国家科技重大专项(2008ZX10003-005)
- 作品数：12 被引量：39H指数：4
- 相关作者：张宗德李传友贾红彦杜凤娇刘毅更多>>
- 相关机构：北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院北京市昌平区结核病防治所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种新型的表达PPE68蛋白的重组耻垢分枝杆菌载体疫苗的构建及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:构建一种新型的、含结核分枝杆菌(M.S)抗原PPE68的耻垢分枝杆菌载体疫苗。方法:以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组为模板,PCR方法获得Rv3873基因,然后通过克隆构建获得真核表达质粒pVAX-1-Rv3873,最后通过电转化的方法将pVAX-1-Rv3873真核表达质粒转化至耻垢分枝杆菌的感受态细胞中获得重组的耻垢分枝杆菌载体疫苗rM.S-PPE68。结果:成功构建了含结核分枝杆菌抗原PPE68的耻垢分枝杆菌载体疫苗。结论:该疫苗的构建为结核病的预防,尤其在高免疫保护作用的疫苗开发方面,提供了新的研究策略。
- 项杰张冠慧王艳萍徐涛席淑红樊毅
- 关键词：结核病疫苗耻垢分枝杆菌PPE68
- 结核分枝杆菌RD1区编码蛋白ELISPOT辅助诊断活动性结核病的应用价值被引量：5
- 2012年
- 目的比较E/C联合Rv3879c蛋白作为抗原的ELISPOT和T-SPOT.TB试剂盒,探讨其在活动性结核病诊断中的应用价值。方法选取初治结核病患者106例作为结核组4,3例肺部其它疾病患者做为疾病对照组和48例健康者做为健康对照组,应用T-SPOT.TB和ELISPOT检测受试者外周血单个核细胞的斑点形成细胞数量,同时对受试者行TST。结果 T-SPOT.TB和ELISPOT在结核病组中的敏感度分别为92.5%和93.4%,TST阴性对照组中的特异度均为91.5%,在健康者中的阳性率分别为18.8%和16.7%,且两种方法差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 E/C联合Rv3879c蛋白作为抗原的ELISPOT能够诊断活动性结核病,并为结核感染诊断提供一定的依据。
- 杜凤娇傅瑜吴雪琼李亮高静韬张宗德
- 关键词：结核分枝杆菌酶联免疫斑点技术
- 酶联免疫斑点术和流式细胞术检测γ干扰素对结核性胸膜炎的辅助诊断价值被引量：1
- 2011年
- 目的探讨胸腔积液PEMC中CD4＋T淋巴细胞分泌或产生IFN—γ的检测对结核性胸膜炎的辅助诊断价值。方法分离40例结核性胸腔积液（结核组）和30例恶性胸腔积液患者（疾病对照组）PELVIC，经克隆表达的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）融合蛋白（简称“E／C”）刺激后，用ELISpot检测分泌IFN—γ细胞的斑点形成细胞（SFC）数量和流式细胞术（FCM）结合胞内细胞因子染色检测产生IFN-γ细胞比率，并比较这2项指标在结核组和疾病对照组间的差异，同时评价2种方法检测IFN-γ对结核性胸膜炎的辅助诊断效能。结果PEMC经E／C刺激后用ELISpot检测结核组SFC数量为205（125-450）SFC／5×10^4PEMC，疾病对照组为5（2～18）SFC／5×10^4PEMC，两组间的差异有统计学意义（u=20．00，P〈0．01）；FCM检测结核组CD4＋T淋巴细胞产生1FN—Y细胞比率为3．27％（1．81％-7．34％），疾病对照组为0．12％（0．06％-0．46％），两组问的差异有统计学意义（U=45．00，P〈0．01）。ELISpot检测PEMC经E／C刺激后分泌IFN-γ的敏感度为92．5％（37／40）、特异度为80．0％（24／30）、阳性预测值为0．86、阴性预测值为0．89、阳性似然比为4．63、阴性似然比为0．09和准确度为87．1％；FCM检测经E／C刺激后产生IFN-γ的敏感度为87．5％（35／40）、特异度为90．0％（27／30）、阳性预测值为0．92、阴性预测值为0．84、阳性似然比为8．75、阴性似然比为o．14和准确度为88．6％。结论经E／C刺激后，用FCM和ELISpot检测CD4＋T淋巴细胞产生和分泌IFN—γ细胞的方法对结核性胸膜炎诊断的敏感度和特异度高，且对结核性胸膜炎有辅助诊断价值。
- 杜凤娇戈启萍韦攀健贾红彦邢爱英杜博平古淑香张宗德
- 关键词：胸膜免疫酶技术流式细胞术
- 糖基化与免疫被引量：7
- 2011年
- 蛋白质糖基化或聚糖影响免疫细胞和免疫分子的结构与功能,影响机体对抗原的应答反应。聚糖主要有三种免疫功能:首先,糖链对其所连接的糖蛋白起一定稳定作用,保护糖蛋白免受蛋白酶的降解、以及MHC:多肽复合体的装配及折叠等;其二,聚糖及其凝集素受体的相互作用在信号转导、抗原提呈、控制细胞发育与分化中起调控作用;第三,糖链的一些区域可作为抗原识别表位,调控固有免疫和适应性免疫应答。主要介绍了聚糖在抗原提呈和稳定、信号转导、免疫自稳、自身免疫、固有免疫和适应性免疫等中的功能,以及与免疫相关疾病,如炎症反应、自身免疫性疾病、肿瘤、器官移植排斥、感染性疾病和遗传性疾病的相关性。此外,针对聚糖和糖基转移酶的一些药物分子的治疗应用前景也将一并进行介绍。
- 章晓联
- 关键词：糖基化免疫聚糖凝集素免疫相关疾病
- 结核分枝杆菌对氨基水杨酸耐药相关基因的筛选及鉴定
- 2012年
- 目的筛选二线抗结核药物对氨基水杨酸（para-aminosalicylic acid，PAS）耐药相关基因。方法构建H37Rv转座子文库，筛选对氨基水杨酸耐药克隆，随机引物PCR扩增转座子插入突变基因。在PAS耐药菌株中鉴定耐药相关基因的突变情况。结果构建了较完整的H37Rv转座子文库，并筛选出201个PAS耐药克隆，经测序找到4个可能的PAS耐药相关基因。papA1基因检测到一个无义突变。结论酰基转移酶基因papA1可能为PAS耐药相关基因。
- 郑晓静杜博平贾红彦侯继增杨超高汉青杜凤娇邢爱英李自慧曹廷明张宗德李琦
- 关键词：耐药对氨基水杨酸基因
- 结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐受程度与gyrA基因突变的相关性分析被引量：3
- 2010年
- 目的以氧氟沙星为例,探讨阈值的划分对实验室早期检测出耐氧氟沙星结核分枝杆菌的影响。结合DNA序列分析探讨gyrA基因点突变与结核分枝杆菌对氧氟沙星耐受程度的相关性。方法 (1)在含氧氟沙星改良罗氏培养基上检测101株结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的敏感性。(2)测序以检测耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变的特征。结果 (1)52株耐氧氟沙星5.0μg/ml的临床分离株中,17株能在含氧氟沙星10.0μg/ml的改良罗氏培养基上生长(约占32.69%),49株对氧氟沙星5.0μg/ml敏感的临床分离株中,有2株能在含氧氟沙星2.0μg/ml的改良罗氏培养基上生长(约占4.08%)。(2)基因扩增产物测序发现;耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变主要发生第90、91和94位点上,有10株在不同的gyrA基因位点上发生了碱基缺失或插入的变异,101株被检测的结核分枝杆菌临床分离株中,发生在第95位点的碱基突变率为100%。结论 (1)判定耐药结核分枝杆菌上、下限的阈值对耐药结核菌的早期检出具有重要的作用。(2)发生在耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因上的点突变是多变的,但与结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐受程度没有明显的相关性。
- 张健源刘毅李妍张旭霞田苗高铁杰张治国任卫聪车南颖程君李传友
- 关键词：分枝杆菌结核氧氟沙星广泛耐药结核GYRA基因突变
- 结核分枝杆菌耐药机制的研究进展被引量：8
- 2010年
- 在人类的传染病中,结核病死亡率最高,每年约有200万人死于结核病;而且估计每年有920万的新发病例,更为严重的是全世界1/3的人口都感染过结核分枝杆菌.据WHO统计,目前全世界耐多药结核患者已占20%,而且这个数字在逐年递增.因此,明确结核分枝杆菌耐药机制不仅能够建立快速、灵敏、准确的检测方法,更重要的是能找到抗结核药物靶点,开发新的抗结核药物,控制结核病疫情,减轻患者的负担与痛苦.
- 孙勇李传友许绍发
- 关键词：结核分枝杆菌耐药机制细胞壁分子机制外排泵
- 耐药菌检测方法与广泛耐药结核菌早期发现的相关性分析
- 目的利用改良的结核菌细菌学检测法观察结核分枝杆菌对抗结核药物耐药的动态变化,以期寻找早期发现广泛耐药结核分枝杆菌的新方式。对比聚合酶链式反应及单链构象多态分析,印证改良的微生物学检测法在发现广泛耐药结核菌方面的可靠用途。...
- 张健源程君刘毅孙勇任卫聪姜晓颖车南颖郭志荣李传友
- 关键词：结核分枝杆菌
- 文献传递
- 观察改良的药物敏感性检测法对检出耐药结核分枝杆菌的影响被引量：2
- 2010年
- 目的利用经改良的最低抑菌浓度法(IMIC)检测结核分枝杆菌临床分离株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素和氧氟沙星的药物敏感性,观察其对耐药结核分枝杆菌检出的影响。方法利用改良的最低抑菌浓度法检测135株临床分离株对INH、RFP、EMB、SM及OFLX的敏感性。结果在相同的药物浓度中,与接种1×105/ml菌量的试验管相比135株接种1×107/ml活菌数的试管中有68.89%的结果与之相同,有31.1%的结果与之不相同。判断结果由阴性转阳性的标本共有20株,(其中耐RFP的1株、耐INH的3株、耐OFLX的3株、耐EMB的5株以及耐SM的8株)约占135株受试菌株总数的14.8%。结论利用改良的最低抑菌浓度法可发现潜在的耐药结核病患者,提高耐药菌的检出率。
- 张健源赵雁林孙照刚姜广路李妍王甦民刘毅聂理会高铁杰张治国任卫聪李传友
- 关键词：微生物敏感性试验
- 酶联免疫斑点术和流式细胞术检测γ干扰素对结核性胸膜炎的辅助诊断价值被引量：12
- 2011年
- 目的 探讨胸腔积液PEMC中CD＋4T淋巴细胞分泌或产生IFN-γ的检测对结核性胸膜炎的辅助诊断价值.方法 分离40例结核性胸腔积液（结核组）和30例恶性胸腔积液患者（疾病对照组）PEMC,经克隆表达的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）融合蛋白（简称＂E/C＂）刺激后,用ELISpot检测分泌IFN-γ细胞的斑点形成细胞（SFC）数量和流式细胞术（FCM）结合胞内细胞因子染色检测产生IFN-γ细胞比率,并比较这2项指标在结核组和疾病对照组间的差异,同时评价2种方法检测IFN-γ对结核性胸膜炎的辅助诊断效能.结果 PEMC经E/C刺激后用ELISpot检测结核组SFC数量为205（125 ～450）SFC/5×104PEMC,疾病对照组为5（2～18）SFC/5×104PEMC,两组间的差异有统计学意义（U=20.00,P〈0.01）;FCM检测结核组CD＋4T淋巴细胞产生IFN-γ细胞比率为3.27%（1.81%～7.34%）,疾病对照组为0.12%（0.06%～0.46%）,两组间的差异有统计学意义（U=45.00,P〈0.01）.ELISpot检测PEMC经E/C刺激后分泌IFN-γ的敏感度为92.5%（37/40）、特异度为80.0%（24/30）、阳性预测值为0.86、阴性预测值为0.89、阳性似然比为4.63和阴性似然比为0.09,准确性为87.1%;FCM检测经E/C刺激后产生IFN-γ的敏感度为87.5%（35/40）、特异度为90.0%（27/30）、阳性预测值为0.92、阴性预测值为0.84、阳性似然比为8.75和阴性似然比为0.14,准确性为88.6%.结论 经E/C刺激后,用FCM和ELISpot检测CD＋4T淋巴细胞产生和分泌IFN-γ细胞的方法对结核性胸膜炎诊断的敏感度和特异度高。
- 杜风娇戈启萍韦攀健贾红彦古淑香张宗德
- 关键词：胸膜免疫酶技术流式细胞术
