国家自然科学基金(30930094)
- 作品数：15 被引量：24H指数：3
- 相关作者：卢亦成胡国汉崔勇骆纯贺华更多>>
- 相关机构：第二军医大学上海交通大学医学院附属仁济医院解放军第411医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰AKT2的表达对胶质瘤裸鼠移植瘤替莫唑胺敏感性的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究RNA干扰丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)对脑胶质瘤移植瘤的替莫唑胺疗效的改变。方法构建胶质瘤裸鼠成瘤模型,瘤内注射和腹腔内给替莫唑胺(TMZ)药物,以替莫唑胺化疗药物和AKT2短发夹结构RNA(AKT2-shRNA)表达载体对成瘤后的裸鼠瘤体进行联合干预治疗,进而观察并测量各组裸鼠肿瘤体积大小。DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)测定并计算分析各组裸鼠成瘤后肿瘤组织细胞的凋亡的变化。结果空白对照组、替莫唑胺化疗组、TMZ+阴性对照组、TMZ+AKT2干扰组裸鼠瘤体体积分别为:(669.34±98.73)mm3、(399.86±55.26)mm3、(383.81±34.01)mm3、(297.72±41.49)mm3;瘤体质量分别为:(1.25±0.26)g、(0.72±0.11)g、(0.69±0.07)g、(0.52±0.07)g。TMZ+AKT2干扰组其肿瘤体积及瘤体质量都明显小于空白对照组、替莫唑胺组和TMZ+阴性对照组,有显著性差异(P<0.05)。TUNEL实验结果显示:空白对照组、替莫唑胺化疗组、TMZ+阴性对照组、TMZ+AKT2干扰组裸鼠瘤体凋亡指数分别为:7.15%±1.04%、25.26%±2.71%、26.63%±3.46%、42.81%±5.97%。TMZ+AKT2干扰组其肿瘤凋亡情况明显高于空白对照组、替莫唑胺组和TMZ+阴性对照组,结果有显著性差异(P<0.05)。结论 RNA干扰AKT2能够显著提高裸鼠胶质母细胞瘤对TMZ化疗的敏感性。
- 崔勇张风林鲍晶应奇胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词：胶质瘤替莫唑胺
- Id2 shRNA慢病毒载体的构建及其转染后对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建能高效敲减分化抑制因子2(Id2)基因的短发夹状小干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,并观察敲减Id2对胶质瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响。方法设计并合成特异性针对Id2基因的shRNA序列,将其构建到慢病毒载体pGCSIL-GFP中。以含有Id2基因的质粒为模板,扩增Id2基因cDNA序列的特异性片段,插入真核表达载体pEGFP-N1-3FLAG。构建含Id2基因质粒和不同靶点的RNAi慢病毒载体,共转染入工具细胞293T,筛选出适合浓度慢病毒感染U251细胞株。MTT法检测敲减Id2后胶质瘤细胞增殖的改变,RT-PCR检测Id2敲减后U251细胞caspase 3的表达。结果构建后载体的PCR鉴定及DNA测序结果与预期一致。与对照组相比,转染Id2 shRNA的U251细胞增殖降低,凋亡率升高,caspase3表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建的针对Id2基因的RNA干扰慢病毒载体体外转染可抑制胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡。
- 赵振宇贺华卢亦成陈菊祥侯立军胡国汉骆纯
- 关键词：RNA干扰神经胶质瘤
- 脑胶质瘤术后化疗患者的护理被引量：4
- 2010年
- 目的总结脑胶质瘤术后患者化疗的不良反应及护理对策。方法回顾性总结2007年4月至2008年12月应用替尼泊苷、司莫司汀和替莫唑胺等行化疗的30例脑胶质瘤术后患者的临床资料,分析化疗过程中的不良反应及护理措施。结果 30例患者原有的高颅压症状消失,癫症状得到控制,精神症状和意识障碍均好转,偏瘫和偏身感觉异常改善。不良反应发生情况:恶心22例,呕吐6例,白细胞下降8例,血小板减少4例,口腔溃疡12例。结论治疗前做好心理护理,治疗过程中密切观察病情、及时处理药物不良反应,治疗结束后做好健康教育,可提高患者的治疗依从性,提高治疗效果。
- 晨曲彭丽莉童佳丽王冬梅王霞俞美定
- 关键词：脑胶质瘤替尼泊苷司莫司汀化疗护理
- RIZ1在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性被引量：4
- 2014年
- 目的研究视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指蛋白1（RIZ1）在不同级别脑胶质瘤组织中的蛋白表达水平以及其对患者预后的影响。方法应用免疫组织化学染色检测RIZ1和Ki-67在51例不同级别星型胶质细胞瘤中的蛋白表达情况。利用统计学方法分析RIZ1表达水平与患者临床病理学特征和预后的相关性。结果免疫组化染色显示RIZ1蛋白表达主要分布在细胞质，而Ki-67蛋白主要位于细胞核；低级别胶质瘤中RIZ1的表达[（48．83±4．34）％]高于高级别胶质瘤[（7．55±4．39）％]，差异有统计学意义（P〈0．0001）；RIZ1与Ki-67的表达负相关（r=-0．8130，P％0．0001）。Kruskal-Wa11is检验结果显示RIZ1的表达与肿瘤级别和患者年龄负相关（P〈0．05），Kap1an-Meier生存分析显示RIZ1的表达与患者无进展生存期和总生存期正相关（均P〈0．0001）；单因素分析提示RIZ1高表达和Ki-67低表达的患者预后较好，将单因素分析结果中P〈0．2的因素纳人多因素Cox回归分析发现，RIZ1的高表达是胶质瘤患者预后的保护因素（P=0．000，HR=0．164，95％CI：0．071～0．378）。结论RIZ1的表达随着胶质瘤病理级别的增高而降低，并与患者的预后明显相关，RIZ1可以作为胶质瘤治疗和判断预后的生物学依据。
- 张晨冉吴小军胡刘华贺华蒋磊胡国汉丁学华卢亦成
- 关键词：RIZ1神经胶质瘤临床病理学预后
- 儿童脑胶质瘤的化疗进展被引量：2
- 2013年
- 胶质瘤是儿童中枢神经系统最常见的肿瘤,侵袭性强,治疗难度大,预后差,复发率高。传统的手术治疗不仅并发症较多,且可能给病儿造成心理和认知障碍,放疗对小儿正在发育的神经系统及骨髓造血系统等有难以预测的影响。因此,化疗逐渐成为治疗儿童胶质瘤的重要手段。本文就儿童胶质瘤的特点和化疗方案进行论述,总结不同类型儿童胶质瘤的推荐化疗方案,并对所采纳研究的循证医学证据级别作了说明;安全性是儿童化疗中需着重解决的问题,延迟放疗、低剂量多次化疗和复发重复化疗等方案均证明对儿童是安全、有效的;化疗耐药机制方面的探索将进一步提高疗效,最终达到儿童胶质瘤的治愈。
- 林靖崔勇卢亦成
- 关键词：神经胶质瘤抗肿瘤联合化疗方案儿童
- ShRNA-AKT2对人脑胶质瘤U87细胞株增殖及凋亡的影响
- 2014年
- 目的研究通过慢病毒载体靶向抑制丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)基因表达对胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡的影响。方法利用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰载体感染U87细胞株,逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测转染后细胞株AKT2 mRNA和蛋白表达水平变化,四唑盐(MTT)法检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期改变。结果转染AKT2-shRNA可有效降低U87细胞株内的AKT2表达。干扰组细胞从第3 d开始增殖明显降低(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞的凋亡率为11.80%±1.83%,明显高于阴性对照组的2.01%±0.20%和未转染组的2.13%±0.32%(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞周期S期细胞百分比显著低于对照组,而G0/G1期细胞比分比显著高于对照组(P<0.05)。结论 AKT2-shRNA可抑制胶质瘤细胞株的增殖,并导致肿瘤细胞凋亡增加。
- 崔勇邹勇象王麒王君玉董艳胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词：胶质瘤增殖凋亡
- 基因芯片在脑胶质瘤研究中的应用
- 2011年
- 脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，占颅内肿瘤发病率的35％-50％左右。恶性脑胶质瘤具有侵袭性生长、新生血管生成、易复发、病死率高，1年生存率约为30％，5年生存率不足5％。传统治疗效果不理想，分子治疗为提高胶质瘤治愈率和改善患者生活质量带来了希望，
- 赵振宇卢亦成
- 关键词：恶性脑胶质瘤基因芯片新生血管生成原发性肿瘤侵袭性生长
- 基于生物信息学技术筛选影响胶质母细胞瘤化疗敏感性相关基因的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:应用生物信息学技术筛选影响胶质母细胞瘤(GBM)化疗敏感性的相关基因。方法:对2批胶质瘤患者BIOSTAR基因芯片进行分析。通过随访完善临床资料,筛选芯片中胶质母细胞瘤患者生存期长、短两组间的差异基因,明确差异基因参与的功能和通路,并构建与烷化剂相关基因的信号传导网络,结合芯片数据、患者预后和信号传导网络,筛选GBM化疗敏感性的相关基因。结果:两组芯片中间差异基因有503条。2批芯片的差异基因主要参与62项基因功能,主要参与31条信号传导通路。通过对差异基因功能、通路,烷化剂信号转导网络的分析,得到影响胶质母细胞瘤化疗敏感性的核心的差异基因IFNGR2、IL8、ITGA5、TNFRSF1B。结论:通过严谨的实验设计和科学的统计学判别,结合患者完整的生存资料,本研究成功地应用生物信息学技术对基因芯片的大量数据进行挖掘和分析,并筛选出了可能影响GBM患者预后和化疗药物敏感性的基因,为进一步功能实验和患者个体化治疗奠定了基础。
- 赵振宇卢亦成陈菊祥侯立军胡国汉骆纯
- 关键词：胶质母细胞瘤基因芯片生物信息学化疗敏感性
- AKT2基因短发夹结构RNA慢病毒载体的构建及鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的:构建丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体。方法:利用公用网站按照RNAi序列设计原则,设计RNAi靶点序列并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经MluI和ClaI进行酶切后的PLVTHM载体连接产生shRNA慢病毒载体。应用shRNA慢病毒载体转染293T细胞及U87细胞,测定病毒滴度,流式细胞仪测定U87细胞的转染效率,PCR及Western blot鉴定AKT2基因在U87细胞中的下调作用。结果:成功构建了shRNA-AKT2慢病毒载体,经测序与设计合成的靶向链完全一致。荧光显微镜下观察293T细胞感染效率大于90%,病毒滴度为3.59×107TU/ml;流式细胞仪测定对AKT2细胞的转染效率为86.93%。PCR测定shRNA载体感染U87细胞后AKT2的干扰效率为68%。Western Blot结果显示该慢病毒载体对AKT2的表达有较为显著的敲减作用。结论:成功构建了人胶质瘤细胞株AKT2基因RNAi慢病毒载体,为后续的体内外功能学试验创造了条件。
- 崔勇陈静王君玉王麒胡国汉骆纯卢亦成
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体
- RNAi技术及其在胶质瘤中的研究进展被引量：3
- 2014年
- RNA干扰（RNAinterference，RNAi）是一种在动植物中广泛存在的，由双链RNA（double—strandedRNA，dsRNA）介导的序列特异性基因沉默现象。由于RNA干扰可以抑制特定基因的表达，至今短短十几年的时间，
- 崔勇卢亦成
- 关键词：胶质瘤RNA干扰基因沉默
