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辽宁省科技厅科技攻关项目(200822500811)
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王维林
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中枢神经系统原发性神经外胚层肿瘤干细胞的分离与鉴定
2010年
目的从中枢神经系统原发性神经外胚层肿瘤(Central nervous system primitive neuroectodermal tumor, CNS-PNET)中分离并鉴定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)。方法应用无血清的干细胞培养基,分离CNS-PENT的细胞球细胞,应用二代细胞球形成分析、免疫细胞化学染色以及不同亚群肿瘤细胞裸鼠颅内接种等方法,进行CSCs鉴定。结果2种CNS-PNET细胞在干细胞培养条件下均形成了细胞克隆球,部分细胞球细胞均表达了神经干细胞标记抗体Sox2和Nestin。原代细胞球在连续传代培养中均可形成2代细胞球,且也能表达Sox2和Nestin。在血清的刺激下细胞球细胞可分化为多种形态的细胞,分化细胞亚群免疫染色均为阳性。10。个CNS-PNET细胞球细胞在颅内接种后几乎全部裸鼠形成肿瘤,相反,同等数量的原代肿瘤细胞接种后未见肿瘤生长。结论使用无血清的干细胞培养条件可以简便快捷的培养并分离出CNS-PNET的悬浮细胞克隆球体,具备自我更新、多向分化、体内成瘤的基本特征,并能表达于细胞的标记抗体,可以作为理想的CSCS进行一系列的后续研究。
赵红宇
蔡炜嵩
金辉
王维林
关键词:
肿瘤干细胞
细胞分离
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