北京市自然科学基金(7063087)
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
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- 相关机构:解放军205医院军事医学科学院更多>>
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- 长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的研究被引量:3
- 2007年
- 目的:探讨用长链核酸扩增技术评价病毒灭活效果的可行性。方法:针对伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白gD基因前后的保守区设计预计产物长短不一的5对引物,用半巢式PCR技术扩增经低pH法(4.0±0.1)、巴氏消毒法(60±1.0)℃和S/D法(有机溶剂/洗涤剂)处理后的PRV核酸,同时以细胞感染法做平行对照。结果:低pH对PRV核酸有破坏作用,处理时间越长,核酸损伤程度越明显,处理60min时,6.62lgTCID50的PRV完全被灭活。5条不同长度PCR扩增产物中,只有3.9kb的长片段检出与细胞培养结果一致。7.25lgTCID50的PRV经(60±1.0)℃处理20min后即被完全灭活,7.13lgTCID50的PRV经S/D法处理1h后被完全灭活,但各长度核酸片段扩增均为阳性,与细胞感染试验结果不符。结论:低pH对PRV核酸的损伤程度随处理时间的延长而增加;用长链PCR(3.9kb)技术来评价经低pH法灭活病毒的效果是可行的,而该法不适合评价巴氏消毒法和S/D法灭活病毒的效果。
- 肖云贵张艳宇吕丽萍张援平马平周锡鹏姜升阳许金波
- 关键词:S/D法病毒灭活聚合酶链反应