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吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(2013-354)
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1
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吕绍武
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含硒抗病毒多肽的半胱氨酸缺陷型表达及鉴定
2014年
目的:在大肠杆菌中进行含硒抗病毒多肽的可溶性半胱氨酸缺陷型融合蛋白的表达,并对其纯化蛋白进行生物学活性的初步鉴定。方法:将含硒抗病毒多肽Se-GBVA10基因克隆到GST融合表达载体pGEX-2T中,转化至半胱氨酸缺陷型大肠杆菌BL21cysE51后进行半胱氨酸缺陷型表达,通过谷胱甘肽Sepharose 4B亲和柱纯化目的蛋白质,并对其含硒量、抗病毒活力等性质进行初步鉴定。结果:利用半胱氨酸缺陷型表达法成功地可溶性表达了sjGST-Se-GBVA10和sjGSTGBVA10融合蛋白,并经凝血酶切后获得了纯化的Se-GBVA10和GBVA10抗病毒多肽。测定SeGBVA10的含硒量为0.974 mol/mol peptide,GPX活力为47.52 U/μmol,其EC50为21.73μmol/L,CC50为849.41μmol/L。结论:Se-GBVA10具有与GBVA10相同的抗病毒活性,并具有一定的抗氧化活力。
王程
隋春红
闫岗林
吕绍武
牟颖
关键词:
硒
谷胱甘肽过氧化物酶
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