浙江省教育厅科研计划(Y201223322) 作品数:9 被引量:25 H指数:4 相关作者: 杜照奎 钟章成 李钧敏 王江 徐自力 更多>> 相关机构: 台州学院 西南大学 杭州师范大学 更多>> 发文基金: 浙江省教育厅科研计划 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 更多>>
模拟酸雨对榉树生理特性的影响 被引量:2 2013年 选择2年生国家二级重点保护植物榉树为研究对象,设置4个酸雨梯度(pH值设为2.5、3.5、4.5、5.6,其中pH 5.6为对照),进行为期2.5个月的试验,研究不同强度的模拟酸雨对榉树气体交换参数、叶绿素含量和抗氧化酶活性等的影响。结果表明:随着胁迫酸雨pH值的减小,榉树叶片相对电导率和丙二醛(MDA)含量均升高,且二者呈显著正相关;净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)及蒸腾速率(Tr)均先升后降;胞间CO2浓度(Ci)呈逐渐降低;而气孔限制值(Ls)则逐渐增大;叶绿素a(Chl a)和叶绿素b(Chl b)的含量逐渐降低,但Chl a/Chl b无显著变化;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性呈先升后降的单峰曲线变化,其中pH 3.5处理的SOD活性最大,pH 4.5处理的CAT及POD活性最大。榉树叶片在pH 4.5时Pn值最大,抗氧化酶活性高,受到的伤害小,可以考虑作为华东地区园林绿化物种。 王松杰 杜照奎 徐能叶 张燕红 陈丹 许霞玲 林达关键词:模拟酸雨 榉树 生理 光合作用 抗氧化酶 花生AhRRF基因的克隆与原核表达 被引量:2 2015年 核糖体循环因子在蛋白质合成体系中发挥着重要作用,利用电子克隆和RT-PCR技术,从花生中克隆到1个核糖体循环因子基因,命名为AhRRF(Genbank登录号KF621303)。序列分析表明,该基因开放阅读框为837 bp,编码278个氨基酸,推测编码蛋白质的分子量为30.94 k D,等电点为9.63,无信号肽序列,AhRRF编码蛋白包含4个α-螺旋、6个β-折叠和一些无规则卷曲结构。系统发生分析结果表明,AhRRF编码蛋白与蒺藜苜蓿、鹰嘴豆、大豆和菜豆的核糖体循环因子具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果显示,AhRRF基因在花生的叶、花、根和幼果中均有表达,但叶中表达量最高,花中最低;UV-B辐射处理1 h时叶中的表达量显著上升,为对照的3.43倍,之后开始下降,24 h时显著低于对照。将构建的重组质粒p ET28a-AhRRF转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导重组蛋白RRF的表达,SDS-PAGE检测表明,重组蛋白的分子量大小约为30 k D,其大小与推测的大小一致。本研究为进一步探索UV-B辐射对花生分子机理的影响奠定基础。 杜照奎 李钧敏关键词:花生 克隆 原核表达 花生RuBPCase小亚基基因的克隆与序列分析 2014年 根据已知植物的核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Ru BPCase)小亚基基因序列设计简并引物,采用RTPCR技术从花生叶片中克隆得到Ru BPCase小亚基基因,命名为Ahrbc S,Genbank登录号为KF607110,该基因编码区长度为549 bp,编码182个氨基酸。序列比对结果表明,Ahrbc S编码蛋白与绿豆、菜豆、大豆、短绒野大豆和烟豆等具有较高的相似性。 徐自力 应濠泽 余佳宁 祝锦晶 梁莉佳 沈广圳 张丽娜 杜照奎关键词:花生 克隆 不同光强下龙葵对镉的吸收积累及生理响应 被引量:2 2012年 采用土培方法探讨了不同光强(自然光和50%遮光)和镉(Cd)不同添加量(0、25、50、75和100 mg/kg)复合处理下,龙葵对Cd的吸收累积特征,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性以及叶绿素、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和植物螯合肽(PCs)含量等的变化特征。结果表明,自然光条件下龙葵叶绿素b、叶绿素a+b以及地上和地下部Cd富集量均显著低于遮光处理;叶和根的SOD、POD、CAT和APX活性在自然光条件下随土壤Cd添加量的增大先升后降,而在遮光处理下则持续升高;除Cd 25 mg/kg处理时根POD及叶CAT活性在不同光强处理下没有显著差异外,其余Cd添加量处理下SOD、POD、CAT和APX活性在自然光条件下均显著高于遮光处理;自然光条件下龙葵叶和根的MDA含量显著高于遮光处理,而叶和根的GSH含量和叶中PCs含量均显著低于遮光处理。研究结果表明,遮光环境促进了龙葵对Cd的富集,并且减轻了Cd对龙葵的氧化胁迫。 杜照奎 王江关键词:镉 光强 抗氧化酶 植物螯合肽 花生对 UV-B 辐射增强的光合生理响应 被引量:5 2014年 该文研究了在接受增强强度为54μW/cm2的UV-B辐射处理3d后(每天处理8h),花生幼苗光合作用相关参数和叶绿体超微结构的变化.结果表明:在UV-B处理3d结束后,叶绿素a和叶绿素(a+b)均显著下降,同时气体交换参数也受到显著影响,表现出净光合速率(Pn)降低了35.42%,气孔导度(Gs)和气孔限制值(Ls)分别下降了28.12%和20.25%,而胞间CO2摩尔分数(Ci)却上升了16.22%,较对照有显著性差异.同样,荧光参数Fv/Fm和Fv/F0均显著降低.但UV-B处理1d和2d后,以上各指标的变化与对照差异不显著.透射电子显微镜(TEM)图像显示,叶绿体膜肿胀、基质类囊体解体,光合化产物淀粉粒数目和大小减少.叶绿体超微结构的变化可能是叶绿素体积质量分数和光合速率降低的重要原因. 杜照奎 钟章成关键词:花生 UV-B辐射增强 气体交换 叶绿素荧光 花生苹果酸脱氢酶基因的克隆及其蛋白序列分析 被引量:1 2014年 根据已知植物的苹果酸脱氢酶基因序列设计简并引物,采用RT-PCR技术从花生叶片中克隆得到苹果酸脱氢酶基因,命名为Ah MDH,Genbank登录号为KF499119,该基因编码区长度为1071bp,编码356个氨基酸。序列比对结果表明,Ah MDH编码蛋白与大豆、蒺藜苜蓿和豌豆等具有较高的相似性。 汪巧英 应濠泽 余佳宁 祝锦晶 徐自力 杜照奎关键词:花生 苹果酸脱氢酶 克隆 生态学野外实习教学改革与实践探索 被引量:4 2013年 分析了生物科学专业当前生态学野外实习存在的问题,并结合从精选实习基地、加强教师队伍建设、改善实习设备、培养学生科研能力等方面提出教学改革措施,并建议在实习时间与实习内容、实习广度与实习深度、学习知识与生态保护方面进行适当平衡。 杜照奎 王江关键词:生态学 野外实习 教学改革 花生叶片蛋白组对UV-B辐射增强的响应 被引量:5 2014年 为揭示UV-B辐射增强处理降低花生光合速率和花生抵御UV-B辐射增强的分子机制,应用蛋白质双向电泳与质谱联用技术对自然光环境下补增UV-B辐射(54μW/cm2)处理24h的苗期花生叶片差异表达蛋白质变化进行了分析。结果表明:补增UV-B处理下,花生叶片中共检测到丰度变化在2.5倍以上的差异表达蛋白点39个(其中22种蛋白质表达下调,17种表达上调),经过MALDI-TOF-TOF分析及数据库检索,成功鉴定出其中的27种蛋白质。被鉴定的27种蛋白质按其功能大致可归为8类,第Ⅰ类:光合作用相关的蛋白质,包括质体蓝素、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基、放氧复合物增强子蛋白1、PsbP结构域蛋白6和果糖二磷酸醛缩酶;第Ⅱ类:糖代谢相关蛋白质,包括苹果酸脱氢酶;第Ⅲ类:能量合成相关蛋白质,包括ATP合酶;第Ⅳ类:氨基酸代谢相关蛋白质,包括半胱氨酸合成酶;第Ⅴ类:蛋白质加工相关蛋白质,包括热激蛋白;第Ⅵ类:蛋白质翻译相关蛋白质,包括核糖体循环因子;第Ⅶ类:防御相关蛋白质,包括几丁质酶、过氧化物酶、Cu-Zn超氧化物歧化酶、二羟肉桂酸3-O-转甲基酶和类萌发素蛋白;第Ⅷ类,未知功能蛋白质。这些研究结果为进一步研究花生抵御UV-B辐射的分子机理提供了有意义的线索。 杜照奎 李钧敏 钟章成 董鸣关键词:UV-B 花生 蛋白组学 双向电泳 质谱 花生幼苗对UV-B辐射增强的生理生化响应 被引量:5 2014年 以"小京生"花生幼苗为材料,通过大田栽培试验,旨在探明花生对增强的UV-B辐射(54μW/cm2)响应的生理生化机制.结果表明:在补增UV-B辐射处理下,叶片相对电导率,超氧阴离子(O·-2)、类黄酮和可溶性蛋白质的含量,以及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性较对照显著升高;超氧化物歧化酶(SOD)活性先显著升高后降低;过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)、抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量,以及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性没有显著变化.可见增强的UV-B能显著提高花生叶片内的活性氧(ROS),O·-2是对花生产生氧化胁迫的主要因素,花生幼苗主要通过提高类黄酮含量以及SOD,CAT和POD活性来抵制ROS的胁迫,AsA-GSH循环系统在花生清除ROS中效果不明显. 杜照奎 李钧敏 钟章成关键词:花生 紫外线B 抗氧化酶