江苏省医学重点人才培养基金(RC2007005) 作品数:14 被引量:129 H指数:6 相关作者: 周乙华 胡娅莉 潘金顺 周锦勇 庄辉 更多>> 相关机构: 南京大学医学院附属鼓楼医院 北京大学 东南大学 更多>> 发文基金: 江苏省医学重点人才培养基金 国家自然科学基金 江苏省医学领军人才基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
乙型肝炎病毒变异与肝细胞癌发生关系 被引量:1 2011年 乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因组复制时,以病毒前基因组RNA作为模板合成子代病毒DNA,催化该过程的逆转录酶缺乏校对功能,所以HBV易出现变异。近年来,各国学者通过比较肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者和非HCC患者的HBV基因序列,发现HBV基本核心启动子区的A1762T/G1764A变异或T1753V变异、增强子Ⅰ区的G1053A或G1229A变异、前S蛋白的F141L变异、前s2区基因缺失变异和x基因的截短变异,分别是HCC的易患因素,而前c区常见的G1896A变异,与HCC的发生无关。增强子Ⅱ区的C1653T变异在c基因HBV感染中可能与发生HCC有关,而在A基因型可能无关。 朱冬梅 周乙华关键词:乙型肝炎病毒 基因变异 肝细胞癌 常规免疫预防阻断乙型肝炎病毒母婴感染的效果 被引量:41 2011年 目的评价免疫预防措施在实际应用中阻断乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)母婴感染的效果,阐明孕妇孕晚期使用乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)能否减少HBV母婴感染。方法将2002年7月至2004年8月江苏省14个县市的419例乙型肝炎表面抗原(hepatitis Bsurfaceantigen,HBsAg)阳性孕妇所分娩子女作为研究组,同地区同期的453例HBsAg孕妇分娩的子女作为对照组,于2009年10月至2010年3月期间对2组研究对象进行随访,调查母亲孕期HBIG使用情况以及子女出生后HBIG和乙型肝炎疫苗接种情况,检测儿童HBV血清标志物。率的比较采用7。分析或者Fisher精确概率法,均数的比较采用t检验。结果研究组实际随访298例(71.12%),其中11例(3.69%)HBsAg+;而随访的328例(72.41%)对照组中,HBsAg阳性率为0.00(x2=12.32,P〈0.01)。共11例儿童HBsAg+,其母亲均为HBsAg和HBeAg同时阳性,除1例具体情况不详外,9例儿童在出生时明确没有使用HBIG或延迟接种疫苗,仅1例同时规范使用了HBIG和乙型肝炎疫苗。2组儿童抗HBs阳性率分别为69.46%和69.21%(x2=0.01,P=0.95)。孕晚期注射HBIG的92例孕妇中,2例(2.17%)儿童HBsAg+;未使用HBIG的197例孕妇中,9例(4.57%)儿童HBsAg+(x2=0.98,P=0.51)。结论江苏省常规免疫预防措施在阻断母婴HBV感染方面取得了良好的效果,但对HBV携带孕妇(特别是HBeAg+者)的新生儿仍需强调及时注射HBIG。孕妇孕晚期使用HBIG不能减少母婴HBV感染。 王志群 张姝 刘启兰 骆超 周乙华 胡娅莉关键词:肝炎病毒 乙型 乙型 疾病传播 肝炎 乙型 4型戊型肝炎病毒ORF2多肽的二聚体特性和抗原性特征 被引量:8 2008年 目的研究4型戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)开放阅读框架2(open reading frame2,ORF2)编码的多肽二聚体特性和抗原性特征。方法从患者血清克隆HEV ORF2基因,在大肠杆菌中表达不同长度的ORF2多肽,并表达点突变多肽,纯化后在SDS—PAGE不同条件下分析二聚体特性,同时用Western blot分析其抗原性特征。结果由459~607位氨基酸构成的ORF2多肽能形成二聚体,而在氨基端截短13个氨基酸或在羧基端截短13个氨基酸均不形成二聚体,562位天冬酰胺、595位异亮氨酸分别突变后在SDS作用下仅以单体存在。Western blot显示,抗-HEV仅与二聚体的ORF2多肽反应,而不与单体ORF2多肽或截短肽反应。结论4型HEV ORF2多肽形成二聚体必须含有459—607位氨基酸,其中562位和595位氨基酸突变能影响二聚体的稳定性。该多肽的抗原性取决于二聚体结构。 潘金顺 庄辉 吴超 周锦勇 唐勤 周乙华关键词:戊型肝炎病毒 二聚体 抗原性 点突变 利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性 被引量:6 2009年 目的研究用戊型肝炎病毒4型(HEV-4)开放读码框架(ORF)2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽(459—607位氨基酸)及其截短多肽(472~607位氨基酸)为抗原分别包被ELISA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗.HEVIgM,并用免疫印迹法(Western blot,WB)确认,逆转录(RT).PCR检测HEVRNA加以比较。结果WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459—607多肽二聚体反应,而不与其单体及472~607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗.HEV IgM均能与459~607多肽反应,而不与472~607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450nm吸光度(A450)值之差小于0.5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT—PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论ORF2 459~607多肽可有效检测抗-HEV IgM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。 毕永春 潘金顺 庄辉 孙静 吴超 唐勤 周乙华关键词:戊型 免疫球蛋白M 病毒蛋白质类 假阳性反应 人白细胞抗原和细胞因子基因多态性对接种乙型肝炎疫苗后抗体应答的影响 被引量:2 2012年 接种乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎病毒感染最有效的措施,但仍有5%~10%的接种者不能产生有效的乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)应答。免疫相关基因的多态性可影响机体对各种疫苗的体液免疫应答。近年来,各国学者比较了免疫相关基因的多态性在接种疫苗后不同抗-HBs水平人群的分布情况,发现人类白细胞抗原Ⅰ类区(A、B、C)、Ⅱ类区(DP、DQ、DR)、Ⅲ类区(C4A)和细胞因子基因如白介素-2(-330)、肿瘤坏死因子-α(-308)、干扰素-γ(5644)等的基因多态性可影响乙型肝炎疫苗的体液免疫应答,这些研究结果有助于了解乙型肝炎疫苗接种后的免疫应答机理。 朱冬梅 王洋阳 周乙华关键词:基因 HLA抗原 细胞因子类 疫苗 采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体 被引量:3 2009年 目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清抗-HEV IgM,并对部分阳性标本用免疫印迹法(Western blot,WB)确认。结果:用本室ELISA试剂检测33例戊型肝炎患者血清,抗-HEV IgM均阳性,符合率为100%;用万泰公司试剂检测阳性31例,符合率为93.9%。344例普通人血清中,本室试剂检测抗-HEV IgM阳性11例,而用万泰试剂检测仅其中6例显示阳性;对本室试剂阳性而万泰试剂阴性的5例进一步用WB检测,抗-HEV IgM均阳性。结论:本室制备的ELISA试剂可准确高效地检测血清抗-HEV IgM。 潘金顺 周镇先 毕永春 吴超 周乙华关键词:戊型肝炎 酶联免疫吸附测定 特异性IGM抗体 母源性抗-HBs对新生儿接种乙型肝炎疫苗的远期影响 被引量:2 2010年 目的:观察新生儿体内母源性乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)对乙型肝炎疫苗接种后抗体应答的远期影响。方法:2006年10月-2007年1月在南京大学医学院附属鼓楼医院产前检查并住院分娩的单胎足月妊娠妇女中,选择抗-HBs阳性孕妇32例,抗-HBs阴性孕妇32例,其新生儿均按0、1、6方案接种重组(酵母)乙型肝炎疫苗,检测两组儿童乙型肝炎疫苗第3针接种后2年血清抗-HBs浓度。结果:新生儿接种乙型肝炎疫苗第3针后2年,母源性抗-HBs阴性组与阳性组儿童抗-HBs阳性率分别为90.6%与87.5%,其抗-HBs几何平均浓度分别为73.48mIU/ml与75.49mIU/ml,两组间抗-HBs阳性率与GMC的差异均无统计学意义(P=1.000,P=0.778);6例母源性抗-HBs>1000mIU/ml儿童中1例抗-HBs转阴(16.7%),而母源性抗-HBs<1000mIU/ml组和母源性抗-HBs组的儿童抗-HBs转阴率分别仅为7.69%和11.1%,但差异无统计学意(P=0.811)。结论:新生儿目前按照0,1,6方案接种乙型肝炎疫苗,能够有效保护其抵抗乙型肝炎病毒的感染;母源性抗-HBs对新生儿接种乙型肝炎疫苗后抗体应答可能不产生远期的影响,但仍需大样本进一步研究。 骆超 武巧珍 何凤香 许碧云 周乙华 胡娅莉关键词:抗-HBS 乙型肝炎疫苗 有效预防乙型肝炎病毒母婴感染的策略 被引量:14 2010年 慢性乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染及其相关疾病严重危害我国居民健康。慢性HBV感染指乙型肝炎表面抗原(hepatitis Bsurfaceantigen,HBsAg)阳性持续6个月以上的状态,如果肝功能正常,称慢性HBV携带(又称HBV携带);如肝功能异常,则为慢性乙型肝炎。因此, 周乙华 胡娅莉关键词:慢性乙型肝炎病毒 母婴感染 慢性HBV感染 HBV携带 肝功能正常 肝功能异常 足月新生儿母源性抗-HBs及其亚型的特性 被引量:7 2008年 目的分析了解足月新生儿母源性乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)及其亚型的特性。方法2006年12月至2007年02月在南京大学附属鼓楼医院住院分娩的单胎足月孕妇及其新生儿为研究对象,AxSYM全自动免疫分析仪定量检测63例抗-HBs阳性的单胎足月孕妇及其新生儿脐血婴儿和1月龄时的血清抗-HBs浓度,用固相酶联免疫法检测孕妇和脐血中抗-HBs4种IgG亚型的含量,及其中和乙型肝炎患者血清中HBsAg的能力。结果63例抗-HBs阳性孕妇分娩的新生儿脐血抗-HBs均为阳性,几何平均浓度为195.4mIU/ml,明显高于孕妇平均水平141.6mIU/ml(P〈O.01)。脐血抗-HBs浓度与母体水平高度相关(rs=0.976,P〈0.01)。无论是接种还是自然感染获得的抗-HBs,其4种kG亚型均可通过胎盘,均以IgGl为主。1月龄婴儿抗-HBs平均浓度是脐血的64%,推测被动获得的抗-HBs衰减半衰期约41d。脐血抗-HBs可中和乙型肝炎患者血清中HBsAg,其中和作用与抗-HBs浓度有关。结论kG型抗-HBs及其四种亚型均可通过胎盘,以IgGl为主。母源性抗-HBs可保护新生儿免受HBV感染。 武巧珍 胡娅莉 周乙华 王志群 陈建琴 叶晓东 蒋红关键词:乙型 免疫球蛋白G 抗-HEV IgA在急性戊型肝炎诊断中的评价 被引量:4 2010年 目的:探讨检测血清戊型肝炎病毒(HEV)特异性IgA抗体(抗-HEV IgA)诊断急性HEV感染的意义。方法:采用4型HEV ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽及其截短多肽制备ELISA检测试剂,检测92例可疑急性戊型肝炎患者血清,203例合格献血员血清中的抗-HEV IgA,IgM和IgG,并对部分阳性标本用免疫印迹法确认。结果:在92例可疑急性戊型肝炎患者血清中,抗-HEV IgA的阳性率(91.3%)低于抗-HEV IgM的阳性率(96.7%),两者联合检测的阳性率为98.9%,抗-HEV IgG阳性率为100%。在203例合格献血员血清中,抗-HEV IgA的阳性率与抗-HEV IgM的阳性率相同(3%),两者联合检测的阳性率为4.4%,抗-HEV IgG阳性率为14.8%。有4例抗-HEV IgM阴性而抗-HEVIgA阳性标本,且经免疫印迹实验确认阳性。结论:抗-HEV IgA检测急性戊型肝炎的灵敏度不高于抗-HEV IgM,但可作为抗-HEV IgM的补充,同时检测抗-HEV IgA和抗-HEV IgM可以提高急性戊型肝炎诊断的灵敏度。 张乐 潘金顺 周锦勇 毕永春 周乙华关键词:戊型肝炎 抗-HEV IGA 抗-HEV IGM 免疫印迹法