南京军区科技创新基金(10MA040)
- 作品数:3 被引量:31H指数:3
- 相关作者:王莉王莉余肖范钦华郭斌更多>>
- 相关机构:第三军医大学大坪医院解放军第81医院解放军第401医院更多>>
- 发文基金:南京军区科技创新基金国家自然科学基金更多>>
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- 藏红花素对糖基化终产物诱导视网膜微血管内皮细胞凋亡的影响被引量:17
- 2012年
- 目的糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)中糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGE)可引起细胞内产生过氧化物和炎症因子,导致视网膜微血管内皮细胞(retinal microvascular endothelial cell,RMEC)凋亡,视功能破坏。文中观察藏红花素对在AGE作用下RMEC活性、凋亡比例、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产物、细胞内和上清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α含量的干预,探讨藏红花素对AGE引起RMEC凋亡的保护机制。方法采用免疫磁珠法分离培养RMEC,浓度为10、50和100μmol/L藏红花素培养液作用于RMEC,观察4d内细胞增生变化并记录生长曲线。不同浓度藏红花素溶液作用于AGE处理的RMEC 12 h,锥虫蓝染色计数活细胞率,流式细胞术检测凋亡细胞比例,荧光光度计测定细胞内ROS含量,采用蛋白电泳和ELISA测定RMEC内和上清中TNF-α含量。结果 RMEC在10、50μmol/L藏红花素的培养液中可以继续增生。培养至3 d和4 d时,100μmol/L藏红花素可使细胞增生受到抑制。与对照组相比,100 mg/L AGE处理12 h和24 h后RMEC活细胞比例明显下降。10、50和100μmol/L藏红花素可不同程度保护AGE处理后RMEC活细胞比例。与对照组相比,100 mg/L AGE处理12 h后凋亡细胞比例明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素处理12h后凋亡细胞比例均有下降。AGE处理12h后RMEC内ROS水平明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素可不同程度抑制AGE处理后RMEC内ROS水平。AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平明显升高。10、50和100μmol/L藏红花素可明显抑制AGE处理后RMEC内和上清液中TNF-α水平。结论藏红花素可能通过抑制AGE诱导RMEC中ROS产生并减少TNF-α合成途径,防止细胞凋亡。
- 郭斌范钦华王莉张志强刘晓娟
- 关键词:视网膜微血管内皮细胞糖基化终产物藏红花素凋亡活性氧簇
- 藏红花素对缺氧环境下Wistar大鼠视网膜Müller细胞活性和胶质纤维酸性蛋白表达的影响被引量:3
- 2012年
- 目的观察不同浓度藏红花素对缺氧条件下RMC活性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法改良Reichenbach等方法原代培养Müller细胞,并采用GFAP和Vimentin染色鉴定RMC。RMC培养基中加入终浓度10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L藏红花素,于1~7d计数细胞,于24h和48h台盼蓝染色测定细胞活性,对照组RMC培养基中未加入藏红花素。培养液中加入终浓度为200μmol/L的CoCl2建立化学缺氧模型。实验分4组:缺氧组(H组)、藏红花素处理组(C组)、缺氧+藏红花素处理组(HC组)和正常对照组(NC组),其中C和HC组培养液中加入10μmol/L藏红花素。处理24h,台盼蓝染色检测细胞活性,采用Westernblot法半定量检测GFAP的表达。结果含10μmol/L和50μmol/L藏红花素的培养液中,细胞生长无抑制;100μmol/L藏红花素的培养液中细胞增生受到抑制,培养24h和48hRMC活性分别为(68±7)%、(59±9)%,与对照组相比,明显降低(t24h=3.723,P<0.05;t48h=4.103,P<0.05)。在缺氧条件下,正常细胞和10μmol/L藏红花素的培养液中细胞活性受到明显抑制,藏红花素可减轻缺氧环境对细胞活性的抑制作用。在缺氧条件下,GFAP表达明显升高(t=2.945,P<0.05);藏红花素可部分抑制GFAP高表达(t=3.362,P<0.05)。结论缺氧能诱导体外培养视网膜Müller细胞死亡,适合浓度藏红花素可抑制缺氧诱导的视网膜Müller细胞死亡。
- 郭斌范钦华王莉张志强刘晓娟
- 关键词:细胞低氧视网膜MÜLLER细胞胶质纤维酸性蛋白
- 复杂眼外伤处理中Ⅰ期玻璃体手术联合睫状体离断复位观察被引量:12
- 2015年
- 目的:评价Ⅰ期玻璃体手术联合睫状体缝合治疗合并睫状体离断的复杂眼外伤的临床治疗效果。方法:观察2011-01-01/2014-10-31期间连续收治严重眼外伤合并睫状体离断患者13例13眼。其中2眼钝挫伤,7眼穿通伤和4眼破裂伤,伴随症状有角膜裂伤、角巩膜缘裂伤、巩膜裂伤、前房积血、虹膜根部离断、瞳孔括约肌撕裂、晶状体破裂或脱位、玻璃体积血、视网膜挫伤、视网膜脱离、脉络膜挫伤、脉络膜上腔出血、球内异物等。术前检查视力无光感~手动/眼前。术前UBM或三面镜检查或术中发现睫状体离断,脱离范围2∶00~6∶00。钝挫伤患者眼压分别5.4mmHg和10.2mmHg。手术时间为伤后6h^3d,主要操作包括关闭角膜巩膜伤口、切除玻璃体、切除晶状体、清除积血、视网膜复位、缝合方法复位脱离睫状体。脉络膜出血采用巩膜外穿刺切开放液处理。眼内采用惰性气体或硅油填充。结果:术后检查13例脱离睫状体均复位。术后1mo,患眼视力有不同程度提高,检查最佳矫正视力手动/眼前~4.7,眼压9.8~24.5mmH g(除外严重角膜裂伤缝合术后角膜水肿1眼),术后三面镜或UBM检查睫状体复位,B超或眼底镜检查视网膜复位。结论:对于合并睫状体离断复杂眼外伤眼,采用Ⅰ期玻璃体手术联合睫状体缝合治疗可有效恢复眼球解剖结构,并有效保存视功能。
- 郭斌王莉范钦华张志强花雷余肖
- 关键词:眼外伤玻璃体切割联合手术