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猪肺炎支原体P46基因的克隆及表达: 参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET...; 迟灵芝刘茂军冯志新单虎邵国青; 关键词：猪肺炎支原体重叠延伸PCR 定点突变; 文献传递

RAPD法分析猪肺炎支原体DNA多态性: 2009年; 应用RAPD技术，用7条随机引物对7株猪肺炎支原体和2株猪鼻支原体基因组DNA进行了多态性分析，结果表明，7条引物共产生244个扩增片段，其中有92个是多态性片段。相似系数分析结果显示，国际标准株J株和国内分离株之间相似性系数为0．139～0．333，猪肺炎支原体和猪鼻支原体之间相似性系数为0．203～0．400。; 邵国青刘茂军甘源冯志新王海燕; 关键词：猪肺炎支原体 RAPD DNA多态性

副猪嗜血杆菌抗体间接血凝试验被引量：3: 2007年; 副猪嗜血杆菌病的诊断是当前研究的热点和难点之一。本试验的目的是为建立间接血凝试验诊断HPS的方法,为检测该病提供依据。结果表明,间接血凝法在检测HPS抗体方面有较高的特异性和敏感性,具有操作简单、耗时少,直接测出抗体效价的高低,不需要复杂的仪器设备和熟练的技术人员等优点,具有良好的推广和应用价值。; 刘茂军周勇岐丁美娟苏国东邵国青; 关键词：副猪嗜血杆菌间接血凝

副猪嗜血杆菌PCR鉴定方法的建立被引量：8: 2007年; 以HPS的16SrRNA中的基因序列设计合成引物,进行PCR扩增,标准菌株NR4、SW124、SW114、SW140和分离株XX、FS在预计的821bp位置上扩增出特异性条带,NJING株、胸膜肺炎(APP)等没有特异性条带产生。这证明PCR检测副猪嗜血杆菌具有较高的特异性和敏感性。; 周勇岐刘茂军苏国东朱晓玮丁美娟邵国青; 关键词：副猪嗜血杆菌 PCR

猪支原体肺炎可疑肺组织PCR检测方法的建立被引量：11: 2009年; 建立了病猪肺脏组织的处理方法和DNA提取方法,根据猪肺炎支原体的P36基因设计一对引物,建立猪肺炎支原体PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验,使用建立的方法检测了临床样品。结果表明,建立的检测方法能成功从猪支原体肺炎可疑肺组织中扩增出目的条带,成功建立了猪支原体肺炎可疑肺组织PCR检测方法,为该病的诊断提供了条件。; 刘茂军张映邵国青姜俊兵冯志新王海燕孙佩元甘源; 关键词：猪支原体肺炎肺组织 PCR

抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法的建立被引量：5: 2009年; 为了更准确地对猪肺炎支原体感染及免疫状况进行检测,作者拟建立抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法。在比较了猪肺炎支原体全菌抗原和粘附因子P97R1原核表达蛋白后,选择后者作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗,并分别对包被抗原的浓度、样品的孵育时间、二抗与三抗的最佳稀释度和作用时间以及显色液的作用时间作了优化。最终建立了稳定而特异的抗猪肺炎支原体IgA的间接ELISA检测方法。批间与批内试验结果证明该方法具有很好的稳定性。初步应用表明,该方法可用于猪肺炎支原体感染或免疫状态的临床监测。; 逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青; 关键词：猪肺炎支原体 IGA 间接ELISA

猪细菌性呼吸系统疾病的变化与防控被引量：1: 2009年; 呼吸系统疾病最主要是影响猪只的生长,要想正确地处理好它,最好是能够管理好引起疾病的那些应激因素。; 邵国青; 关键词：猪肺炎支原体呼吸系统疾病细菌性环境控制副嗜血杆菌蓝耳病病毒

弓形虫ITS-1序列PCR诊断方法的建立被引量：13: 2008年; 目的本文旨在为弓形虫感染的临床病例检测建立特异性PCR诊断方法。方法本研究以弓形虫ITS-1序列为种特异性遗传标记,采用有限稀释法稀释速殖子DNA,经PCR扩增,检测该方法的敏感性;用同一引物扩增鸡柔嫩艾美耳球虫原虫和弓形虫,检测PCR方法的特异性。人工感染小鼠和家兔,用组织触片法和PCR方法检测感染动物的组织,并检测10头临床疑似病猪的肺脏、肺门淋巴结、脾脏、肾脏和肝脏等组织,比较两者的敏感性。结果该PCR方法最低可以检测1pg弓形虫速殖子DNA(相当于10个速殖子的DNA);鸡柔嫩艾美耳球虫原虫未扩增出特异条带,仅弓形虫出现特异条带(300bp)。组织触片和PCR方法对人工感染小鼠组织DNA的检出率均为87.5%(7/8),对人工感染家兔的检出率分别为50%(3/6)和66.7%(4/6),对临床疑似弓形虫病猪检测的阳性率均为20%,两种方法的检查结果基本一致。结论本试验结果表明,PCR技术可以作为弓形虫感染动物的诊断与检测方法。; 邵国青杨莉莉王继春刘茂军周勇岐孙佩元杜改梅吴叙苏刘冬霞; 关键词：弓形虫 PCR ITS-1

张家港市生猪高热病的现状及防控对策被引量：2: 2008年; 目的张家港市生猪高热病呈多病体混合感染的态势,发病以外地调入生猪和饲养管理差的猪场为主,存在病原传播的隐患及病死猪无害化处理难度大等特点,需要采取以基础免疫为主综合性的防控措施,加强疫情监测、消毒灭源、检疫监督、畜牧兽医技术指导及强化无害化处理等工作,科学防疫,群防群控,以实现"力争不发生,确保不流行"的防控目标。; 朱新华朱清妹张文飞汤丹刘建明; 关键词：高热病

4株高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的分离与鉴定被引量：8: 2008年; 2007年7月从江苏某些猪场采集的具有明显高热症状的病料组织中分离出4株病毒，经对病毒的TCID50测定、血清学试验、病毒基因鉴定，确认这4株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒。病毒基因序列分析发现：4株病毒的NSP2基因均存在2处共30个氨基酸缺失，缺失氨基酸分别位于481位、532～560位。氨基酸序列同源性分析可见：分离株与VR2332株、MLV株的同源性很低，在60．3％至68．6％之间；与国内疫苗株CH-1a的同源性为83．1％～83．7％；与国内分离的变异株JXAI株、HUN4株、HB-1（sh）／2002株同源性很高，为91．2％～98．5％；同时4株分离株之间的同源性很高，为99．3％～100．0％。系统发育树表明：分离的4个毒株与JXAI毒株和HUN4株有较近的亲缘关系，与其他株的亲缘关系较远。动物回归试验表明，4株病毒均可以引起仔猪明显的临床高热症状。; 李贺侠刘茂军甘源张理航孙佩元张宁吴叙苏邵国青; 关键词：高热综合征猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒

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