国家自然科学基金(30572276)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株新的重组人源过氧化氢酶基因工程菌的构建和遗传稳定性研究被引量：2
- 2011年
- 利用pPICZαA作为新的表达载体和表达宿主酵母Gs115,成功地构建了新的人源过氧化氢酶表达工程菌G13,并考察了新的工程菌G13的遗传稳定性。通过对新的重组菌整合质粒的酶切,PCR鉴定,及SDS-PAGE电泳、单抗dot-blot证实了该重组菌质粒构建正确,可以有效表达重组的人源过氧化氢酶。新的重组酵母菌G13在连续传代24次后,没有发生质粒的丢失现象,表达的过氧化氢酶活力稳定。
- 史训龙施志慧周伟叶丽朱海燕冯美卿周珮
- 关键词：毕氏酵母基因工程菌重组质粒
- 重组人源过氧化氢酶表达优化和纯化研究
- 2011年
- 研究了重组表达人源过氧化氢酶酵母菌株G13的发酵工艺和纯化方法。对接种量、生长期培养基、生长时间、诱导时间等因素进行了优化,并确立了10 L发酵罐的发酵条件。结果表明,菌体最高密度达到了0.15g/mL,比原重组菌株S4提高了1倍,人源过氧化氢酶表达量也由原来的平均600 U/mL提高到了1500U/mL。同时建立了二步法纯化该酶工艺,获得了电泳纯的人源过氧化氢酶。所得到的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,证实产物为人源过氧化氢酶。
- 史训龙施志慧周伟叶丽朱海燕冯美卿周珮
- 关键词：毕氏酵母纯化
