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国家自然科学基金(30572273)
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徐开林
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HSCs移植预处理对骨髓微环境损伤的研究
2010年
目的研究异基因造血干细胞(HSCs)移植预处理-清髓照射对受者骨髓微环境的损伤。方法20只BALB/C小鼠随机分为:正常对照组(10只);单纯照射组(10只),予8.5Gy照射,剂量率0.57Gy,距离2.33m。显微镜下计数外周血中白细胞的变化,流式细胞术分析外周血中内皮细胞(ECs)的变化;病理和电镜观察骨髓微环境的损伤。结果照射后外周血中白细胞减少,ECs升高,第5天达高峰,持续至第7天,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。照射后3d光镜下观察骨髓微环境中大量出血;电镜下ECs和基底膜间被损坏。结论移植预处理中的清髓照射可引起严重的骨髓微环境中内皮损伤。
丁爽
徐开林
鹿群先
闫志凌
陈翀
曾令宇
关键词:
照射
骨髓微环境
内皮细胞损伤
小鼠异基因造血干细胞移植中清髓照射对供者来源内皮祖细胞归巢的影响
2009年
目的研究异基因造血干细胞移植预处理因素——清髓照射对供者来源内皮祖细胞(EPCs)归巢的影响。方法密度梯度离心和差速贴壁法获取小鼠骨髓单个核细胞,EGM-2培养基培养,5~7d检测CD133^+CD31^+CD45^k/w表面标记及吸食Dil-Ac-LDL和结合FITC-UEA-1鉴定,并行羟基荧光素一醋酸盐琥珠酰亚胺酯(CFSE)标记。实验分组:正常组,正常+EPCs移植组,照射组,照射+EPCs移植组。流式细胞术(FCM)分析外周血、脾脏和骨髓中内皮细胞(ECs)、EPCs和CFSE阳性细胞比例;病理、电镜和免疫荧光分析各组织的损伤情况及CFSE标记EPCs的分布。结果流式细胞术鉴定内EPCs为CD45^k/wCD133^+CD31^+;Dil-ac-LDL^+、FITC-UEA-1^+。照射后短时间内循环中ECs即开始升高,第5d达高峰,持续到第7d,与正常组相比差异有统计学意义(P〈0.05);循环中EPCs照射后短时间内也增加,于第4d达到峰值,随后下降至正常水平,其增加与正常组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。照射后3d光镜下肝脏弥漫性的炎症浸润,小肠大量炎症细胞浸润;电镜下肝脏中血小板聚集到内皮下暴露的胶原上,小肠中ECs和基底膜间被损坏。照射+EPCs移植组,荧光显微镜下观察,移植后3h见CFSE阳性细胞归巢至损伤的肝脏和小肠,细胞少且不连续;36h细胞较多,且呈连续性。结论移植预处理中的清髓照射可引起严重的内皮损伤,该损伤启动了EPCs的动员,并驱动外源性EPCs归巢至损伤比较重的组织中。
丁爽
徐开林
闫志凌
陈翀
潘秀英
曾令宇
关键词:
照射
内皮祖细胞
归巢
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