国家自然科学基金(30270884)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：刘安西李杰贺秉军佟帆赵强更多>>
- 相关机构：南开大学中国农业科学院植物保护研究所西北农林科技大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- Pertussis toxin modulation of sodium channels in the central neurons of cyhalothrin-resistant and cyhalothrinsusceptible cotton bollworm, Helicoverpa armigera
- 2007年
- 百日咳毒素(PTX ) 禁止禁止的 heterotrimeric G 蛋白质(G 伪 _(i./o )) 的伪 - 子单元的激活并且调制电压门钠隧道，它可以是 pyrethroids 的主要目标之一。调查农业害虫抵抗的潜在的机制到 pyrethroid 杀虫药剂，我们在中央神经原在钠隧道上由 PTX 检验了调整第三—第 4 中间形态幼虫 cyhalothrin 抵抗(Cy-R ) 并且 cyhalothrin 易受影响(Cy-S ) Helicoverpa 有佩带徽章权利的人一旁边整个房间的补丁夹钳技术。孤立的神经原为 12 是有教养的—在改进 L15 昆虫培养基与或没有 PTX (400 ng/mL ) 的 16 h。结果证明 Cy-R 和 Cy-S 钠隧道展出了快动力学和 tetrodotoxin (TTX ) 敏感。 Cy-R 钠隧道展出了改变的 gating 性质不仅包括在电压依赖者激活(V_( 0.5act ))的 8.88-mV 权利移动和在在激活(V_( 0.5inact ))的电压依赖者的 6.54-mV 权利移动，而且是在钠隧道密度(I_(密度))的 duced 山峰(那中的55.2%个在 Cy-S 神经原)。Cy-R 钠隧道也显示出低易兴奋性，证实了由恰好在 5 激活潜力(V_( 行为 i )) 变—由 20 mV 的 10 mV 和山峰潜力(V_( 山峰)) 。PTX 施加了重要效果 onCy-S 钠隧道，减少在 70.04% 的钠隧道密度，由 14.41mV 的正确的变 V_(0.5act ) 和在 9 的 V_(0.5inact ) 。38 mV。它没引起在 Cy-R 钠隧道上面提及的参数的任何重要变化。在山峰电压的山峰的从潜伏的激活时间(T_( 山峰)) 并且在激活时间常数快(τ _( 在行为)) 在 Cy-S 和 Cy-R，神经原没被影响。结果建议对 pyrethroid 杀虫药剂抵抗的棉花一种蛾的幼虫包含不仅变化和电压门钠隧道的紧密相联的位的改变，而且可能含有 PTX 敏感的 G α _(i./o ) 的不安联合了发信号的转导小径。
- QIANG ZHAODE-LING KONGBING-JUN HEYAN-QIANG LIUXIAN-LIN FANAN-XI LIU
- 关键词：百日咳毒素三氟氯氰菊酯中枢神经钠通道
- 百日咳毒素对抗性及敏感棉铃虫神经细胞L型钙通道的调制作用
- 2006年
- 通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi／o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi／o不能活化,继而抑制Gαi／o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2+)通道．Ca(L)2+通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标．本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响, 以期从Ca(L)2+通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制．急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞．实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组．400 ng／mL PTX加入培养基中．采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L)．结果显示:(1)各组 Ca(L)2+通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52．06 ％和44．81％(P<0．01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2+通道电导可能增大．Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压向超极化方向移动5．1 mV (P<0．05),半数失活电压向超极化方向移动5．93 mV(P<0．05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2+通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2．42 mV(P>0．05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2+通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异．结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi／o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2+通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi／o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2+通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2+通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类�
- 赵强王勇孙丹刘燕强范贤林贺秉军刘安西
- 关键词：百日咳毒素L型钙通道全细胞膜片钳技术
- GTP和GDP类似物对棉铃虫神经细胞高电压敏感钙通道的调节作用被引量：3
- 2005年
- 以Ba2 + 为载流子 ,采用全细胞膜片钳法 ,研究了在电极液中分别加入G蛋白稳定激活剂GTPγS(GTP类似物 )和抑制剂GDPβS(GDP类似物 )对棉铃虫Helicoverpaarmigera 3龄幼虫神经细胞高电压敏感钙通道的调节作用。Ba2 + 电流记录时间为 2 0min。对照组和实验组的Ba2 + 电流在记录的初期均出现电流的增加现象 ,随后电流衰减 ,即“rundown”。对照组峰电流在第 2 0min时降为初始值的 (72 0 9± 12 80 ) %。电极内液中加入 2mmol LGTPγS可缓解电流的衰减现象 ,在第 2 0min时 ,峰电流为初始值的 (95 99± 7 93) % ,明显大于对照组的峰电流 (P <0 0 1) ,而且电流 电压 (I V)关系曲线向正电压方向移动。相反 ,电极内液加入 2mmol LGDPβS则导致峰电流衰减更加严重 ,第 2 0min时 ,峰电流仅为初始水平的 (41 95± 9 32 ) % ,显著小于对照组(P <0 0 1) ,但未见电流 电压 (I V)关系曲线的明显漂移。结果表明 ,棉铃虫神经细胞钙通道活动受G蛋白激活剂GTPγS和G蛋白抑制剂GDPβS的影响 ,提示G蛋白活动水平的改变调节钙通道的电流幅值和电压依赖性。
- 李杰佟帆贺秉军胡兆农刘安西
- 关键词：棉铃虫膜片钳
- cAMP和cGMP对棉铃虫神经细胞高电压激活钙通道的调节作用(英文)被引量：3
- 2004年
- 用全细胞膜片钳法研究了cAMP和cGMP对棉铃虫Helicoverpaarmigera 3龄幼虫胸腹神经节细胞高电压激活钙通道的调节作用。细胞外液中加入腺苷酸环化酶 (AC)激活剂福斯克林 (forskolin) 0 .1mmol L ,对于Ba2 + 介导的钙通道电流激活电压、峰电压、峰电流变化以及通道激活和电流达到峰值的时间无影响。电极内液中加入 1mmol L的cGMP则明显抑制峰电流 ,且抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性 ,而对激活电压、峰电压无影响。结果提示 ,棉铃虫神经细胞高电压激活钙通道的活动可能不受细胞内cAMP水平提高的影响 。
- 李杰杜育哲佟帆贺秉军刘安西
- 关键词：棉铃虫环磷酸腺苷环磷酸鸟苷膜片钳
- 霍乱毒素对三氟氯氰菊酯抗性及敏感棉铃虫神经细胞L型钙通道的调节作用(英文)被引量：2
- 2006年
- 霍乱毒素(CTX)可激活兴奋性异三聚体G蛋白(Gαs)的α_亚基和刺激电压门控L_型钙通道,而昆虫的L_型钙通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的作用靶点。为进一步探讨农业害虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗药性的作用机理,我们检测了CTX对三氟氯氰菊酯抗性及敏感棉铃虫Helicoverpaarmigera中枢神经细胞电压门控L_型钙通道的调节作用。分别急性分离三氟氯氰菊酯抗性及敏感的3～4龄棉铃虫幼虫胸腹神经节细胞,并在改良的L15培养基(加入或未加入700ngmL的CTX)中培养12～16h。钡离子为载流子,应用全细胞膜片钳技术记录电压门控L_型钙通道电流。结果显示,CTX可使敏感组棉铃虫神经细胞L_型钙通道的峰值电流密度增大36%、峰值电压左移5mV,但对抗性组棉铃虫神经细胞L_型钙通道无上述作用。并且,CTX对敏感组及抗性组棉铃虫神经细胞L_型钙通道的激活电位、翻转电位、激活曲线和失活曲线等其他一些参数的影响也不明显。在无CTX作用时,所检测到的抗性组与敏感组棉铃虫神经细胞L_型钙通道的上述参数值间差异不显著。结果提示,棉铃虫神经细胞内存在Gs腺苷酸环化酶(AC)cAMP蛋白激酶A(PKA)L_型钙通道信号调节系统;与敏感棉铃虫神经细胞L_型钙通道相比,三氟氯氰菊酯抗性棉铃虫神经细胞L_型钙通道的活性相对不易受到CTX调节,这可能与昆虫对拟除虫菊酯产生抗药性的机理有关。
- 赵强李杰刘燕强范贤林季青刘安西
- 关键词：棉铃虫三氟氯氰菊酯霍乱毒素膜片钳技术神经细胞
