国家自然科学基金(30572105)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
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- 富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2在原发性大肠癌中的表达及其对预后的意义被引量：6
- 2008年
- 目的研究富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2（proline-rich tyrosine kinase-2，Pyk2）在人原发性大肠癌组织中的表达及其对大肠癌患者预后判断的意义。方法应用免疫组织化学方法检测108例原发性大肠癌组织中Pyk2的表达水平，分析Pyk2表达差异与预后的相关性及与临床相关因素的关系。结果在原发性大肠癌组织中Pyk2低表达率为56．5％（61／108）；Pyk2表达水平与肿瘤组织学分级显著相关（P〈0．05），与TNM分期显著相关（P〈0．05），而与患者年龄、肿瘤大小等无关（P〉0．05）；Pyk2高表达组患者根治术后五年生存率（66．0％）明显高于低表达组（31．4％）；多因素分析显示，Pyk2表达水平、肿瘤组织学分级以及TNM分期是影响大肠癌预后的因素。结论Pyk2表达水平是影响原发性大肠癌预后的因素之一，可与其他因素联合作为判断大肠癌预后的参考指标。
- 张宗耐汪欣李挺尹洪芳万远廉刘玉村朱静
- 关键词：结直肠肿瘤预后
- HIC-5/ARA55在人大肠癌中的表达及其作用机制被引量：7
- 2006年
- 目的:研究局部黏着蛋白HIC5/ARA55与大肠癌分化和转移的关系,以及对大肠癌细胞生长和凋亡的影响。方法:用RTPCR方法检测42例大肠癌组织HIC5/ARA55mRNA的表达,用Westernblot检测42例大肠癌组织蛋白水平的表达。用PCDNA4AHIC5/ARA55转染大肠癌Lovo细胞构建稳定转染细胞系,用流式细胞学方法检测HIC5/ARA55对大肠癌Lovo细胞系凋亡的影响,用Westernblot方法检测HIC5/ARA55对凋亡相关蛋白Bax和Bcl2的影响,用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测HIC5/ARA55对细胞生长的影响。结果:大肠癌组织中HIC5/ARA55在mRNA表达水平和蛋白表达水平均低于正常组织(P<0.05),HIC5/ARA55可以促进大肠癌细胞的凋亡,使凋亡促进蛋白Bax表达升高,凋亡抑制蛋白Bcl2表达降低。HIC5/ARA55可以抑制大肠癌细胞的生长。结论:HIC5/ARA55可能是一种具有肿瘤抑制作用的蛋白质,在大肠癌中表达明显降低,可以抑制大肠癌细胞生长,促进大肠癌细胞凋亡。
- 崔巍汪欣刘玉村万远廉郭宏杰朱静
- 关键词：结直肠肿瘤黏蛋白类基因表达细胞凋亡
- RNA干扰抑制pyk2表达对大肠癌细胞凋亡和增殖的影响
- 2010年
- 目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosin kinase-2,pyk2)对Lovo大肠癌细胞凋亡和增殖的影响。方法利用两组构建有pyk2 shRNA(短发夹RNA,会在细胞内顺序反应而产生siRNAs)的质粒载体瞬时转染Lovo细胞系,设立空白对照组和阴性对照组,应用PCR和western blot方法检测转染组和对照组细胞中pyk2 mRNA与蛋白表达水平的变化,通过细胞计数法来绘制细胞生长曲线,利用流式细胞技术(FCM)检测转染组与对照组细胞在凋亡和细胞周期S期分布的差异。结果转染pyk2shRNA质粒的Lovo细胞凋亡水平明显低于对照组,S期细胞数显著增多,细胞绝对数增加,生长更加活跃。结论 pyk2能够升高Lovo大肠癌细胞的凋亡水平,降低其增殖水平。
- 边大鹏汪欣刘玉村万远廉张宗耐朱静
- 关键词：PYK2LOVORNAI凋亡
- 蛋白酪氨酸激酶Pyk2在胃癌中的表达及作用机制被引量：2
- 2008年
- 目的观察蛋白酪氨酸激酶Pyk2在胃癌组织中的表达，探讨Pyk2在胃癌中的作用机制。方法应用Western blot和荧光定量PCR方法检测正常胃黏膜组织和胃癌组织中Pyk2表达的差异。应用质粒转染的方法，将质粒PKH3-Pyk2和PKH3-PKM（PKM，dominant-negative Pyk2 mutant）转染胃癌细胞系BGC-803，观察凋亡相关蛋白bcl-2和bax的变化，探讨Pyk2在胃癌中作用机制。结果Western blot结果显示Pyk2蛋白在28例正常胃黏膜组织中均有表达，在胃癌组织中表达水平很低或几乎无表达，差异有统计学意义（t=3．53，P〈0．05）。荧光定量PCR结果显示：胃癌组织中Pyk2 mRNA表达水平明显低于正常胃黏膜组织，差异有统计学意义（t=8．02，P〈0．05）。转染PKH3-Pyk2质粒后，对凋亡抑制蛋白bcl-2影响不明显，而促凋亡蛋白bax的表达升高。结论Pyk2在正常胃黏膜组织中高表达，在胃癌组织中低表达。Pyk2可能通过上调bax蛋白的表达而促进胃癌细胞凋亡。
- 武颖超郭宏杰汪欣刘玉村万远廉朱静
- 关键词：胃肿瘤蛋白酪氨酸激酶脱噬作用
- 蛋白酪氨酸激酶2对人大肠癌细胞生长和肺转移能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2（Pyk2）对人大肠癌细胞生长和肺转移能力的影响。方法利崩人大肠癌细胞株SW480，通过止义及反义eDNA稳定转染技术，分别构建Pyk2高表达和低表达的细胞SW480-Pyk2-和SW480-Pyk2-，并以未转染质粒和转染空质粒的SW480细胞作为对照。分别建辽裸鼠皮下种植瘤和肺转移模型。6周后，切取皮下种植瘤体并称重；切取肺转移标本，在显微镜下计数转移灶数目。结果Westernblot法证实Pyk2高表达、低表达及宅质粒细胞构建成功；SW480-Pyk2’组（MeanRank=6．19）皮下种植瘤质量明显低于SW480组（MeanRank=18．69）和SW480-Vector组（MeanRank=14．12），而SW480-PI，k2-组（MeanRank=27．00）日月显高于SW480组和SW480-vector组，差异有统计学意义（x2=20．646，P〈0．05）；SW480-Pyk2’组（MeanRank=6．62）肺转移灶数目明显少于SW480组（MeanRank=16．06）和SW480-veetor组（MeanRank=14．94），SW480-Pyk2组（MeanRank=28．38）肺转移灶数目明显多于SW480组和SW480-vector组，差异有统计学意义（x2=21．948，P〈0．05）；并且种植瘤质量和肺转移灶数与Pyk2的表达量均旱明显负相关（r=-0．776，-0．777，P〈0．05）。结论Pyk2在裸鼠体内能够抑制大肠痈细胞的生长和肺转移能力。
- 武颖超郑启军汪欣刘玉村万远廉朱静
- 关键词：结直肠肿瘤血行转移
- Hic-5/雄激素受体相关蛋白55对大肠癌细胞和皮下种植瘤超微结构的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 观察Hic-5/雄激素受体相关蛋白55（ARA55）对大肠癌细胞和皮下种植瘤超微结构的影响.方法 在电子显微镜下观察LoVo细胞、稳定转染空质粒和稳定转染Hic-5/ARA55质粒的LoVo细胞的细胞器、细胞连接等超微结构.建立裸鼠皮下种植瘤模型,7周后收取瘤体标本,在电子显微镜下观察各组瘤体的细胞器、细胞连接等超微结构.结果 电子显微镜下显示LoVo-Hic-5/ARA55组细胞和种植瘤体细胞连接数量增多,并且发育良好;胞质中的细胞器较多,主要为粗面内质网.LoVo、LoVo-Voctor组细胞和种植瘤体细胞连接少,且发育不良;胞质中的细胞器少,但游离核糖体丰富.结论 Hic-5/ARA55可使大肠癌细胞的细胞连接数量增加且发育良好,细胞向成熟发展,这可能是Hic-5/ARA55在大肠癌发生、发展中的作用机制之一.
- 武颖超汪欣刘玉村万远廉朱静
- 关键词：结肠直肠肿瘤雄激素受体电镜超微结构
- Pyk2对人类结肠癌细胞肝转移能力及超微结构的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究在裸鼠结肠癌肝转移模型中,富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)对人结肠癌细胞肝转移能力和超微结构的影响。方法:利用正义及反义cDNA技术,在人结肠癌细胞系SW480基础上,构建Pyk2高表达的细胞系SW480-Pyk2+及低表达的细胞系SW480-Pyk2-作为实验组,并以转染空载体的细胞系SW480-vector和原细胞系SW480作为对照组。4组共32只4周龄的Babl/c nu/nu雄性裸鼠,用脾注射保留脾脏法构建裸鼠肝转移瘤模型。6周后处死裸鼠,用Western blot检测瘤细胞中Pyk2蛋白的表达,计数肝转移瘤数目,电子显微镜下观察肝转移瘤细胞的超微结构。结果:6周后裸鼠肝转移模型建立成功,Western blot显示SW480-Pyk2+组的蛋白表达量明显高于空载体组(SW480-vector)和SW480组,SW480-Pyk2-组的蛋白表达量明显低于SW480组和SW480-vector组;肝转移瘤计数显示SW480-Pyk2+组明显少于SW480-vector组及SW480组,SW480-Pyk2-组明显多于SW480-vector组及SW480组(P<0.05),而SW480-vector组与SW480组之间无明显差异;电子显微镜下观察发现,SW480-Pyk2+组细胞连接发育较成熟,有形成腺腔趋势,微绒毛较多,细胞器较多,粗面内质网较多,细胞异型性较轻;而SW480-Pyk2-组细胞连接发育不良,细胞器少,微绒毛短小而稀疏,细胞核异形明显,有核沟。结论:Pyk2能减少结肠癌肝转移灶的数量,改善细胞的异型性和细胞连接发育,并可能通过此机制抑制肿瘤转移。
- 郑启军汪欣胡刚万远廉刘玉村朱静
- 关键词：结肠肿瘤肝转移超微结构
