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河北省科技支撑计划项目(052761990)
作品数:
1
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相关作者:
王俊霞
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尤红煜
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王俊霞
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2012
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顺铂联合树突状细胞疫苗对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用
被引量:5
2012年
目的探讨顺铂联合树突状细胞(DC)疫苗对荷瘤小鼠抗肿瘤作用的机制。方法用终浓度20μg/ml顺铂诱导体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡,提取凋亡细胞总蛋白。Westernblot法检测高迁移率蛋白B1(HMGB1)、热休克蛋白70(HspT0)和转化生长因子13(TGF-B)蛋白表达,流式细胞仪分析DCs表面主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCII)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和CD86的表达。制备荷瘤小鼠模型,腹腔注射顺铂(100μg/只),瘤内注射DC疫苗(3×10^6个/只),28d后处死荷瘤小鼠,分离肿瘤组织并称重。采用不连续梯度离心法分离肿瘤浸润淋巴细胞,流式细胞仪检测调节性T细胞(T—reg)和CD8+T细胞的分布,采用微量细胞毒方法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果顺铂可明显提高B16细胞HMGB1的表达水平。经顺铂诱导的B16凋亡细胞总蛋白负载DC细胞后,其MHCII、CD86+和ICAM-1的表达率分别为(47.5±8.8)%、(36.2.4-9.2)%和(35.5±8.3)%。在肿瘤移植的第28天,对照组瘤重为(2.1±0.6)g,顺铂组和顺铂联合DC疫苗组瘤重分别为(0.34-0.2)g和(0.5±0.2)g,顺铂组和顺铂联合DC疫苗组瘤重明显小于对照组(P〈0.01)。顺铂联合DC疫苗不仅提高了肿瘤组织中CD8+T/CD4+Foxp3+T细胞比值,还增强了CTL活性。在效靶比为20:1、10:1和5:1时,顺铂联合DC疫苗组荷瘤小鼠的CTL活性分别为(25.0±5.0)%、(22.0±6.0)%和(14.0±4.0)%,显著高于对照组的(8.2±3.6)%、(6.7±1.8)%和(3.6±1.9)%(均P〈0.01)。结论顺铂联合DC疫苗可下调肿瘤微环境的T—reg细胞,提高CTL活性协同发挥抗肿瘤作用。
尤红煜
连伟光
张焕铃
王俊霞
张开霞
宋淑霞
关键词:
黑色素瘤
顺铂
树突状细胞
小鼠
调节性T细胞
细胞毒性淋巴细胞
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