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小鼠胚胎神经干细胞培养方法的改良、优化及鉴定: 2012年; 目的通过培养神经球来培养神经干细胞的方法是最常用的扩增神经干细胞方法。但是该方法的缺陷是神经干细胞在冻存和复苏的过程中死亡率高,不能达到高效地扩增神经干细胞的目的。本文章的实验目的是建立不通过培养神经球而直接扩增神经干细胞的方法。方法通过从小鼠大脑胚层组织中获取神经干细胞、如何传代以及冻存的步骤进行了优化比较并对复苏后的神经干细胞进行干性鉴定。结果通过比较使用胰蛋白酶、胰蛋白酶和核酸酶、木瓜酶在消化小鼠大脑皮层组织并获得神经干细胞的效率,发现使用胰蛋白酶获得的神经干细胞的数量最多,在质量上和其它两种方法没有明显的差异。在传代过程中,通过比较使用化学消化液和胰蛋白酶消化液,发现胰蛋白酶消化后的神经干细胞存活率比化学消化液高。结论使用收集的神经干细胞培养液和10%DMSO作为冻存液,神经干细胞的复苏存活率达到90%以上。复苏后的神经干细胞在传代两次后仍然高表达干性基因Sox2、Nestin和Pax6。; 马志昭王贺波范霖张庆九郑志鹏潘晓静; 关键词：神经干细胞胰蛋白酶神经球 NESTIN

用Fugene6制作高滴度慢病毒方法的优化比较被引量：2: 2011年; 针对实验室中比较普遍的包装的慢病毒滴度不高的问题,我们对慢病毒包装过程中的几个关键步骤进行了优化。采用Fugene6同时转染携带GFP的质粒和包装慢病毒所必需的包装质粒进入293T细胞中。通过使用荧光显微观察GFP的表达亮度及流式细胞技术测量GFP阳性细胞的比例来测定病毒滴度。通过优化Fugene6和DNA的比例,发现当Fugene6和DNA的比例是3:1时获得的慢病毒的滴度最高;通过对转染后收获病毒的时间的比较,发现转染48小时后回收所得到的慢病毒滴度最高。; 范霖马志昭高山峨路建伟李思光潘晓静; 关键词：慢病毒滴度

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河北省医学科学研究重点课题(20100313)