和rSENΔ434-435)。方法:克隆了M6型GAS ATCC32175的SEN基因以及SENΔ434-435基因,与pASK-IBA37载体连接后,表达蛋白并用亲和层析色谱纯化重组蛋白;通过酶促反应实验测定了重组蛋白的生物活性。结果:2种基因克隆条件稳定,蛋白表达量大,且纯化方法可靠,纯化的重组蛋白具有较高的生物活性。结论:成功表达并纯化了rSEN和rSENΔ434-435蛋白。
许丽萍白文成刘杨代霄燕李培峰
关键词：A群链球菌烯醇化酶纯化
链球菌表面烯醇化酶重组蛋白多克隆抗体的制备
2012年
制备M6型GAS表面烯醇化酶抗体。皮下多点注射GAS表面烯醇化酶重组蛋白(rSEN)免疫家兔,采用亲和层析纯化免疫血清,通过SDS-PAGE、ELISA、Western-Blot等方法检测抗体的特异性,并初步用制备的抗体检测了M6血清型GAS表面烯醇化酶的表达。制备的抗体蛋白纯度较高,检测的特异性较强,用制备的抗体可以检测到活体菌表面的烯醇化酶。成功制备并纯化得到了GAS表面烯醇化酶多克隆抗体。
许丽萍白文成刘杨韩润林
关键词：A群链球菌多克隆抗体
人脂蛋白(a)与金黄色葡萄球菌重组α-烯醇化酶的相互作用被引量：1
2017年
表面α-烯醇化酶(Eno)是金黄色葡萄球菌(S.aureus)重要纤溶酶原受体(Plr),其C端Lys残基是与纤溶酶原(Plg)Kringle结构域(K或K结构域)结合位点之一。人脂蛋白(a)(Lp(a))是由一分子载脂蛋白(a)(apo(a))和一分子低密度脂蛋白(LDL)通过二硫键结合构成,apo(a)上的K结构域与Plg的K结构域具有高度同源性,都有赖氨酸结合位点(LBS)。Apo(a)的KIV_(10)是主要的LBS。因此假设,Lp(a)也可能与Eno结合,从而竞争性抑制Eno与Plg的结合。本文为研究Lp(a)与Eno的相互作用机制,在大肠杆菌中重组表达了Eno(rEno)及敲除C末端Lys残基(第434个氨基酸残基)的Eno(rEno△434)和apo(a)的KIV_(10)结构域(rKIV_(10));用酶联免疫吸附试验(ELISA)和亲和色谱层析(Pull down)对rEno、rEno△434与Plg、Lp(a)、LDL、rKIV_(10)的相互作用机制进行了研究。结果表明,rEno与Plg、Lp(a)、rKIV_(10)呈特异性结合,一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)能够抑制它们的结合,证明Lp(a)与rEno也是通过LBS结合;rEno不与LDL结合,证明Lp(a)是通过apo(a)与rEno结合;rEno△434与Plg和Lp(a)的结合有明显降低,证明rEno的C端Lys残基是与Lp(a)结合的位点之一。
纪智星白文成
关键词：金黄色葡萄球菌纤溶酶原相互作用
M6型A群链球菌表面烯醇化酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶特性的研究
2012年
表面烯醇化酶(surface enolase,SEN)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(surface glyceraldehydes-3-phosphate dehydro-genase,sGAPDH)都是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)没有跨膜结构的膜表面蛋白,它们可能在GAS感染中起到重要的作用。在本研究中,对SEN和sGAPDH在M6型GAS不同生长阶段(即在对数期和稳定期)的表达情况进行检测分析。取对数期(OD600=0.5-0.6)和稳定期(OD600=1.5-1.6)的GAS,分别测定SEN和sGAPDH活性。同时用变溶菌素(mutanolysin)提取这2个生长阶段细胞壁结合蛋白,用Western blot检测该提取物中的SEN和sGAPDH。结果表明在相同菌细胞浊度的条件下,SEN在M6型GAS对数期时的表达量及活性比其稳定期时的高45%左右。虽然sGAPDH的表达量较高但活性很低(<0.07mM NADH/min),并且在这2个生长阶段没有明显的差异。
白文成韩润林
关键词：A群链球菌
重组A群链球菌三磷酸甘油醛脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用被引量：3
2011年
三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,其C末端的赖氨酸残基可以与Plg的赖氨酸结合位点(LBS)相结合。脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg有很高的同源性。因此本实验室提出了Lp(a)可能与GAS表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制GAS与Plg结合的假说。本研究克隆了GAS的GAPDH及其C末端敲除赖氨酸残基的突变体基因,酶切后将其连接到表达载体pASK-IBA37中,并在大肠杆菌BL-21中表达了这两个重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对rGAPDH和rGAPDHΔ345与Lp(a)的相互作用机制进行了研究。结果表明rGAPDHΔ345与Lp(a)的结合值比rGAPDH显著降低,说明rGAPDH及rGAPDHΔ345与Lp(a)通过LBS发生特异性结合,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合,Lp(a)对rGAPDH与Plg的相互作用也有明显的抑制。
代霄燕许丽萍白文成韩润林
关键词：A群链球菌纤溶酶原
链球菌表面三磷酸甘油醛脱氢酶及其突变体重组蛋白的表达和纯化
2011年
表达并纯化M6型GAS表面三磷酸甘油醛脱氢酶以及其敲除C末端赖氨酸残基重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。克隆了M6型GAS ATCC32175的GAPDH基因以及GAPDHΔ345基因,与pASK-IBA37载体连接后,表达蛋白并用亲和层析色谱纯化重组蛋白;对重组蛋白进行质谱检测,并用酶切方法进一步纯化目的蛋白,通过酶促反应实验测定了重组蛋白的生物活性。2种基因克隆条件稳定,蛋白表达量大,酶切后纯度高,纯化的重组蛋白具有较高的生物活性。功表达并纯化了rGAPDH和rGAPDHΔ345蛋白。
许丽萍代霄燕李培锋
关键词：A群链球菌表达纯化酶切
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