浙江省科技计划项目(2008C22002)
- 作品数:7 被引量:92H指数:6
- 相关作者:郭卫东陈文荣曹诣斌廖芳蕾石瑞更多>>
- 相关机构:浙江师范大学金华职业技术学院更多>>
- 发文基金:浙江省科技计划项目浙江省自然科学基金国家留学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 低温胁迫下佛手和枳乙烯应答因子6(ERF6)表达变化的比较分析被引量:9
- 2011年
- 以柑橘属寒敏感植物佛手‘青皮’品种叶片cDNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得一个1160bp的乙烯应答因子(ethylene response factor,ERF)基因的cDNA序列,其基因编码区共999bp,含有一个保守的AP2/EREBP结构域,与拟南芥AtERF6为同源基因,命名为CmsERF6(GenBank登录号为HQ698835)。4℃低温处理佛手和枳(柑橘属近缘种耐寒植物)植株,测定其寒胁迫生理指标(电解质渗出率、丙二醛含量)。使用实时荧光定量PCR,对佛手和枳叶中的ERF6表达含量进行测定分析,结果表明:低温对佛手与枳的ERF6表达均具有诱导作用,且表达量的变化趋势存在明显的差异。尤其在枳中,ERF6的表达较对照组上升约4000倍,且电解质外渗率的变化与ERF6基因表达量变化具有一致性,说明ERF6基因参与低温胁迫应答。
- 曹诣斌石瑞陈文荣郭卫东
- 关键词:佛手低温胁迫
- 佛手挥发油抑菌活性的研究被引量:41
- 2009年
- 以水蒸气蒸馏法对佛手挥发油进行提取,采用滤纸片法比较了不同提取部位挥发油抑菌作用的大小,测定了佛手果挥发油对各供试菌种的抑菌圈直径,同时就不同浓度及pH下佛手果挥发油的抑菌效果进行初步研究。结果表明:佛手果实挥发油的抑菌效果最好,佛手叶中挥发油只对酵母菌有一定的抑制作用,而枝中挥发油没有抑菌作用。用水蒸气蒸馏法提取果实挥发油得率为1.56%;佛手果实挥发油对酵母菌大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均有较明显的抑制作用,其中对枯草杆菌的抑菌效果最强,对金黄色葡萄球菌的抑制作用相对较弱;并且挥发油具有很好的热稳定性及抑菌持久性,佛手果挥发油在100%、50%、25%三个浓度上的变化对其抑菌效果的影响明显,且在中性和偏酸性范围内抑菌效果最好。四种供试菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为:枯草杆菌1.25%、大肠杆菌1.25%、金黄色葡萄球菌2.5%、酿酒酵母2.5%。
- 郭卫东郑建树邓刚陈文荣孙杰
- 关键词:佛手挥发油抑菌最低抑菌浓度
- 佛手果形发育观察及果形相关基因表达分析被引量:8
- 2016年
- 通过超景深显微镜和扫描电镜观察不同发育阶段的佛手(Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle)花芽形态,发现佛手指状部分并非发育自柱头,而是来自雌蕊子房。同时,在佛手中分离了CmsSUN20、CmsOFP7、CmsOFP12和CmsYABBY5等4个果形相关基因的全长,与甜橙序列比对的相似性大于95%,构建进化树分析发现其与甜橙聚在一个分支。收集佛手和香橼(C.medica L.)果实发育相同阶段不同组织(叶片,花瓣,雌蕊,雄蕊)材料,以qRT-PCR法分析了上述4个基因的表达。结果表明CmsSUN20在佛手雌蕊的表达显著高于香橼,在其他组织中差异不显著或相反,表明该基因可能与佛手雌蕊发育有关。CmsYABBY5在佛手雌蕊和雄蕊中都显著高表达,而在叶片中却显著低表达,表明CmsYABBY5有可能对佛手雌蕊和雄蕊发育有重要作用。而CmsOFP7和CmsOFP12在佛手叶片、雌蕊和雄蕊中均高表达,由于并非特异在雌蕊中高表达,所以可能并不对佛手果形建成起决定作用。
- 廖芳蕾韩晓霞陈文荣郭艳张晨晓陈泽宇周亚艳郭卫东
- 关键词:佛手
- 佛手种质资源遗传多样性的ISSR分析被引量:10
- 2013年
- 收集佛手(CitrusmeicaL.vat.sarcodactylisSwingle)13份、枸橙(cmedicavaEyunnanensisDing)1份及香椽(Cme~caL.)6份,共20份种质资源,其中14份成功引种在佛手资源圃。在对其中14份资源生物学特性进行描述的基础上,采用ISSR分子标记技术对20份样品进行遗传多样性分析。筛选出的11条引物共检测到102条DNA条带,其中58条为多态性条带,多态性条带比率为56.9%。各样品之间的遗传相似性系数在0.608—0.990之间。聚类分析结果表明,当遗传系数为O.798时,可将供试材料分为枸橙、香橼和佛手3个类群,新发现的3个芽变材料是佛手中一个新的类群。
- 廖芳蕾陈民管桑丹陈文荣郭卫东
- 关键词:佛手种质ISSR
- 佛手GRAS基因的克隆及表达分析被引量:27
- 2011年
- 利用抑制消减杂交法从芸香科柑橘属不耐寒植物佛手中分离得到了一个表达序列标签(EST)片段,结合RACE技术克隆获得该基因的1 669 bp序列,编码区长1 236 bp,编码413个氨基酸.通过Blastn同源序列比对分析,结果显示该基因与拟南芥已知的GRAS基因同源性较高;与GenBank数据库比对分析,表明该基因具有GRAS特有的保守结构域.因此,命名该基因为:CmsGRAS(GenBank登录号:JF440647).用荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)的方法研究了该基因在低温胁迫处理下的表达特性,结果显示该基因在低温胁迫后的表达量有明显的变化.
- 石瑞曹诣斌陈文荣郭卫东
- 关键词:佛手克隆
- 佛手低温胁迫相关基因的差异表达被引量:7
- 2013年
- 佛手(Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle)是药用及观赏价值都很高的经济植物,但它对低温反应敏感,容易发生冻害现象。因此,了解其冷敏感机制对提高抗寒性起着重要的作用。以佛手为试材,-4℃低温处理24 h后,采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)和半定量RT-PCR技术,分析和鉴定与冷敏感相关的差异表达基因。DDRT结果获得差异片段121个,经生物信息学分析,差异表达序列中有33条为功能已知序列,88条为未知序列(其中5条具有开放性阅读框);半定量结果获得34个阳性基因片段,其中上调基因片段29个,下调基因片段5个。除了3个基因功能未知外,其余基因主要涉及植物防御/应激反应,细胞壁的修饰,信号转导,代谢,氨基酸转运,氧化损伤,转录和蛋白质的合成,其中与植物防御/应激反应和光合作用有关的基因可能是造成佛手寒敏感的主要原因。
- 陈文荣叶杰君李永强张真真曹诣斌郭卫东
- 关键词:佛手低温胁迫半定量RT-PCR
- 佛手低温胁迫相关基因的差异表达研究
- 佛手(Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle)是芸香科柑橘属香橼的变种,具有较高的观赏价值和药用价值。浙江栽培的佛手具有树体矮小,适合制作观果盆景,栽培管理方便的特点,但是佛手...
- 陈文荣张真真郑建树郭卫东
- 关键词:佛手半致死温度MRNA半定量RT-PCR
- ERF6基因在5种柑橘属植物的表达差异及启动子分析
- 2018年
- 以柑橘属5种植物,枳、本地早、瓯柑、处红柚、佛手为材料,测定植物在低温胁迫下的抗寒性生理指标的变化,结合qRT-PCR实验检测ERF6基因在柑橘属不同物种响应低温的表达差异,并在佛手和枳中比较ERF6启动子序列结构。丙二醛含量测定结果表明,5种柑橘类植物抗寒性能力强弱顺序为枳>瓯柑>本地早>处红柚>佛手。qRT-PCR结果显示,ERF6基因表达量的上调与低温胁迫应答反应有关。对佛手、枳启动子的保守功能元件的分析结果表明,枳ERF6基因启动子与抗寒胁迫相关的顺式作用元件与佛手不同,推测可能是顺式元件的差异导致了低温胁迫能力的强弱。
- 徐瑞叶杰君邬怡静何芯磊朱友银陈文荣郭卫东廖芳蕾
- 关键词:柑橘抗寒性启动子低温胁迫