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反相高效液相色谱法测定生物转化体系中的甘草酸被引量：11: 2004年; 采用高效液相色谱法在HypersilC18色谱柱(4 6mmi d ×250mm,5μm)上以甲醇水冰醋酸(70∶30∶1,体积比)为流动相分离测定了甘草酸单铵盐生物(酶)转化体系中的甘草酸,流动相流速为1 0mL/min,紫外检测波长254nm。实验结果表明,该方法在进样量为0 2～20μg时具有良好的线性;样品的加标回收率为98%～103%,相应的相对标准偏差为0 16%～1 58%。方法简便、快速、可靠。; 李晖卢定强刘伟民; 关键词：高效液相色谱法甘草酸

青霉木质纤维素降解酶系研究进展被引量：38: 2007年; 越来越多的研究表明青霉属(Penicillium)真菌中的一些种类不仅能分泌组成齐全、酶活较高的木质纤维素降解酶系,而且具有易培养和生长快的优势.本文就国内外对青霉菌木质纤维素降解酶系研究的最新动态进行了综述,包括菌株的选育、纤维素酶系的特性与合成调控,以及基因分析与克隆.同时介绍了斜卧青霉纤维素酶系的生产与发酵工艺,以及酶解过程分析等相关研究进展.; 孙宪昀曲音波刘自勇; 关键词：青霉纤维素酶基因克隆

斜卧青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及与抗阻遏突变株JU-A10的比较被引量：5: 2008年; 【目的】研究斜卧青霉(Penicillium decumbens)114-2与其抗阻遏突变株JU-A10外切酶基因序列的差异。【方法】用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR扩增得到斜卧青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全长和cDNA全长。【结果】cbh1基因全长为1500bp,含有两个内含子,编码453个氨基酸(GenBank,EF397602)。克隆并分析了1.9kb的cbh1基因上游序列,分别发现了葡萄糖代谢抑制因子CREⅠ与纤维素酶转录调控蛋白ACEΙ的两个的潜在结合位点。【结论】在相同的培养条件下,其抗阻遏突变株JU-A10的外切酶活明显高于野生株114-2。两菌株的cbh1基因序列完全一致,说明外切酶活明显提高不是由于cbh1基因发生突变引起的。; 刘自勇孙宪昀曲音波; 关键词：斜卧青霉 TAIL-PCR

应用美兰吸附法测定纤维素表面积的讨论被引量：5: 2004年; 以Prism4.0软件包将不同纤维材料吸附美兰的数据拟合Scatchard方程、Klotz-Hunston方程、Langmuir方程的一般形式和单点双曲线吸附方程,据此研究了由美兰等染料分子在纤维基质表面上的吸附从而推算基质的表面积的方法机理和局限性。分析表明Langmuir模型和单点双曲线模型的拟合得到的饱和吸附量为外推值,会导致测量结果失真;而用Sigmoidal dose-response(Variable slope)模型拟合时,则能给出真实吸附量。研究结果还显示,由纤维素分子链自由羟基所介导的美兰吸附不会发挥主导作用,而红外ATR结果和美兰的脱吸附试验表明美兰在纤维素表面上的吸附应为物理吸附,所以根据美兰分子平卧于纤维表面面积162 ?,计算纤维表面积,得到了四种纤维材料的比表面积。但由于真实界面浓度的确定方法仍存在矛盾,也缺少一个直观的检测标准,因此文章中给出的数值仍为一相对的比较值。; 武彬王禄山张为灿赵越高培基; 关键词：附方纤维素 ATR 表面积分子链

中温纤维分解真菌尖镰孢Fusarium oxysporum中一种新的耐热内切葡聚糖酶被引量：2: 2005年; FusariumoxysporumL19是一株典型的中温真菌,从其培养液中分离到一种新的耐热内切葡聚糖酶(EGt).用传统的酶动力学方法,以CMC-Na为底物,30min的反应时间确定其最适反应温度为75℃;热稳定性指数衰减拟合曲线显示70℃半衰期为15.1min;该酶不作用于对硝基苯纤维二糖苷(pNPC).EGt对大多数金属离子及化学试剂不敏感,N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)的蛋白质侧链修饰表明,Trp处于其活性中心.N-末端氨基酸序列为SYRVPAANGFPNPDASQEKQ,基因测序以及广范的序列比对分析显示,EGt与已知的内切葡聚糖酶没有同源性.这是首次从中温真菌Fusariumoxysporum中分离到耐热纤维素酶,多种同工酶的表达可能有助于其适应复杂的生存环境.; 刘淑艳段新源卢雪梅高培基; 关键词：FUSARIUM OXYSPORUM 热稳定性生物制浆

纤维素酶分子改造和酶系改造: 2008年; 纤维素酶在将数量巨大的纤维素物质转化成人类急需的能源、食物和化工原料，净化环境和开辟新能源，实现人类社会的可持续发展等方面具有十分重要的意义。这种巨大的市场潜力使人们希望获得具有更优良性质的酶。比如对不溶性底物具有高降解能力的酶、在较高温度和碱性条件下稳定的酶、耐受末端产物抑制的酶，从而使之更加适合于生产应用。; 汪天虹秦玉琪曲音波; 关键词：纤维素酶分子改造酶系人类社会化工原料净化环境

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国家重点基础研究发展计划(2003CB716006)